体胚发生

摘要： 菠萝(Ananascomosus)具有很高的食用、药用及观赏价值,但存在种子萌发率低、遗传转化困难、基因编辑体系缺乏等问题,其基础研究及优质种苗规模化繁育亟需高效、可靠的离体再生系统。本文对菠萝离体再生外植体选择、外植体消毒、基本培养基筛选、直接不定芽发生、间接不定芽发生、体细胞胚胎发生、不定根诱导及炼苗移栽等方面的研究进展进行综述,以期为菠萝细胞工程育种、遗传资源改良及种苗工厂化生产提供理论与技术参考。

摘要： 为了探讨外源过氧化氢(H_(2)O_(2))对水曲柳体胚发生过程中外植体内部抗氧化物质、抗氧化酶、一氧化氮(NO)等的影响,以成熟水曲柳子叶胚为外植体诱导体胚发生,通过对体胚发生过程中不同时间段的外植体取材,测定其内部生理变化,分析外源H_(2)O_(2)对水曲柳内部生理生化的影响。结果表明:外源H_(2)O_(2)的添加,对水曲柳体胚发生过程中还原性抗坏血酸(ASA)的质量摩尔浓度的影响主要在中后期阶段(42 d),且H_(2)O_(2)添加组高于对照组2.14%,对还原性谷胱甘肽(GSH)的影响在前期阶段(14 d),H_(2)O_(2)添加组是对照组的3.23倍;外源H_(2)O_(2)处理提高外植体H_(2)O_(2)的质量摩尔浓度,在14 d时,外源H_(2)O_(2)处理和对照的H_(2)O_(2)质量摩尔浓度相差较大,H_(2)O_(2)添加组是对照组的3.77倍;外源H_(2)O_(2)处理降低了丙二醛(MDA)质量摩尔浓度,且在7 d时,对照组显著高于H_(2)O_(2)添加组23.40%;外源H_(2)O_(2)前期降低一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)活性,后期对其起促进作用;外源H_(2)O_(2)处理对硝酸还原酶(NR)的作用与一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)活性完全相反。因此外源H_(2)O_(2)对水曲柳体胚发生中外植体抗氧化的各生理指标具有阶段性的影响。

摘要： 植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,具备发育成完整植株的遗传能力,这被称为植物细胞的全能性。体细胞胚胎(体胚)发生是指在没有受精的情况下,由体细胞或营养细胞发育成胚胎,是诱导植物细胞全能性的一种形式。体胚发生在种质资源保存、种苗生产、分子育种和植物基础研究等方面都有着广泛的应用,已成为重要的植物生物技术工具和研究平台。多年来的分子遗传学研究表明:体胚发生受到由众多转录因子、激素信号途径及表观遗传修饰等构成的复杂网络的调控。本研究概述了植物体胚发生的途径,并重点综述了体胚发生关键基因的功能与调控机制、体胚发生的表观遗传修饰以及体胚发生关键基因在基因工程中的应用。随着研究的深入和新技术的出现,体胚发生过程中涉及的代谢组分动态变化、转录调控、激素信号转导与表观遗传调控等复杂生物学过程有望得到更深入地阐释,将更进一步地解析植物体胚发生的分子调控机制。此外,利用体胚发生关键基因的功能与调控机制,开发更高效的体胚诱导和遗传转化方法,有望为更多植物的基因功能研究和遗传改良提供新的思路和技术。参81。

