胸苷磷酸化酶

摘要： 目的 研究胸苷磷酸化酶(TP)、血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶的表达水平及临床意义。方法选择2014年1月至2016年12月在本院接诊的58例大肠癌淋巴结转移患者进行研究。通过免疫组织化学方法,检测大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶中VEGF、TP的表达情况。结果 原发灶中癌细胞VEGF的阳性表达率为20.69%(12/58)与转移灶中VEGF的阳性表达率24.14%(14/58)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。TP在原发灶低表达阳性率和高表达阳性率分别为5.17%(3/58)和94.83%(55/58),在转移灶分别为3.45%(2/58)和96.55%(56/58)。TP在原发灶与转移灶的表达率均大于90%,差异无统计学意义(P>0.05)。在原发灶及淋巴结转移灶中TP的阳性表达率均明显高于VEGF的阳性表达率,差异有统计学意义(P0.05)。在12例预后较好的病例中,原发灶炎症反应明显,间质细胞TP表达明显,淋巴结转移灶中癌细胞VEGF不表达。结论 大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶之间癌细胞的TP、VEGF表达水平之间无明显差异,TP表达水平在间质细胞及炎症细胞中可能预测癌细胞对化疗反应。

摘要： 目的 研究大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶中胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗敏感性的关系.方法 收集2010年1月至2012年3月间上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院诊治的有淋巴结转移的大肠腺癌患者;通过免疫组织化学方法,检测VEGF和TP在大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶中的表达,共观察33例.结果 大肠癌原发灶中癌细胞TP及VEGF的阳性表达率与相应淋巴结转移灶中的表达无显著差异;7例预后较好的病例中,原发灶中间质细胞TP表达明显,淋巴结转移灶中癌细胞VEGF不表达.结论 大肠癌原发灶和相应淋巴结转移灶之间癌细胞的TP、VEGF表达水平无显著差异;对于有淋巴结转移的大肠癌,癌细胞TP表达水平不能预测而间质细胞及炎症细胞的TP表达水平可能预测癌对以5-FU为基础的化疗反应.

摘要： 目的:本研究旨在探讨卡培他滨为基础一线方案治疗Her2阴性转移性乳腺癌的单中心回顾性研究及TYMP基因多态性分析。方法:本研究为回顾性分析,入组患者为2010年1月到2017年12月期间在首都医科大学附属北京天坛医院乳腺科和肿瘤科确诊为Her2阴性的且接受卡培他滨为基础一线治疗的转移性乳腺癌患者共215例。收集患者的外周血液进行基因分型,并进行mRNA表达测定和相关性分析,电话随访获取患者预后数据。用Kaplan-Meier生存分析方法分析不同基因型和预后的关联,用Cox模型对其他变量进行校正。结果:纳入分析的TYMP的遗传变异位点经过NCBI数据库查阅在中国人群中突变频率大于10%,在预后分析上发现1412C>T位点的关联性。1412C>T位点在本研究中的突变频率为:CC基因型137例(63.72%),CT基因型70例(32.56%),TT基因型8例(3.72%),最小等位基因频率为0.20,符合HW平衡(P=0.798)。以显性遗传的方式把CT和TT基因型合并,对两组基因型患者进行预后分析发现:CT/TT和CC基因型患者的客观缓解率(ORR)分别为56.41%和40.15%(P=0.021),疾病控制率分别为85.90%和72.99%(P=0.029),中位无进展生存期(mPFS)分别为11.5和7.6个月(P=0.001)。另外,两组基因型患者的中位总生存期(mOS)分别为26.6和24.7个月(P=0.022)。针对PFS构建多变量的Cox模型校正后,CT/TT基因型仍然是PFS的独立影响因素(OR=0.56,P=0.011)。87例癌组织标本的mRNA表达分析结果表明CT/TT基因型患者相对于CC型患者,癌组织中TYMP的mRNA表达明显较高(PT位点是卡培他滨作为基础化疗药物在一线治疗Her2阴性转移性乳腺癌患者疗效的预测因子。

