外植体

摘要： 以软枣猕猴桃带腋芽的一年生嫩枝茎段为对象,以MS固体培养基作为基础培养基,加入不同浓度的植物激素组合,观察软枣猕猴桃茎段芽增殖的生长情况,得出适宜软枣猕猴桃茎段芽增殖的培养基。结果表明:软枣猕猴桃芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+30 g/L蔗糖+7.2 g/L琼脂,增殖系数为3.95,pH值为5.8。

摘要： 本研究以白沙蒿(Artemiisa Sphaerocephala)为试验材料研究不同外植体类型(根尖、茎尖、嫩叶)和植物生长调节剂2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)以及有机附加物水解酪蛋白(CH)对白沙蒿愈伤组织诱导的影响,并得到诱导愈伤组织的最佳方法。从诱导愈伤组织时间方面来看,茎尖外植体诱导愈伤组织用时最短,仅需12天,最佳培养基为MS+30g/L蔗糖+6g/L琼脂+2 mg/L 2,4-D+500mg/L水解酪蛋白(CH),出愈率为65%。从诱导愈伤组织出愈率方面来看,嫩叶外植体的出愈率最高,可达80%,最佳培养基为M S+30g/L蔗糖+6g/L琼脂+1.5 mg/L 2,4-D+500 mg/L水解酪蛋白(CH)。

摘要： 以河南大别山野生白头翁(Pulsatilla chinensis)为材料,选用幼叶叶片、中叶叶片、中叶叶柄等3种外植体分别与75%乙醇+2%次氯酸钠、20%过氧化氢+2%次氯酸钠进行两组正交试验,比较各因子对消毒效果的影响,以找出启动培养的最佳外植体与消毒的最佳组合。结果表明:外植体类型是影响消毒效果的最关键因素;刚由嫩绿转为绿色的中叶叶片为最佳外植体,污染率最低(7.4%),出愈率最高(88.9%),且出愈快;幼叶叶片消毒时易受伤褐变,出愈率小于中叶叶片但高于中叶叶柄;中叶叶柄污染率最高(41.7%),出愈率最低(12.5%),出愈慢且出愈量少;总体来说,叶片的消毒及诱导效果好于叶柄;2%次氯酸钠与75%乙醇搭配可以达到最佳消毒效果,是白头翁叶片消毒的首选药剂;使用20%过氧化氢消毒时,外植体材料褐化严重;消毒的最佳组合为:中叶叶片+75%乙醇20 s+2%次氯酸钠8 min,或者中叶叶片+75%乙醇20 s+2%次氯酸钠12 min。

摘要： 文章对不同产地的野葛根外植体的消毒方法进行了优化。结果表明:外植体材质脆、嫩、表皮浅褐色的大同灵丘野葛根的最佳消毒条件为:质量分数75%乙醇30 s,质量分数0.2%HgCl_(2) 8 min,污染率为8.3%,死亡率为5%;坚实、较嫩、表皮浅褐色的运城平陆野葛的最佳灭菌条件为:质量分数75%乙醇30 s,质量分数0.2%HgCl_(2) 8 min,污染率10.2%,死亡率0;坚实、较硬、表皮粗糙、深褐色的晋城泽州产野葛的最佳灭菌条件为:质量分数75%乙醇30 s,质量分数0.2%HgCl_(2) 10 min污染率5.7%,死亡率32.2%。

摘要： 为了探讨外源过氧化氢(H_(2)O_(2))对水曲柳体胚发生过程中外植体内部抗氧化物质、抗氧化酶、一氧化氮(NO)等的影响,以成熟水曲柳子叶胚为外植体诱导体胚发生,通过对体胚发生过程中不同时间段的外植体取材,测定其内部生理变化,分析外源H_(2)O_(2)对水曲柳内部生理生化的影响。结果表明:外源H_(2)O_(2)的添加,对水曲柳体胚发生过程中还原性抗坏血酸(ASA)的质量摩尔浓度的影响主要在中后期阶段(42 d),且H_(2)O_(2)添加组高于对照组2.14%,对还原性谷胱甘肽(GSH)的影响在前期阶段(14 d),H_(2)O_(2)添加组是对照组的3.23倍;外源H_(2)O_(2)处理提高外植体H_(2)O_(2)的质量摩尔浓度,在14 d时,外源H_(2)O_(2)处理和对照的H_(2)O_(2)质量摩尔浓度相差较大,H_(2)O_(2)添加组是对照组的3.77倍;外源H_(2)O_(2)处理降低了丙二醛(MDA)质量摩尔浓度,且在7 d时,对照组显著高于H_(2)O_(2)添加组23.40%;外源H_(2)O_(2)前期降低一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)活性,后期对其起促进作用;外源H_(2)O_(2)处理对硝酸还原酶(NR)的作用与一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)活性完全相反。因此外源H_(2)O_(2)对水曲柳体胚发生中外植体抗氧化的各生理指标具有阶段性的影响。