摘要： [目的]探明不同基因型橡胶树的体胚发生能力差异,为优化橡胶树不同品种体胚发生体系提供理论基础。[方法]以国家橡胶树种质资源圃保存的32个橡胶树主栽品种及其亲本为材料,通过系谱分析明确品种间的遗传关系,并以花药作为外植体诱导愈伤组织并进一步诱导体胚发生,结合体胚诱导率和遗传关系分析不同基因型体胚发生能力的差异。[结果]对32个橡胶树品种进行系谱分析表明:PR107、GT1、PB86、Tjirl、海垦1、天任31-45、合口3-11这7个品种为初生代无性系,其余25个品种中的23个与以上7个初生代无性系中的1~3个存在亲缘关系,表明我国橡胶树主栽品种亲本来源狭窄。结合系谱和体胚发生结果分析表明:橡胶树品种的体胚发生能力与亲本来源密切相关,亲本体胚发生能力决定其子代品种体胚发生能力。父母本均为难诱导体胚发生品种时,其杂交后代多数难诱导体胚发生;父母本中含1个易诱导体胚发生品种,即使另1个亲本为难诱导体胚发生品种时,其杂交后代多数体胚发生效率高,但这些后代间体胚发生频率差异显著,且存在超亲现象,推测橡胶树体胚发生是由多基因参与控制的。GT1、天任31-45、93-114和RRIM513等为难诱导体胚发生品种,以其为亲本来源的杂交后代多数难以诱导体胚发生(如云研77-2、云研77-4、云研73-46、保亭1-285、湛试32713、热研217),而PB86、RRIM600、热研88-13和海垦1等为易于诱导体胚发生品种,以其为亲本之一的杂交后代多数体胚发生效率高(如大丰95、海垦2、热研917、热研73397、热研879、热研918、徐育3、徐育141-2)。[结论]本研究发现,橡胶树体胚发生能力存在明显的基因型差异,且这种差异可遗传。依据体胚诱导率和遗传关系,本文将橡胶树亲本的体胚形成率同子代的诱导率结合进行分析并分组,为利用基因型分组优化橡胶树栽培品种的体胚发生体系提供了依据。

摘要： [目的]研究碳源种类及浓度对体胚诱导的生理调节机制,可为百子莲体胚发生体系优化提供参考.[方法]研究了不同浓度(2％、3％、4％)蔗糖、葡萄糖、麦芽糖对百子莲体胚诱导及发育成熟的影响,并测定了体胚发育成熟期糖代谢、内源激素、氧化胁迫等生理指标.[结果]蔗糖对百子莲体胚发生的效果较好,其次为葡萄糖,麦芽糖较差;在幼胚诱导阶段,3％蔗糖效果较好,胚性细胞诱导数为117.33个/g;在成熟胚发育阶段,2％蔗糖效果较好,幼胚发育成熟胚51.75个/g.碳源对体胚发育糖代谢、激素代谢及氧化胁迫具有显著调节作用.淀粉与蔗糖之间的代谢平衡对百子莲成熟胚发育可能具有决定作用;高浓度的IAA、GA对成熟胚发育不利;H2O2含量和SOD活性增强对成熟胚发育不利.[结论]2％蔗糖为百子莲成熟胚发育的较佳碳源,淀粉与蔗糖间的转化、IAA、GA为限制百子莲成熟胚发育的主要因子,可为技术优化和体胚发生理论的研究提供参考.

摘要： 组蛋白去乙酰化是植物表观遗传调控的重要组成部分,对染色体结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用.为深入探究组蛋白去乙酰化酶基因(histone deacetylase 1,HDT1)在龙眼体胚发生过程中的功能,该研究结合龙眼基因组数据,采用RT-PCR方法克隆得到龙眼组蛋白去乙酰化酶基因(DlHDT1),对其进行生物信息学分析及亚细胞定位观察,同时结合转录组数据分析DlHDT1在体胚发生过程中的FPKM值,并利用qRT-PCR技术检测PEG6000和NaCl处理下DlHDT1的表达模式.结果表明:(1)DlHDT1基因CDS序列全长918 bp,编码305个氨基酸,该蛋白为不稳定亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜结构,共含43个磷酸化位点,相对分子量为32 585.54 Da,等电点为4.65;进化树分析显示龙眼D1HDT1与漾濞槭亲缘关系最近(78.76％).(2)亚细胞定位显示,DlHDT1蛋白定位于细胞核中;顺式作用元件分析发现DlHDT1基因含有大量光响应元件和脱落酸、茉莉酸甲酯等激素及逆境胁迫响应元件;转录组数据显示,DlHDT1在龙眼体胚发生不同时期均有表达,在胚性愈伤组织(EC)阶段表达最低,在球形胚(GE)阶段表达最高.(3)qRT-PCR显示,在PEG6000和NaCl处理下DlHDT1基因,呈下调表达趋势,推测DlHDT1可能参与调控龙眼对干旱及盐胁迫的响应,并存在负调控关系.研究认为,DlHDT1为核定位基因,可能参与龙眼体胚形态建成并在龙眼响应非生物逆境胁迫过程中发挥重要作用.