摘要： Objective: To inrestigate the association between thymidine phosphorylase (TYMP) polymorphisms and efficacy of postop-erative capecitabine-based adjuvant chemotherapy in colorectal cancer (CRC) patients. Methods: Two hundred and thirty-five patients with colorectal cancer who received surgical treatment and adjuvant chemotherapy between January 2010 and December 2016 from People's Hospital of Zhengzhou, were included in this study. Peripheral blood and postoperative tissue specimens of the CRC patients were collected for genotyping polymorphisms and measuring TYMP mRNA expression, respectively. The correlation between the poly-morphisms and efficacy of postoperative chemotherapy in CRC patients was analyzed. Results: The prevalence of 5633C>T in TYMP gene among the CRC patients was as follows: CC genotype, 149 cases (63.40%); CT genotype, 73 cases (31.06%); and TT genotype, 13 cases (5.54%); the minor allele frequency of 5633C>T was 0.21. Survival analysis of the patients revealed that the median overall sur-vival (OS) of patients with the CT/TT genotype and those with the CC genotype was 5.9 and 4.5 years, respectively; the result was sta-tistically significant (P=0.009). Following adjustment in multivariate Cox regression analysis, the CT/TT genotype was found to be an in-dependent favorable factor for OS (HR=0.67, P=0.015). Additionally, of the 87 postoperative tissue specimens, results show that the levels of TYMP mRNA in cancer tissues of patients with the CT/TT genotype were significantly higher than those with the CC genotype (P=0.019). Conclusions: TYMP mRNA expression may be influenced by the 5633C>T polymorphism, making CRC patients benefit from capecitabine treatment.%目的:本研究旨在探讨胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TYMP)基因多态性对R0术后结直肠癌(colorectal cancer, CRC)患者接受卡培他滨为基础的辅助化疗疗效的影响.方法:本研究纳入2010年1月至2016年12月在郑州人民医院行R0切除术后接受辅助化疗的CRC患者235例.收集患者外周血及术后癌组织标本分别进行TYMP多态性位点基因分型及TYMP基因表达测定,并对纳入研究患者的疗效进行关联性分析.结果:TYMP基因5633C>T位点在CRC患者中的分布频率为:CC型149例(63.40%),CT型73例(31.06%),TT型13例(5.54%),最小等位基因频率为0.21.单变量的生存分析结果显示:携带T等位基因的CT/TT型患者和野生型CC型患者的中位总生存期(overall survival,OS)分别为5.9和4.5年,差异具有统计学意义(P=0.009).经过多变量的Cox模型校正之后发现CT/TT基因型患者对OS有独立的影响(HR=0.67,P=0.015).另外,进一步在87例癌组织标本的mRNA表达分析中发现,突变的CT/TT型患者癌组织中TYMP的mRNA表达显著高于CC型患者(P=0.019).结论:TYMP基因5633C>T位点可能通过影响该基因mRNA的表达进而使CRC患者从卡培他滨的治疗中获益.

摘要： 目的:研究HIF-1α、TP、VEGF在乳腺癌组织中的表达及其与癌组织生长、浸润及转移的关系.方法:选取2016-06～2017-10在本院进行手术治疗的乳腺癌患者86例,采用免疫组化法检测86例手术切除的乳腺肿瘤组织和20例正常乳腺组织中HIF-1α、TP、VEGF水平,分析其与癌组织浸润深度、淋巴结转移情况的相关性.结果:HIF-1α在乳腺肿瘤组织和正常乳腺组织中的阳性表达率分别为59.3％、5.0％,TP在乳腺肿瘤组织和正常乳腺组织中的阳性表达率分别为46.5％、0,VEGF在乳腺肿瘤组织和正常乳腺组织中的阳性表达率分别为48.8％、10.0％,差异均具有统计学意义(P＜0.01).另外,HIF-1α、TP、VEGF在乳腺肿瘤组织中的表达与分化程度密切相关,在低分化患者中,三者的阳性表达高于高、中分化患者(P＜0.05);TNM分期Ⅲ期患者阳性表达显著高于Ⅰ期、Ⅱ期患者(P＜0.05);淋巴结转移患者组织中的阳性表达高于无转移患者(P＜0.05);肿瘤组织浸润深度为T3+T4的患者,三者的阳性表达高于Tis+T1和T2的患者(P＜0.05).结论:乳腺癌组织中HIF-1α、TP、VEGF均呈阳性表达,且三者与乳腺癌组织的发生、浸润、转移密切相关.

