84K杨

摘要： [目的]ERF(ethylene response factor)转录因子家族基因能够调控植物应答高盐等逆境胁迫,参与植物生长发育等生物学过程.RAP2L14是ERF转录因子家族重要成员,本研究旨在探究其在杨树生长及应答盐胁迫过程中的功能.[方法]利用RT-qPCR及转录组测序技术分析'84K杨'(Populus alba×P.glandulosa)转录因子RAP2L14基因应答盐胁迫表达模式.从'84K杨'中克隆RAP2L14基因,对RAP2L14基因编码氨基酸序列及上游2000 bp区域启动子结构进行生物信息学分析,构建RAP2L14-RNAi植物表达载体,使用农杆菌叶盘介导法获得转基因84K杨,鉴定表明获得5个RAP2L14-RNAi抑制表达杨树转基因株系.并对盐胁迫条件下转基因株系基础生长指标进行分析.[结果]RAP2L14基因cDNA全长465 bp,共编码154个氨基酸,其表达受盐胁迫诱导.RAP2L14基因上游2000 bp启动子序列含有ABRE、ARE、CGTCA-motif等11个逆境胁迫相关作用元件.盐胁迫后,RAP2L14-RNAi转基因株系的生根率及株高明显低于对照,且生根起始时间推迟了2 d.[结论]杨树ERF转录因子基因RAP2L14为盐胁迫相关基因,其抑制表达提高了转基因株系对于盐胁迫的敏感性,限制了根的发生.本研究为揭示ERF转录因子在杨树分子育种及应答逆境胁迫方面提供候选基因及基础材料.

摘要： [目的]研究拟南芥甲基化转移酶基因AtMET1在银腺杨84K(Populus alba×P glandulosa'84K')中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系、进而实现杨树品种改良等奠定基础.[方法]以白杨派优良品种84K杨的无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtMET1基因导入84K杨基因组中;经潮霉素筛选获得抗性植株,通过常规PCR检测、DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定.通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源基因AtMET1表达量变化.[结果]本研究共获得了潮霉素抗性芽648个,经生根筛选获得18株抗性植株,经分子检测证实全部为转基因植株,分别标号为AM-1～18#.qRT-PCR结果显示:化学诱导剂17-β-雌二醇处理3h时,目的基因AtMET1的表达量即达到最大值,随后在处理6h时表达量下降,处理12h时有所回升,处理24 h后表达量降低至不足12h时的一半.[结论]化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtMET1基因的表达,为进一步研究MET1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为今后杨树化学诱导表达研究及品种改良提供新思路、新方法.

摘要： 【目的】DNA甲基化是一种重要的表观遗传标记,在植物生长发育、环境响应等过程中发挥重要作用。本研究将拟南芥去甲基化基因AtDME1导‘84K’杨基因组中,通过化学诱导表达实验,研究AtDME1基因在转基因杨树中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系,进而实现杨树品种改良等奠定良好基础。【方法】以白杨派优良品种84K杨无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtDME1基因导入‘84K’杨;经过潮霉素筛选、常规PCR检测及DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定。通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用qRT-PCR检测处理叶片中外源基因AtDME1的表达量变化。【结果】本研究中,潮霉素分化筛选共获得了抗性芽224个,经生根筛选获得6株抗性植株,经分子检测证实这6株抗性植株均为转AtDME1基因植株,扩繁后分别标号为转基因AD-1~6。qRT-PCR检测结果显示,化学诱导剂17-β-雌二醇处理3 h时,目的基因AtDME1的表达量基本达到最大值,效果持续至12 h后逐渐减弱。【结论】化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtDME1基因的表达,为进一步研究DME1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为杨树化学诱导表达特性的研究做好了铺垫。

摘要： 以 84K 杨为材料,扩增其基因组 DNA 第 1 个外显子序列,设计 2 个 gRNA 靶点,利用酶切连接 方法将其连入 sgRNA 克隆框,利用巢式 PCR 技术扩增获得包含 2 个靶点的表达盒扩增产物,进一步使用 Bsa I 内切酶线性化 pYLCRISPR/Cas9-DH 载体,并使用 T4 DNA 连接酶连入表达盒扩增产物,成功构建杨树 DCL1 基因编辑载体 pYLCRISPR/Cas9-DH–PtDCL1。