摘要： 表观遗传过程,如DNA甲基化,在调控植物的生长发育和体细胞胚胎(SE)的正常发生中起着关键作用.植物体细胞胚胎发生是一个细胞分化与器官形态建成的过程,植物体细胞胚胎发生体系可作为研究胚胎发育特别是早期胚胎发育的良好替代体系.本研究利用植物体细胞胚胎发生体系分析了DNA甲基化水平对龙眼球形胚发生的影响,并采用实时荧光定量技术检测了不同浓度5-氮胞苷(5-azac)与2,4-D处理下龙眼Argonaute基因家族(DlAGOs)的相对表达水平.结果发现:(1)当2,4-D浓度为0.1 mg/L时,对照组以及5-azac浓度为5和25μmol/L的处理组均有球形胚产生,而5-azac浓度为25μmol/L处理组中龙眼球形胚更典型,数量更多;(2)2,4-D浓度为0.5 mg/L时,只有5-azac为5μmol/L处理组中有球形胚产生;(3)DlAGOs在不同浓度5-azac和2,4-D处理下具有不同的表达模式,5-azac浓度为5μmol/L能显著诱导DlAGO4的表达.这些研究结果表明,5-azac作为甲基化抑制剂,适宜浓度的5-azac能抑制2,4-D的甲基化作用,降低龙眼胚性愈伤组织的DNA甲基化水平,促使龙眼球形胚提前发生,同时,DNA甲基化水平降低能够促进DlAGO4的表达.以上的研究结果为龙眼体胚发生过程中的DNA甲基化机制研究奠定了理论基础.

摘要： [目的]探究沿阶草体细胞胚诱导及快繁技术.[方法]以3份沿阶草种质Nanus、Arabicus和Wild为试验材料,研究不同外植体、不同光照条件、不同植物激素配比对愈伤组织诱导、体细胞胚发生和体细胞胚成熟的影响.[结果]3份沿阶草种质中,幼茎和叶基为外植体时,愈伤组织诱导率均为最高;以沿阶草叶基为外植体,黑暗条件下的愈伤组织诱导率最高;2,4-D是沿阶草愈伤组织诱导与初生体细胞胚的发生关键激素,而NAA和6-BA与次生体细胞胚形成、体细胞胚成熟相关,其中将初生体细胞胚置于添加0.5 mg/L NAA和2.0 mg/L 6-BA的MS固体培养基培养25 d,可获得8～13倍的次生体细胞胚;将成熟的体细胞胚转入MS0培养基培养30 d可获得具有根和叶的完整植株.[结论]该研究可为沿阶草规模化繁殖和推广提供技术支撑.

摘要： 以暴马丁香成熟胚为外植体进行愈伤组织和体胚发生诱导,通过调节诱导培养基中植物生长调节剂的种类和浓度,分析其对愈伤组织诱导和体胚诱导的影响,同时对培养过程中的外植体进行形态发生观察和生理状态分析。结果表明:①暴马丁香成熟胚外植体培养30 d可见直接体胚发生、60 d可见子叶型体胚;②BA在愈伤组织诱导过程中起到了主导作用,在0.5 mg·mL^(-1)BA和5~6 mg·mL^(-1)NAA组合下,愈伤组织诱导率可达100%;在0.5 mg·mL^(-1)BA和5 mg·mL^(-1)NAA组合体胚诱导率可达8%;③多酚含量在愈伤组织形成初期急剧上升且在培养过程中保持较高水平,子叶型胚期PAL和POD活性升高、MDA和SOD活性略下降。