摘要： 目的 探讨胸苷磷酸化酶(TYMP)的基因遗传变异对R0切除术后结直肠癌(CRC)患者接受辅助化疗疗效及安全性的影响.方法 本研究为回顾性分析,纳入235例术后接受辅助化疗的CRC患者.收集患者外周血及术后癌组织标本分别用来进行TYMP多态性位点基因分型及TYMP基因表达测定,并对纳入研究患者的疗效和安全性进行相关性分析.结果 位于上游区域的5633C＞T位点和预后有关联.TYMP基因的5633C＞T位点在CRC患者中的突变频率为:CC型149例(63.40％),CT型73例(31.06％),TT型13例(5.54％),最小等位基因频率为0.21,三种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡(P=0.313).单变量的生存分析结果显示:携带突变基因的CT/TT型患者和野生型CC型患者的中位总生存期(OS)分别为5.8和4.5年,差异有统计学意义(P =0.009).经过多变量的Cox模型校正之后发现CT/TT基因型患者较好的预后影响意义依然存在(HR =0.67,P =0.015).另外,进一步在87例癌组织标本的mRNA表达分析中发现,突变的CT或TT型患者相对于野生型的CC型患者,癌组织中TYMP的mRNA表达明显较高,差异有统计学意义(P =0.019).安全性分析结果表明5633C＞T位点CT/TT型患者3级手足综合征的发生率高于野生型CC型的患者(33.72％比20.13％,OR=1.68,P=0.021).结论 TYMP基因5633C＞T位点可能通过影响TYMP基因mRNA的表达从而影响接受辅助化疗的CRC患者的预后.%Objective To study the association between Thymidine Phosphorylase (TYMP) genetic variation and clinical outcomes and safety of postoperative colorectal cancer (CRC) patients.Methods A total of 235 patients with colorectal cancer underwent surgical treatment were included in this retrospective analysis.Peripheral blood and the postoperative tissue specimen of the CRC patients were collected for the genotyping of polymorphism and TYMP mRNA expression,respectively.The correlation between polymorphism and clinical outcomes and safety of postoperative CRC patients were analysed.Results Located in the upstream,5633C ＞ T was of clinical significance.The prevalence of 5633C ＞ T in TYMP among the CRC patients were as follows:CC genotype 149 cases (63.40％),CT genotype 73 cases (31.06％),TT genotype 13 cases (5.54％),minor allele frequency of 5633C ＞ T is 0.21.The distribution of three genotypes was in accordance with Hardy-Weinberg Equilibrium (P =0.313).CT genotype and TT genotype patients were merged in the comparison of prognosis.The survival analysis of patients with different genotypes found that the median Overall Survival (OS) of CT/TT genotype and CC genotype were 5.8 and 4.5 year,which was statistically significant (P =0.009).Adjusted in multivariate Cox regression analysis,CT/TT genotype was an independent favorable factor for OS (HR =0.67,P =0.015).Additionally,of the 87 postoperative tissue specimens,the results showed that the expression of TYMP in cancer tissues of the patients with CT or TT genotypes were significantly higher than those of the wild type CC genotype patients (P =0.019).And the safety analysis showed that the incidence of grade 3 hand-foot syndrome among CT/TY genotype patients were higher than that of CC genotype patients (33.72％ vs 20.13％,OR =1.68,P =0.021).Conclusion The polymorphism 5633C ＞ T of TYMP may impact the prognosis of CRC patients received adjuvant chemotherapy by influencing the mRNA expression of TYMP.