摘要： 以杨品种'84K'(Populus alba×P.glandulosa)为材料,对其干旱胁迫及复水后光合生理特性的变化进行了研究.结果显示,在干旱胁迫及复水过程中,杨品种'84K'光合作用相关的主要反应对此过程响应不同步.在干旱胁迫过程中,'84K'的羧化反应速度、 气孔导度(Gs)、 叶肉导度(Gm)均显著下降,但前者下降幅度小于后两者,此时的光合作用主要受Gs和Gm制约.复水之后,Gm很快得到恢复,而光化学淬灭过程、 羧化反应速度均没有恢复到对照水平,此时是光化学淬灭和(或)羧化反应制约了'84K'的碳固定及光合作用.

摘要： 木质素作为木材的主要组成成分,通常是由3种单体聚合而成,在其生物合成过程中,共有10个酶家族参与负责将苯丙胺酸转化为单体木质素,其中C3H是在对-香豆酰辅酶A(p-coumaroyl CoA)到咖啡酰辅酶A(caffeoyl CoA)的羟基化过程和G/S单体形成中的关键控制酶类,探究PagC3H3基因表达模式,对于进一步了解该基因功能具有重要意义。该研究通过定量PCR对PagC3H3基因的组织特异性表达进行分析;克隆得到了长度为2035bp的PagC3H3的启动子序列,预测含有多个顺式作用元件;同时,将获得的PagC3H3的启动子序列构建植物表达载体pBI121-PagC3H3pro::GUS,进行拟南芥瞬时转化,结果显示PagC3H3基因在84K杨的根、中部茎节和基部茎节中的表达量较高;瞬时转化拟南芥,GUS染色表明:在下胚轴和根中GUS活性较强,由此推测PagC3H3基因在木质素合成过程中发挥作用。

摘要： 木质素是木材的重要组成成分,主要起机械支持、水分运输及防御病虫害等作用。4CL酶是控制木质素合成途径中的关键酶之一。利用PCR技术从84K杨幼叶cDNA中克隆得到Pag4CL3/4CL5基因,GenBank登录号分别为MK183033(Pag4CL3)及MK183034(Pag4CL5)。利用生物信息学软件,对这两个基因的功能和特征进行分析。结果发现84K杨中4CL3/4CL5蛋白与毛果杨中4CL3/4CL5蛋白相似度高达97%;此外,均含有SSGTTGLPKGV和GEICIRG两个保守基序;亚细胞定位预测显示Pag4CL3/4CL5蛋白主要定位在内质网中,推测可能是一种膜蛋白;蛋白的亲水性预测Pag4CL3/4CL5均为亲水性蛋白。通过qRT-PCR分析Pag4CL3/4CL5在不同组织部位中的表达差异,结果发现Pag4CL3在叶及茎中表达量较高,在根和顶芽中表达量较低;Pag4CL5在叶及根中表达量较高,在茎和顶芽中表达量较低,两个同源基因表达具有组织部位的差异性。Pag4CL3和Pag4CL5可能在叶中共同行使功能,Pag4CL5主要在根中行使功能,Pag4CL3主要在茎中行使功能。

摘要： 以84k杨成熟叶片为外植体,诱导愈伤组织及不定芽的分化,经过壮苗、生根过程获得再生植株,建立了84k杨组织培养和快速繁殖技术新体系.结果表明:最佳叶片不定芽诱导培养基 MS+6-BA 0.8mg/L+NAA 0.1mg/L,诱导率100%,平均丛生芽数为15.06;最佳壮苗培养基为MS+IBA 0.6mg/L+6-BA 0.1mg/L;最佳生根适宜培养基为MS+IBA 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L,生根率100%;将生长良好的组培苗移栽并扣瓶培养1周,成活率达97%.%In the paper, in vitro culture of poplar 84k were studied by using leaf explants, adventitious shoot dif-ferentiation, seedling culture and plantlet regeneration. The results indicated that MS+6-BA 0.8mg/L+NAA 0.1mg/L was the suitable medium for inducing leaf adventitious bud, with an induction rate of 100%, average bud number of 15.06; MS+IBA 0.6mg/L+6-BA 0.1mg/L was the optimizing medium for strong seedlings; MS+IBA 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L was the best medium for rooting, the rooting rate could reach to 100%. The strong rooting plantlets were transplanted into nutritive soil and covered the young plants with culture bottle for a week, the survival rate were 97%.