摘要： 【目的】研究多胺[腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)]对愈伤组织增殖及体胚诱导的作用,为揭示多胺在荔枝离体再生中的功能提供依据。【方法】采用单因素试验设计,分别在愈伤组织增殖及体胚诱导过程中添加多胺及其合成抑制剂[D-精氨酸(D-Arg)、环己胺(Cha)],比较不同处理下妃子笑荔枝愈伤组织增殖及体胚诱导差异。【结果】低浓度多胺或高浓度多胺合成抑制剂促进愈伤组织增殖,愈伤组织增殖量达显著水平,胚性愈伤组织(EC)与非胚性愈伤组织(NEC)颜色状态界限更加明显。与对照相比,经过多胺处理增殖的愈伤组织乳白胚诱导数及萌发率均降低,而多胺合成抑制剂处理增殖的愈伤组织乳白胚诱导数及萌发率随着多胺合成抑制剂浓度升高而升高,当Cha质量浓度为200 mg·L^(-1)时,乳白胚数量最多,达960个·g^(^(-1)),萌发率29.41%;当D-Arg质量浓度为700 mg·L^(-1)时,乳白胚萌发率最高,为32.35%,胚数量为450个·g^(-1)。体胚诱导培养基上添加多胺及其合成抑制剂对体胚诱导作用差异较大,Spd促进体胚发生作用较明显,当Spd质量浓度为20 mg·L^(-1)时,乳白胚数量为590个·g^(-1),萌发率为30.30%。体胚发生培养基上添加Cha或高浓度D-Arg抑制体胚发生,而添加低浓度D-Arg则促进体胚发生。【结论】在愈伤组织增殖培养基上添加3种多胺可促进愈伤组织增殖并保持胚性,且抑制原胚发生,而Cha及高浓度D-Arg促进原胚发生。体胚诱导培养基中添加低浓度Spd促进体胚分化。

摘要： 本文综述了辣椒离体培养中营养器官与合子胚外植体体胚发生研究进展,讨论了外植体种类、基础培养基、植物生长调节剂以及其他添加物质、培养条件和预处理以及外源基因等对体胚发生的影响,并对今后的研究进行了展望.

摘要： 本研究以采用基因枪转化法,将外源htp和gus(uid A)基因转入荔枝(Litchi chinensis Soon.)晚熟优良品种‘下番枝’,并经筛选得到的荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(Transgenic resistant embryogenic calli,TREC)细胞系为材料,进行高频率原生质体再生培养和体胚发生研究.研究结果表明：荔枝转基因抗性胚性愈伤组织分离的原生质体,在M12培养基(修改的MS附加1.0 mg·L-12,4-D+0.2 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-1 BA+0.2 mg·L-1 KT+250 mg·L-1谷氨酰胺+50 ml·L-1CW(椰乳)+0.45 M葡萄糖和0.1 M蔗糖)上,以3.0×105个/mL的培养密度,采用海藻酸盐包埋悬浮方式进行暗培养,原生质体的分裂频率可高达18.78%.植板率达22.30%,小克隆形成频率达3.24%.获得的转基因愈伤组织原生质体来源的5个愈伤组织抗性细胞系中：抗性细胞系PQ811、PQ81.535为大量稳定表达GUS类型;PQ9221、PQ9223、PQ1016均为稳定不表达GUS类型.转基因原生质体来源的愈伤组织在T1(附加1.0 mg·L-12,4-D、2%蔗糖和0.7%琼脂的MS培养基)、T3(附加0.1 mg?L-1NAA、3.5 mg·L-1ZT、100 mg·L-1肌醇、5%蔗糖和1.0%琼脂的MS培养基)、T10(附加50 ml?L-1椰乳、5%蔗糖和1.0%琼脂的MS培养基)培养基上,采用分步培养诱导的方法可以诱导高频率体胚发生,并再生植株.