摘要： 胸苷磷酸化酶(Thymidine Phosphorylsae，TP)是嘧啶核苷磷酸化酶家族成员之一，是合成DNA及细胞生长的必需酶。近年来，有报道显示，TP在多种实体肿瘤中过度表达，并与肿瘤新生微血管形成、临床病理特征及肿瘤化疗有关。然而，迄今为止，在人脑胶质瘤中T的表达情况、与微血管的关系及其临床意义仍缺乏较为深入的认识。本研究利用免疫组织化学的方法检测58例不同级别胶质瘤中TP的表达水平，并分析其与微血管密度及各临床病理参数之间的相互关系。

摘要： 胸苷磷酸化酶(TP)是嘧啶和核苷代谢过程中的关键酶,近年发现其具有肿瘤血管新生作用,并与肿瘤病人的预后转归密切相关。同时TP还是5'-脱氧氟尿苷(5'-DFUR,商品名氟铁龙)抑制肿瘤细胞生长的关键转化酶。目前TP在结直肠癌细胞中是否表达尚无定论,但因其对肿瘤血管新生及增进5'-DFLlR治疗效果的双重作用而倍受临床关注。本文对TP在结直肠癌组织中的表达与5'-DFUR细胞内激活、治疗的研究现状进行综述。

摘要： 目的探讨TP在口腔鳞癌基质中的表达与临床病理学参数的关系,进一步推断其对口腔鳞癌转移及预后的影响.方法采用免疫组化方法检测TP和FⅧRAg在52例口腔不同部位(舌、口底、颊黏膜、牙龈)和10例正常口腔黏膜标本中的表达.结果TP在口腔鳞癌基质中的表达明显高于正常口腔黏膜组织(P<0.05).TP在口腔鳞癌基质中的表达与口腔鳞癌的临床分期、肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移有关(P<0.05),而与组织分化无关.结论TP在口腔鳞癌中有促血管形成的作用,TP可能在口腔鳞癌的发展过程中起重要作用.

摘要： 本发明提供新型类芽孢杆菌属微生物、新型麦芽糖磷酸化酶、以及新型海藻糖磷酸化酶，所述新型类芽孢杆菌属微生物具有生产麦芽糖磷酸化酶和海藻糖磷酸化酶的能力；所述新型麦芽糖磷酸化酶仅作用于麦芽糖，对麦芽糖中的α-1，4-吡喃葡萄糖苷键进行可逆性加磷酸分解；所述新型海藻糖磷酸化酶仅作用于海藻糖，对海藻糖中的α-1，4-吡喃葡萄糖苷键进行可逆性加磷酸分解。本发明还提供上述新型麦芽糖磷酸化酶以及新型海藻糖磷酸化酶的制造方法。与以往的方法相比，采用该制造方法容易获得所述的酶，还能够大幅度地缩短培养时间；所得酶具有较高的温度稳定性，而且两种酶具有几乎相同的最适pH范围。

摘要： 本发明提供新型类芽孢杆菌属微生物、新型麦芽糖磷酸化酶、以及新型海藻糖磷酸化酶，所述新型类芽孢杆菌属微生物具有生产麦芽糖磷酸化酶和海藻糖磷酸化酶的能力；所述新型麦芽糖磷酸化酶仅作用于麦芽糖，对麦芽糖中的α－1，4－吡喃葡萄糖苷键进行可逆性加磷酸分解；所述新型海藻糖磷酸化酶仅作用于海藻糖，对海藻糖中的α－1，4－吡喃葡萄糖苷键进行可逆性加磷酸分解。本发明还提供上述新型麦芽糖磷酸化酶以及新型海藻糖磷酸化酶的制造方法。与以往的方法相比，采用该制造方法容易获得所述的酶，还能够大幅度地缩短培养时间；所得酶具有较高的温度稳定性，而且两种酶具有几乎相同的最适pH范围。