摘要： 研究林药猴耳环[Pithecellobium clypearia(Jack)Benth.]外植体的消毒方式及不同植物生长调节剂的不同浓度与不同组培方式对猴耳环组培苗生根及成活的影响,筛选出猴耳环外植体最适宜的消毒方式是先用75.00%乙醇处理1 min,再用5.00%的次氯酸钙溶液处理25 min,萌芽率能达70.00%;最适宜生根的植物生长调节剂配比为IBA 0.40 mg/L+NAA 0.10 mg/L,在该浓度下传统组培的生根率和移栽成活率分别达70.30%及92.20%,无糖组培的生根成活率和移栽成活率分别达100.00%及99.90%,最佳的种植基质体积配比为河沙+泥炭土(1∶1)和黄心土+河沙+泥炭土(1∶1∶1)。用无糖组培方式进行猴耳环苗期生根,比传统组培生根率更高,根系更发达,更适合进行商业化生产。

摘要： 初代培养切花非洲菊‘大雪橘’品种的不同外植体,结果表明,在不同激素浓度条件下,不同外植体的组织培养效果存在差异,茎尖诱导率和芽的增殖倍数较高,但非洲菊丛生,茎尖材料来源有限;叶片和花托能够诱导出愈伤组织;不同的培养基配方对诱导效果有影响。研究表明:茎尖丛生芽诱导效果较好的培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,叶片诱导形成愈伤组织最适配方为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L,在配方为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.5mg/L的培养基上,花托诱导形成的愈伤组织数量和质量均较优。

摘要： 以澳洲坚果品种‘H2’的幼嫩茎段和种子为材料,获取腋芽、子叶和上胚轴等外植体,开展愈伤组织诱导及不定芽增殖研究,再通过石蜡切片法对不同愈伤组织的细胞结构进行观察,分析比较不同外植体诱导的愈伤组织性质与不定芽分化效果。结果表明:适合腋芽愈伤诱导和分化的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT,腋芽愈伤量大,不定芽增殖系数为3.49;适合子叶愈伤诱导的培养基为MS+2.0 mg/L TDZ+200 mg/L CH,愈伤组织多为绿色且质地紧密,诱导率高达82.2%,褐化率低至8.9%;适合子叶愈伤组织分化不定芽的培养基为MS+1.0 mg/L KT+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3,不定芽长势较好,增殖系数为5.40;上胚轴几乎不产生愈伤组织,可直接分化不定芽;适合上胚轴分化不定芽的培养基为MS+1.0 mg/L KT+0.5 mg/L NAA,增殖系数为7.37。细胞学观察发现,腋芽愈伤组织的细胞体积较大、液泡化程度较高、细胞质较少、细胞核较小,且细胞间排列分散且不规则,显示出非胚性愈伤组织特征;子叶愈伤细胞排列较紧密、细胞核较大、细胞质较厚且被染色深,显示出分生组织细胞的特征。比较而言,子叶是诱导愈伤组织的优良材料,上胚轴是不定芽增殖的最佳外植体。

摘要： 以当年生三倍体漆树幼嫩茎段为外植体,通过植物组织培养方法,找出三倍体漆树幼嫩茎段最适宜的消毒时间、方法以及最佳腋芽诱导培养基,建立三倍体漆树组织培养无菌体系。结果表明,三倍体漆树幼嫩茎段消毒最佳时间和方法为75%乙醇消毒60 s+0.1%升汞消毒4 min,腋芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.3 mg/L+ZT 0.2 mg/L+活性炭0.3 g/L。

摘要： 实验以大叶女贞的幼嫩叶片和幼嫩茎段为外植体,研究了6-BA、2,4-D对愈伤组织诱导的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为幼嫩的茎段,愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D。

摘要： 以甜高粱(Sorghum bicolor)品种‘Mn-3025’无菌实生苗茎尖和叶片为外植体,研究植物生长调节剂配比对其愈伤组织诱导的影响.结果表明,在含2,4-D1.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的MS培养基上茎尖愈伤组织诱导率最高,达66.7％;叶片未能成功诱导出愈伤组织,添加500mg·L-1的柠檬酸可有效抑制叶片在组织培养过程中褐化的发生.

