酶解结合高剪切破壁技术对蜂花粉酚类物质及抗氧化活性的影响

摘要

为了提高蜂花粉体外抗氧化活性及其对质粒DNA氧化损伤的保护作用,该研究以荷花、枣花、茶花、油菜、玫瑰、五味子6种蜂花粉为对象,研究纤维素酶酶解结合高剪切破壁技术对蜂花粉酚类物质溶出的影响.破壁试验结果表明,采用质量分数1％～4％纤维素酶(荷花1％;枣花4％;茶花2％;油菜1％;玫瑰4％;五味子3％)结合30 s 10000～15000 r/min高剪切,6种蜂花粉均可达到90％以上破壁率.高效液相色谱-二极管阵列检测法(High Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detection,HPLC-DAD)分析结果表明6种蜂花粉破壁后酚类物质的溶出量和种类均有不同程度增加,荷花蜂花粉没食子酸含量较破壁前增加6倍,枣花蜂花粉经破壁后山奈酚溶出,且含量较高,为10.31 mg/g,破壁后油菜蜂花粉没食子酸含量为11.59 mg/g,较破壁前提高59％.油菜蜂花粉总黄酮含量为29.6mg/g(以芦丁当量计),相较破壁前提高6.4倍,总酚含量为21.60 mg/g(以没食子酸当量计),相较未破壁提高1.5倍;体外抗氧化试验表明,破壁能够将枣花蜂花粉Fe2+络合力提高2.2倍,油菜蜂花粉Fe3+还原力提高8倍.破壁后荷花、枣花、茶花、油菜、玫瑰、五味子6种蜂花粉对pBR322质粒DNA氧化损伤的保护作用分别提高了60.5％、12.4％、287.7％、442.1％、82.5％、4.8％.结果表明,纤维素酶酶解结合高剪切破壁方法,能够促进蜂花粉酚类物质的溶出,增强体外抗氧化活性,有效预防DNA氧化损伤.研究结果为蜂花粉资源的开发与利用提供理论依据.