摘要： [Objective] This study cloned salicylic acid-binding protein 2 (SABP2) from 84K poplar and predicted its functions.[Method] The total RNA was isolated from foliage and stem of culture seedlings of 84K poplar with 5 leaves.The primers were designed according to the full CDs sequence of Populus trichocarpa SABP2 gene (Accession number:XM_002310718.2).The SABP2 full length of 84K poplar was amplified using RT-PCR.The product of PCR was ligated to pGM-T cloning vector and transformed into TOP10 competent cells chemically.Then,clone was obtained and sequenced.Bioinformatics analysis was also conducted by various online software.[Result] The full length cDNA sequence was 822 bp.The ORF was 789 bp,coding 263 amino acids.Bioinformatics analysis showed that the gene had 11 protein binding sites,and was homologous to populus tomentosa (JQ086570.1) with similarity of 98％.It was also a hydrophilic lipase belonging to the fold hydrolase super family.[Conclusion] The SABP2 gene of 84K poplar was cloned successfully.The predicted functions were consistent with previous research on herbs.%[目的]克隆84K杨水杨酸结合蛋白2(Salicylic acid-binding protein 2,SABP2)基因并预测其功能.[方法]以生长至5片小叶的84K杨组培苗为材料,提取其叶和茎的总RNA.根据毛果杨SABP2基因(GenBank序列号:XM_002310718.2)的完整CDs序列,设计84K杨SABP2基因的引物,采用RT-PCR技术扩增84K杨SABP2基因全长,然后连接到pGM-T克隆载体,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,对84K杨SABP2基因进行克隆,获得该基因的全长序列.通过各种在线软件对84K杨SABP2基因及其编码的蛋白质进行生物信息学分析.[结果]84K杨基因的cDNA序列全长822 bp,开放阅读框789 bp,编码263个氨基酸.生物信息学分析表明,84K杨SABP2与毛白杨SABP2(GenBank序列号:JQ086570.1)的同源性最高,达98％;84K杨SABP2基因位于微体中;SABP2蛋白有11个蛋白质结合位点,属于α/β折叠水解酶家庭成员中的酯酶,为亲水性蛋白.[结论]成功克隆了84K杨的SABP2基因,其功能与前人对草本植物中SABP2部分功能的研究结果一致.

摘要： 本发明为一种计算机汉字八四码输入法及键盘，属于计算机数据输入方法和数据输入装置领域。八四码由八位码和四位码组成，八位码也称八四形声码，按汉字书写顺序对汉字拆字编码，编码方法简单易学、重码少；四位码也称八四同步码，按汉字的拼音规则对汉字编码，操作者易于掌握，可实现并行输入，输入速度快。两套编码可单独或混合使用，在专用键盘上输入时速度更快。八四码可输入简体字、繁体字和异体字，也可作为准拼音文字使用。

摘要： 本发明公开了一种八四内弧环超重力机旋转填料床，包括外壳、转子和喷淋管，外壳内安装有转子，转子包括支撑盘、支撑环、固定螺杆、八四内弧环、钢丝圈和锥轴套，支撑盘一侧同轴设置有支撑环，支撑环与支撑盘通过固定螺杆连接，固定螺杆上设有多个八四内弧环，八四内弧环的内侧和外侧均通过钢丝圈固定，支撑盘靠近支撑环一侧的侧壁中部同轴设置有锥轴套，转子上方的外壳上加工有气相进口，支撑环一侧的壳体上加工有气相出口，喷淋管安装在气相出口内，转子下方的外壳上加工有液相出口。本发明通过设置八四内弧环，可实现转子转动时液相与气相在八四内弧环中形成良好的气液混合，以便于气体在液相中能被更好的分散。

摘要： 本发明为一种计算机汉字八四码输入法及键盘,属于计算机数据输入方法和数据输入装置领域。八四码由八位码和四位码组成,八位码也称八四形声码,按汉字书写顺序对汉字拆字编码,编码方法简单易学、重码少;四位码也称八四同步码,按汉字的拼音规则对汉字编码,操作者易于掌握,可实现并行输入,输入速度快。两套编码可单独或混合使用,在专用键盘上输入时速度更快。八四码可输入简体字、繁体字和异体字,也可作为准拼音文字使用。