摘要： 莲(Nelumbo nucifera)是中国传统十大名花之一,具有极高的观赏价值.本研究以莲胚为外植体,采用NAA和TDZ不同浓度配比的培养基,以期获得莲愈伤组织诱导的适宜方法.结果显示:1.0mg/L TDZ+5.0mg/L NAA与1.0mg/L TDZ+7.0mg/L NAA处理的愈伤组织诱导率均较高.此外,对不同时期的莲胚诱导愈伤组织的效果进行了研究,结果显示:花后9～12天的成熟胚为诱导愈伤组织的最佳外植体.研究结果为莲再生体系的建立奠定了基础.

摘要： 为探索菊花日中性新种质快速高效的资源保存和繁殖技术体系,以日中性品种'Mammoth Amber'为试验材料,对不同类型的外植体、次氯酸钠的浓度和处理时间等影响消毒成活率的因素进行了筛选,并对外植体的增殖系数和试管苗不定芽快速生根方法进行了研究.将筛选出的外植体最佳消毒体系和最适生根培养基在5个品种中做了比较分析.结果表明,'Mammoth Amber'最佳消毒体系为:以顶芽为外植体,75％酒精处理20s后用无菌水冲洗2次,然后以1％NaClO处理6min后接种于MS培养基中,成活率为35.30％;最适生根培养基为1/2MS+0.2mg/L NAA,接种不定芽最早可在15d生根,30d后不定芽生根率为100％;上述体系在不同遗传背景的5个菊花日中性品种中的试验,均获得了较好的消毒效果和较快的生根速率,但不同品种的增殖系数不同.本研究为日中性菊花优异种质资源的保存和快速繁殖提供了技术参考.

摘要： 以辣木茎段为外植体,通过实验探讨不同杀菌剂(升汞、次氯酸钠)不同浓度在不同消毒时间下的灭菌效果;实验结果表明:在75％酒精中浸泡30s后,用0.2％升汞处理5min效果最佳,污染率为2％,成活率达84％.

摘要： '粉贵人'是本课题组通过人工有性杂交获得的切花菊新品种,本研究以'粉贵人'叶片和茎间薄层为外植体,以MS为基本培养基,设立了不同浓度的6-BA和NAA组合,筛选出了适于两类外植体愈伤组织诱导和分化的最适培养基,其中叶片最适分化培养基为:MS+1mg/L6-BA+1mg/L NAA,在此培养基上叶盘培养22d左右即可分化出不定芽芽点,40d时分化芽点既能生长成1cm左右小苗,60d时分化苗生根率既能达到100％,移栽后成活率达到100％;茎间薄层最适分化培养基为:MS+2mg/L6-BA+1mg/L NAA,茎间薄层在28d左右分化出芽点,43d左右成苗;分化苗最佳生根培养基为1/2MS+0.2mg/L NAA.为了针对'粉贵人'进行进一步的转基因研究,对两类外植体对卡那霉素的耐受性进行了分析,结果发现,叶片临界抗性选择压为5mg/L,茎间薄层临界抗性选择压为2mg/L,分化苗生根选择压为8mg/L.通过与其他报道对比发现,'粉贵人'是一个能够快速出愈、分化、生根的品种,且增殖系数高,再生过程中无需频繁更换培养基,是一个在生产和基因功能研究上均非常重要的切花菊新品种.

摘要： 为建立拟堇花兰离体培养与快繁技术体系,本研究以拟堇花兰幼嫩花梗为外植体,探索不同消毒方式对外植体表面灭菌效果以及不同浓度BA和NAA对丛生芽诱导、增殖分化和不同蔗糖与NAA浓度对生根的影响.结果表明:拟堇花兰外植体表面灭菌最佳处理方式为0.1％氯化汞溶液处理10min;最佳丛生芽诱导培养基为花宝1号+3mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA;最佳增殖培养基为花宝1号+2mg·L-16-BA+0.5～1mg·L-1NAA;最佳生根培养基为花宝1号+1.5mg·L-1NAA+20g·L-1蔗糖.本研究建立了拟堇花兰离体培养和快繁体系,为资源保存及种苗育苗提供技术支持.

摘要： 以3种十二卷属植物为材料,研究了不同外植体及不同培养基对其离体培养及快速繁殖的影响.结果表明:愈伤组织诱导最佳外植体为花葶上部,诱导培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+KT1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1;最佳分化培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+KT0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1;最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+KT0.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1.

