摘要:目的:探讨温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病(SSc)皮肤成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响. 方法:36例SSc患者随机分为中药组(口服温阳化浊通络方)、西药组(口服青霉胺和强的松)、中西药组(口服青霉胺、强的松及温阳化浊通络方),每组各12例,治疗1个月制备含药血清.另取10例未治疗的SSc患者血清作为对照组.各组血清分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中.培养72小时后,Western blot法测定皮肤成纤维细胞TGF-β1Ⅰ型受体(TGF-β1RⅠ)、TGF-β1Ⅱ型受体(TGFβ1RⅡ)、p-Smad2/3和Smad7蛋白的表达,RT-PCR检测SSc皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达,ELISA法测定SSc皮肤成纤维细胞培养上清液中MMP-9、TIMP1含量. 结果:与对照组比较,西药组、中药组和中西药组均不同程度的降低SSc患者和正常人皮肤成纤维细胞TGF-β1RⅠ、p-Smad2/3蛋白水平,升高Smad7蛋白水平(P<0.05,P<0.01),同时中西医结合组还降低TGF-β1RⅡ蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,中药组、中西药组对上述指标改善更加明显(P<0.05,P<0.01).在SSc皮肤成纤维细胞中,西药组、中药组和中西药组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.01),中西药组显著低于西药组(P<0.01).同时中药组、中西药组MMP-9、TIMP-1表达水平明显优于对照组(P<0.05,P<0.01). 结论:温阳化浊通络方含药血清能够通过调控SSc皮肤成纤维细胞TGF-β.1/Smad信号通路中关键分子——TGF-β1RⅠ、p-Smad2/3、Smad7的表达,干预TGF-β1/Smad信号通路传导,减少ECM堆积,改善SSc纤维化.