摘要： 本文以东方百合栽培品种'Sorbonne'、'Siberia'、'Tiber'的试管苗鳞片和叶片为外植体,研究了6-BA0.3～2.0 mg/L、KT0.5～2.0 mg/L、NAA0.1～2.0 mg/L、2,4D0.5～2.0 mg/L、ZT0.1～0.5 mg/L对器官发生的影响;以'Tiber'的愈伤组织为外植体探讨了6-BA0.2～1.5 mg/L、2,4-D0.5～2.0 mg/L对体胚发生的影响;以三种东方百合的试管苗为材料,研究了激素与蔗糖浓度对瓶内小鳞茎增重的影响.结果表明:高浓度的激素有利于叶片分化不定芽,6-BA能提高鳞片上不定芽的分化频率,2,4-D能诱导'Tiber'的愈伤组织形成体细胞胚,高蔗糖浓度对瓶内小鳞茎增重起重要作用.

摘要： 以东方百合栽培品种‘Sorbonne’、‘Siberia’、‘Tibcr’的试管苗鳞片和叶片为外植体，研究了6-BA0.3～2.0 mg/L、KT0.5～2.0mg/L、NAA0.1～2.0mg/L、2.4.D0.5～2.0mg，L、ZT0.1～0.5mg/L对器官发生的影响；以‘1Iiber’的愈伤组织为外植体探讨了6.BAO.2～1.5mg，L、2，4-D0.5～2.0mg/L对体胚发生的影响；以三种东方百合的试管苗为材料，研究了激素与蔗糖浓度对瓶内小鳞茎增重的影响。结果表明：高浓度的激素有利于叶片分化不定芽，6-BA能提高鳞片上不定芽的分化频率，2，4-D能诱导‘Tiber’的愈伤组织形成体细胞胚，高蔗糖浓度对瓶内小鳞茎形成起重要作用。

摘要： 以花曲柳合子胚单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400 mg·L-1水解酪蛋白、0.25 mg·L-16-BA、1.5 mg·L-1NAA、70 g·L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可诱导产生体胚,诱导率34.7％.成熟合子胚的子叶在添加0.25 mg·L-1 6-BA、2 mg·L-1 NAA的MS1／2培养基(其他成分同上)上可诱导产生体胚,诱导率10.0％。体胚在MS1／2培养基上经过成熟培养后可正常萌发,萌发率87.6％。萌发的体胚植株在MS1／2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征.炼苗后的体胚苗移植到栽培基质中(草炭土：蛭石：珍珠岩为5：4：1)可正常生长,成活率为75.0％。

摘要： 本文介绍了近10年来我们在龙眼、荔枝体细胞胚胎发生的细胞与分子生物学以及相关应用的研究结果.由龙眼幼胚或花药培养,获得了可长期保持、具有强烈体胚发生能力的松散型胚性愈伤组织系(FEC).由龙眼FEC建立了目前木本植物最为优良的体胚发生模式实验系统,胚性悬浮细胞培养、单细胞培养、原生质体培养、遗传转化及其体胚发生与植株再生系统.从组织形态、生理生化、基因表达等方面对龙眼体胚发生过程进行的研究发现:①龙眼胚性愈伤组织的胚胎发生为内起源;②龙眼体胚一般起源于单细胞;③龙眼体胚经成熟培养后,在超微结构与代谢上发生了根本性的变化;④龙眼体胚发生过程中的内源激素、多胺、同工酶、蛋白质等呈现有规律的变化,在体胚成熟过程中出现了3个新的LMW特异蛋白;⑤龙眼的体胚发生过程中形态的变化伴随着mRNA的差异表达,对这些差异的cDNA片段进行的初步研究已获得1个441bp的新序列以及1个与番茄APX有94﹪同源性、长度402bp的cDNA片段.参照龙眼的方法,从荔枝也获得了FEC,并由之建立了胚性细胞悬浮培养系统、基本枪法和农杆菌介导法的转基因系统.染色体数目和RAPD等分析表明,荔枝胚性愈伤组织存在广泛的遗传变异,并且这些变异可以传递到成熟的体胚,这是荔枝体胚萌发难的根本原因.