摘要： 以'凤丹'种胚为材料,研究了不同萌发培养基、外源激素组合、外植体及培养时间和接种方式对愈伤诱导的影响,结果表明:合适愈伤组织诱导的外植体排序是叶柄＞子叶＞子叶柄,适合'凤丹'子叶愈伤组织诱导的激素为1.0mg/LNAA+0.5mg/LBA,改良WPM培养基为'凤丹'种胚较好的萌发培养基,种胚培养15天时以近轴面向上的接种方式为最佳处理.

摘要： 以白芨成熟尚未开裂的蒴果为外植体,在种子萌发的基础上,采用单因素或正交试验设计,研究不同因素对白芨原球茎增殖、不定芽分化及增殖的影响,并诱导不定芽生根.结果表明,原球茎增殖最佳培养基配方为1/2MS+0.1mg/L6-BA+0.1mg/L NAA,增殖系数达5.43;将增殖后的原球茎转入MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L IBA,平均分化率为1.9;筛选出不定芽增殖最优培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L IBA,增殖倍数可达11.47.将获得的无菌苗转入1/2MS+0.5mg/L IBA,生根率达80.95％.本研究可为白芨优良品种的规模化快速繁殖和开发利用提供技术支持.

摘要： 本研究以五星花带芽茎段为外植体,研究了外植体表面灭菌、激素种类及浓度配比、基本培养基种类及有机添加物等因素对五星花离体培养的影响.主要结论为:带芽茎段外植体最适的取材时间为春季(5月),最适灭菌方法为75％酒精30s+2％次氯酸钠10min;丛生芽诱导阶段适宜培养基为:MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;丛生芽增殖阶段适宜培养基为:MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;壮苗阶段适宜培养基为:MS+IBA0.5mg·L-1.

摘要： 本申请涉及芫花种苗繁育领域，具体公开了一种用于芫花外植体培养繁育方法的培养基及芫花外植体培养繁育方法。其培养基由诱导培养基、增殖培养基和生根培养基组成，各个培养基为花宝1号、花多多1号、6‑苄氨基嘌呤、萘乙酸、鲜榨椰子汁、蔗糖和琼脂等制备而成。本申请的芫花组培苗繁育方法为选用当年生春季嫩稍枝芽饱满的半木质化枝条茎尖作为外植体，进行消毒后分阶段置于诱导培养基中萌芽、增殖培养基中培养丛生芽、再于生根培养基中生根，直至培养出无菌种苗后，再驯化培养得到可用于工厂生产的正常种苗。其具有增殖倍率高、生根率达到95%以上的效果，适宜大规模生产芫花种苗。

摘要： 本申请涉及芫花种苗繁育领域，具体公开了一种用于芫花外植体培养繁育方法的培养基及芫花外植体培养繁育方法。其培养基由诱导培养基、增殖培养基和生根培养基组成，各个培养基为花宝1号、花多多1号、6‑苄氨基嘌呤、萘乙酸、鲜榨椰子汁、蔗糖和琼脂等制备而成。本申请的芫花组培苗繁育方法为选用当年生春季嫩稍枝芽饱满的半木质化枝条茎尖作为外植体，进行消毒后分阶段置于诱导培养基中萌芽、增殖培养基中培养丛生芽、再于生根培养基中生根，直至培养出无菌种苗后，再驯化培养得到可用于工厂生产的正常种苗。其具有增殖倍率高、生根率达到95%以上的效果，适宜大规模生产芫花种苗。

摘要： 本发明提出了一种高效的桃巴旦茎段无菌外植体的培育方法及外植体，包括以下步骤，外植体材料选择，于4月至6月田间从生长健壮、无病虫害的巴旦木母株上选取腋芽饱满、半木质化、一年生的枝条作为外植体材料，外植体预处理，使用消毒剂对枝条进行第一次消毒处理，将枝条剪成每段含有留3‑5个腋芽或顶芽的小段备用，外植体消毒处理，使用消毒剂对枝条小段进行第二次消毒处理，以清除外植体表面细菌、真菌等微生物，防止材料的污染，外植体接种，外植体初始芽诱导；明确了5月中旬至6月初的时间段为外植体采集时间，有效地降低了外植体的带菌量，并通过外植体预处理方法、次氯酸钠杀菌方法及时间等结合，大幅提高了消毒灭菌的效果。