摘要： 本发明涉及杨克烘罩装置(1)，其具有：第一温度主供应管道(9、9’)，用于处于第一温度T1的诸如热空气、或热空气和蒸汽和/或水蒸汽的流体；及第二温度主供应管道(10、10’)，用于处于不同于T1的第二温度T2的诸如热空气、或热空气和蒸汽和/或水蒸汽的流体，第一温度和第二温度主供应管道(9、9’、10、10’)与分配器管道(8)连通，使得诸如热空气的流体能从第一温度和第二温度主供应管道(9、9’、10、10’)流到分配器管道(8)，其中，至少一个分配器管道(8)设置有阻尼装置(31)，所述阻尼装置用于改变从第一温度主管道流入分配器管道中的处于温度T1的流体的量与从第二温度主管道流入分配器管道中的处于温度T2的流体的量之间的比率。

摘要： 本实用新型公开了一种八四内弧环超重力机旋转填料床，包括外壳、转子和喷淋管，外壳内安装有转子，转子包括支撑盘、支撑环、固定螺杆、八四内弧环、钢丝圈和锥轴套，支撑盘一侧同轴设置有支撑环，支撑环与支撑盘通过固定螺杆连接，固定螺杆上设有多个八四内弧环，八四内弧环的内侧和外侧均通过钢丝圈固定，支撑盘靠近支撑环一侧的侧壁中部同轴设置有锥轴套，转子上方的外壳上加工有气相进口，支撑环一侧的壳体上加工有气相出口，喷淋管安装在气相出口内，转子下方的外壳上加工有液相出口。本实用新型通过设置八四内弧环，可实现转子转动时液相与气相在八四内弧环中形成良好的气液混合，以便于气体在液相中能被更好的分散。

摘要： 本实用新型公开了一种八四消毒液超声波混合装置，包括桶主体，桶主体上设置有用于混合桶主体内物料的超声波发生器，桶主体具有一桶盖，桶盖具有一用于容纳物料的腔体，桶盖上设置有用于添加原材料且与腔体连通的进料口，腔体上具有一出料口，和一能够开启或者关闭出料口的阀门，腔体上设置有用于计量物料的计量刻度，阀门包括贯穿腔体和桶盖，且下端穿过出料口的固定杆，固定杆上端设置有第一滑块，下端设置有第二滑块，第二滑块与出料口抵接，固定杆外且与第一滑块和第二滑块之间缠绕有一弹性件，弹性件上端与第一滑块抵接底面抵接，弹性件下端与腔体底部抵接，以控制阀门关闭。

摘要： 本实用新型公开了一种八四内弧环填料，包括由上至下依次平行间隔设置的三个环体，所述三个环体均由内凹段和外凸段依次交错连接而成，所述三个环体竖向设置有八根连接所述三个环体的竖筋，所述竖筋设置在所述三个环体上的外凸段上，所述八根竖筋的中间位置设有上十字加强筋和下十字加强筋，所述上十字加强筋和所述八根竖筋中的四根竖筋相连接，所述下十字加强筋和所述八根竖筋中的另外四根竖筋相连接，所述上十字加强筋和下十字加强筋上下交错设置成米字形状。本实用新型能够使气液接触充分，比表面积大，传质效率高。

摘要： 本实用新型公开了一种八四内弧环填料，它包括位于奇数层的外层筋片(2)和位于偶数层的内层筋片(3)，每层的外层筋片(2)和内层筋片(3)均为四个，每个外层筋片为向外凸的弧形筋片，每个内层筋片为内凹的弧形筋片；相邻的外层筋片之间设有竖向筋片(1)，内层筋片通过筋片(1)相连。本实用新型具有大通量、小阻力、高传质效率、高强度等优点。

摘要： 一种双面八四编织面料,采用精梳棉纱纺织成平面双层结构,其正面层每组由8个机圈组成,而反面层每组为4个机圈,采用跳跃式织造结构,并与正面层交织结合,在正面层与反面层之间形成空气层,因此本实用新型具有保暖性好的优点,彻底解决了普通面料制作衬衫穿着时有凉感或不舒适、超静电等方面的问题。

摘要： 本实用新型设计了一种八四内弧扁环填料,填料的高径比为0.3—0.7,该填料在填装时排列规则趋于规整化,具有一定的规整填料的效应,因此,具有较高的传质效率,和较低的阻力降,可广泛用于各种操作条件下的蒸馏,吸收,气提、萃取等传质操作。