摘要： 本发明公开了一种通过幼胚胚状体发生途径诱导乌桕植株再生的方法，此方法繁殖速度快，繁殖系数高（每个胚可以产生数十个甚至更多的苗）；同时又能真实反映植株果实特性且遗传性状稳定，为成熟乌桕优良植株的快繁和遗传改良提供了重要的技术支持；同时，在一定程度上缓解了乌桕传统育种过程中费时费力的问题，也避免了通过器官发生和间接愈伤组织再生途径对乌桕进行繁殖和遗传改良方面所带来的嵌合体多、遗传性状不稳定等问题。

摘要： 本发明提供一种通过腐胺和固液交替培养提高棉花胚状体发生效率的方法，包括以下步骤：(1)选取棉花种子，去除种皮；(2)无菌苗培养；(3)愈伤组织诱导和胚性愈伤组织诱导；(4)胚性愈伤组织的增殖；(5)基于外源腐胺固液交替培养的胚状体分化调控；(6)生根培养；(7)驯化与移栽。本发明方法中提供的MSB培养基为改良的MSB培养基，由MS无机盐和B5有机物构成，在固液交替培养过程中促进胚状体分化时添加了1mM腐胺可以显著提高胚状体分化。本发明为提高棉花体细胞胚胎发生效率提供了一种有效的方法，具有一定的社会效益和经济效益，对我国棉花产业发展有重大贡献。

摘要： 本发明公开了一种通过胚状体发生途径诱导三叶木通植株再生的培养基和方法，所述培养基包括诱导培养基、增殖培养基、成苗培养基；所述诱导培养基包括含有0.5mg/L～1.5mg/L 2,4‑D、0.5mg/L～1.5mg/L TDZ、500mg/L ME的MS培养基或含有0.5mg/L～1.5mg/L ZT、0.5mg/L～1.5mg/L NAA、500mg/L ME的WPM培养基；所述增殖培养基、成苗培养基均包括含有0.5mg/L～1.5mg/L 6‑BA的WPM培养基。通过本发明特质的培养基利用三叶木通果实幼胚通过胚状体发生途径进行组培成功诱导出苗。

摘要： 本发明公开了一种通过幼胚胚状体发生途径诱导乌桕植株再生的方法，此方法繁殖速度快，繁殖系数高（每个胚可以产生数十个甚至更多的苗）；同时又能真实反映植株果实特性且遗传性状稳定，为成熟乌桕优良植株的快繁和遗传改良提供了重要的技术支持；同时，在一定程度上缓解了乌桕传统育种过程中费时费力的问题，也避免了通过器官发生和间接愈伤组织再生途径对乌桕进行繁殖和遗传改良方面所带来的嵌合体多、遗传性状不稳定等问题。

摘要： 本发明提供了一种橡胶树次生体胚高效发生方法及其应用，属于植物细胞工程技术领域。本发明将体细胞胚子叶切成长×宽为2～4mm×2～4mm的胚块，先将胚块远轴面贴愈伤组织诱导培养基接种，再将出现胚性愈伤组织的胚块近轴面贴体胚分化培养基接种。本发明发现限定胚块远轴面贴愈伤组织诱导培养基培养出现的胚性愈伤组织的胚块数量具有显著性提高，限定胚块近轴面贴体胚分化培养基分化形成次生体胚的胚块数量和次生体胚数量具有显著性提高，使用本发明所述方法可实现橡胶树次生体胚高效发生，为橡胶树组培苗工厂化生产以及遗传转化体系提供了新的途径。