摘要： 本发明提供一种更有效、更安全的癌症治疗药，其为含有摩尔比为1∶0.5的α，α，α－三氟胸苷(FTD)和5－氯－6－(1－(2－亚氨基吡咯烷基)甲基)尿嘧啶盐酸盐的组合物，该治疗药用FTD换算量为20～80mg/m

摘要： 本发明涉及一种利用大肠杆菌发酵生产胸苷磷酸化酶的方法，属于生物工程领域。本发明通过表达胸苷磷酸化酶突变体，能有效提高单位菌体的总酶活，可有效降低抗爱滋病药物中间体β‑胸苷的生产成本。只要一般的发酵车间（如氨基酸、维生素生产车间）即可进行投入生产，不需购置特殊设备，易于推广应用。

摘要： 本发明涉及一种胸苷磷酸化酶蛋白突变体，属于生物工程领域。以来源于大肠杆菌的MG1655的胸苷磷酸化酶蛋白为基础，通过PCR技术获得了一种胸苷磷酸化酶蛋白突变体，其发酵上清液在pH7.4条件下，酶活达到3.6U/mg，是突变前胸苷磷酸化酶蛋白的10倍，可有效降低抗爱滋病药物中间体β‑胸苷的生产成本。生产条件要求简单，易于推广应用。

摘要： 本发明涉及人工合成的编码胸苷磷酸化酶蛋白的基因及其应用，属于生物工程领域。通过使用本发明的优化后的基因序列，来表达胸苷磷酸化酶突变体，能有效提高单位菌体的总酶活，可有效降低抗爱滋病药物中间体β‑胸苷的生产成本。只要一般的发酵车间（如氨基酸、维生素生产车间）即可进行投入生产，不需购置特殊设备，易于推广应用。

摘要： 本发明具体公开了5‑氯‑6‑(1‑(2‑亚氨基吡咯烷基)甲基)尿嘧啶盐酸盐的一种新的结晶形式，并公开了其制备方法；该晶型具有稳定性好、结晶度高、易于制备等优点，能够作为胸苷磷酸化酶抑制剂用于制备治疗结直肠癌的药物。

摘要： 本申请涉及胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体制备领域，公开了一种胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体的制备方法，其包括以下步骤：(1)在硫脲的混合醇碱溶液中加入氰乙酸乙酯，回流反应5～6小时，降温结晶，过滤，用乙醇/二氧六环混合液洗涤；(2)将吡啶和氨水混合，加入兰尼镍、ZnSO4和步骤(1)的所得物，在65～75°C下加热反应7～8小时，趁热过滤，降温结晶，过滤，洗涤；(3)将步骤(2)的所得物加入混合碱溶液中，在45～55°C下缓慢加入2‑溴乙醛，反应4～5小时，降温结晶，过滤，洗涤，干燥。根据本申请的制备方法提高了胸苷磷酸化酶抑制剂的前药中间体4‑羟基吡咯并[2,3‑d]嘧啶的总收率。

摘要： 本发明涉及一种人的胸苷磷酸化酶突变蛋白及其应用，通过将大量癌症患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的胸苷磷酸化酶的突变蛋白，根据该人的胸苷磷酸化酶的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为癌症的基因诊断提供指引作用，并为疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。

摘要： 本发明涉及人工合成的编码胸苷磷酸化酶蛋白的基因及其应用，属于生物工程领域。通过使用本发明的优化后的基因序列，来表达胸苷磷酸化酶突变体，能有效提高单位菌体的总酶活，可有效降低抗爱滋病药物中间体β‑胸苷的生产成本。只要一般的发酵车间（如氨基酸、维生素生产车间）即可进行投入生产，不需购置特殊设备，易于推广应用。