摘要： 本发明涉及一种红花木莲外植体消毒方法、外植体及其应用。所述消毒方法包括：使用质量分数为0.1～0.3％的HgCl2溶液对经过预处理的外植体进行消毒，消毒时间为8～10min。本发明所述方法不但杀灭红花木莲外植体表面细菌的效果好，外植体污染率低，同时还兼顾保持外植体的活力，使外植体的杀伤率维持在较低水平，从而在整体上提高外植体的存活率。

摘要： 本发明涉及茶树外植体无汞消毒剂及外植体消毒方法，属于茶树组织培养技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种茶树外植体无汞消毒剂及外植体消毒方法，其能较为全面的对茶树外植体进行无汞消毒。本发明茶树外植体无汞消毒剂，包括包装在空间独立的单元中的顺序给药的溶液A和溶液B，所述的溶液A为70～80wt％的乙醇溶液，所述的溶液B为5～10wt％的次氯酸钠和0.05～0.15wt％吐温的混合溶液。

摘要： 本发明公开了一种制备大豆复合型外植体的方法及用该复合型外植体制备快速转基因大豆植株的方法。本发明的方法是将成熟大豆种子消毒，无菌条件下在萌发培养基中光照培养催芽，催芽24h后去掉种皮、一片子叶和第一片真叶，保留下胚轴、胚尖及一片子叶，即为大豆复合型外植体。本发明方法制备的大豆复合型外植体可以用于制备快速转基因大豆植株，外植体再生率高，达90%以上，转化效率高，而且明显缩短转化周期。

摘要： 本发明提出了一种基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，属于组织培养技术领域。包括：S1.外植体的处理；S2.丛生芽的培养；S3.继代、生根培养；S4.壮苗培养；S5.炼苗移栽。本发明的多肉植物的组织培养方法，使用多肉植物叶肉组织作为外植体，克服了多肉植物受到时间季节限制，取材短缺的局限性，可以在较短时间内获得大量多肉植物幼苗，从而使得多肉植物得到快速繁殖与推广。本发明以多肉植物的叶肉为外植体，可以在原取材花茎所需时间大大缩短，只要有一株多肉植物的母本，不论生长状态季节时间，可以在6‑12个月左右形成5万株以上小苗，解决了名贵品种在短期时间内难以快速繁殖的问题，以满足市场需求，提高经济效益。

摘要： 本发明公开了一种以‘中黄1号’茶树茎段为外植体，通过无菌体系的建立、诱导愈伤组织、愈伤组织诱导分化芽、芽生长发育、壮芽、生根、炼苗及移栽等步骤，解决了目前茎段无性系再生方法多为腋芽增殖、重复效果差以及无法满足遗传转化对高频再生体系的需求等问题，理论上还可进行农杆菌侵染的转基因试验。本发明建立了茶树茎段组织培养与植株高效再生体系，为茶树良种繁殖和遗传转化的研究奠定了一定的基础。

摘要： 本发明公开了一种采用酸性氧化电位水提高月季外植体出芽率的方法，步骤以下步骤：（1）选取盆栽月季当年生的枝条，且饱满而未萌发的腋芽茎段；将其茎段上的叶片和叶柄剪掉，茎段上都保留1‑2个侧芽；（2）将外植体在洗衣粉溶液中浸泡，之后用清水冲洗，然后用滤纸将外植体表面的水渍吸干，置于无菌环境中，先用75%酒精浸泡30‑50s，再用无菌水冲洗4‑6遍，然后用酸性氧化电位水浸泡，再次使用无菌水冲洗4‑6遍，最后用滤纸吸干茎段表面多余的水分；（3）将外植体用解刨刀切去外植体的两端切口毒害部分，腋芽上端横切，腋芽下端45°斜切，切好茎段接种于诱导培养基中进行培养。本发明的方法可大大提高月季外植体出芽率。

摘要： 本发明公开了一种植物组织培养时外植体灭菌方法。属于植物组织培养技术领域。包括如下步骤：将外植体使用水冲洗→使用质量浓度75％的酒精灭菌→无菌水清洗→使用质量浓度5～10％的次氯酸钠溶液浸泡30～50min或使用质量浓度0.1～0.2％的升汞溶液浸泡20～30min→无菌水清洗。与现有技术相比，本发明通过方法的改进避免了外植体表面残留酒精对细胞的脱水作用，使次氯酸钠或者升汞灭菌时间延长，表面灭菌更彻底，且不会使外植体灭菌致死。提高了灭菌效率的同时保证了材料的存活，同时次氯酸钠溶液或者升汞溶液可多次循环使用，大大减少了废液处理的次数，降低了对环境污染的可能性。