摘要： 本发明公开了一种利用γ‑氨基丁酸促进杂交鹅掌楸体胚发生的培养基及应用，属于植物组培技术领域。本发明的杂交鹅掌楸体胚发生的培养基，是以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L为基础培养基，添加0～10mg/L的γ‑氨基丁酸；所添加的γ‑氨基丁酸能够促进杂交鹅掌楸愈伤组织体胚产生，加快体胚发育进程，提高体胚发生效率。本发明提供的的杂交鹅掌楸体胚发生的培养基，应用在杂交鹅掌楸体胚发生和组培中，体胚发生数目多、速度快、质量高，诱导的体胚成苗数极显著高于对照组，侧根数目及根长显著高于对照组，平均每块愈伤可形成20棵再生植株，具有很高的实际应用价值。

摘要： 本发明属植物组织培养技术领域，涉及一种体胚发生途径的椰枣组织培养方法，是取椰枣材料为外植体，经愈伤组织诱导培养、体胚诱导培养、不定芽诱导培养、生根培养得到性状一致的椰枣种苗。本发明以椰枣种子合子胚、无菌苗根尖、幼苗茎尖和嫩叶等椰枣材料为外植体，通过体胚发生途径培育出完整的组培苗，可以结合椰枣性别鉴定技术规模化生产性状一致的椰枣种苗，适合工厂化育苗和规模化栽培，所得椰枣种苗能够保持原品种的优良性状，遗传性状稳定，变异小，具有操作简单、成本低、繁殖系数高等特点，同时为椰枣分子育种等研究奠定基础，对椰枣产业发展具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种利用水杨酸促进杉木体胚发生的方法，属于植物组培技术领域。本发明所提供的方法具体为：以DCR为基本培养基，附加有浓度不超过8mg/L的水杨酸作为杉木体胚诱导培养基；通过杉木未成熟球果获得未成熟种胚，将其放在在愈伤诱导培养基上培养25～30天获得杉木胚性胚柄团；将所得杉木胚性胚柄团放入杉木体胚诱导培养基中，于培养箱中进行暗培养，诱导促进杉木体胚发生，23°C条件下，培养60～100天，即可得到比对照数目最高可达2倍以上的体胚，大大提高了杉木体胚的诱导效率，具有很好的实用性。

摘要： 本发明提供了一种建立具有高体胚发生能力橡胶树胚性细胞纯系以及维持其胚性形态的方法，涉及植物组织培养和细胞工程技术领域。具体包括以下步骤：诱导初代愈伤组织、获得胚性愈伤组织以及胚性愈伤组织低密度悬浮培养，即可建立高体胚发生能力的胚性细胞纯系。本发明还提供了维持胚性细胞纯系的继代保存方法和继代培养基。利用本发明提供的方法，可以将橡胶树易碎胚性愈伤组织的获得时间缩短至6个月以内，并且获得具有高达100％体胚诱导率的胚性细胞纯系；利用本发明提供的继代培养基进行继代培养，胚性细胞纯系在继代培养2年后仍可维持60％左右的体胚发生能力，为橡胶树基因转化、基因编辑和原生质体培养与融合提供良好且状态较一致的材料来源。

摘要： 本发明公开了一种固液交替培养诱导落羽杉高效体胚发生的方法，以落羽杉子叶胚为外植体，接入固体胚性愈伤组织诱导培养基中诱导出胚性愈伤组织，然后再进行固体增殖培养；完成后，转入继代培养基进行液体悬浮继代培养一次以上，将获得的悬浮液涂于滤纸上，然后将滤纸移至体胚诱导培养基诱导出成熟体胚，并接种于光照培养室组培瓶中，以成苗培养基继续培养得到落羽杉小苗。本发明首次建立了落羽杉的体胚发生体系，操作步骤简单，成本低，能够快速获得落羽杉体细胞胚胎，高效繁育大量落羽杉苗木，也有利于后期建立落羽杉的遗传转化体系。