棘球绦虫

摘要： 目的为了高效检测棘球绦虫(Echinococcus)。方法针对棘球绦虫的线粒体基因高度同源区域设计特异性引物和探针,建立了一种检测棘球绦虫的荧光PCR检测方法。在优化反应条件并测试灵敏度和特异性之后进行样本检测。结果该方法有较高的灵敏度,检测质粒浓度极限为10 copies/μL;特异性好,未见非特异性扩增;应用该方法对84份犬粪样本进行检测,发现41份样本为阳性。结论本研究所建立的荧光PCR方法可快速、准确地检测棘球绦虫,为棘球蚴病的早期诊断和预防提供了技术支撑。

摘要： 包虫病也称为棘球蚴病,严重威胁动物的健康,包虫病寄生虫是指棘球绦虫,是由猪、牛、羊等动物的肺脏、肝脏和其他器官中的棘球绦虫侵染引起的一种人畜共患慢性寄生虫病,呈地方性流行,被称为地方性寄生虫病。棘球蚴体积大活动力强,它所寄生部位的周围器官组织易继发感染,从而造成技能障碍和损伤。棘球蚴的蚴囊的破裂能导致动物过敏和死亡。

摘要： 包虫病(Echinococcosis)是由棘球绦虫所引起的一类流行广泛且危害严重的人兽共患寄生虫病,分为泡型包虫病(多房棘球蚴病)和囊型包虫病(细粒棘球蚴病),给我国农牧区造成重大公共卫生负担和经济损失。最凶险的泡型包虫病患病10年致死率高达90%,当前,该类疾病仅有阿苯达唑一种药物可用于临床治疗,治疗手段非常有限,患者需长期服药且药效有限。

摘要： 包虫病(亦称“棘球蚴病”),一个对我国中东部的人来说有点陌生的词汇,在西部却让许多农牧民闻之色变。这种由棘球绦虫寄生于人或动物体内引起的人兽共患寄生虫病,在西部农牧区被视为“瘟神”,因为它不仅导致农牧民因病致贫返贫,也给畜牧业生产带来巨大损失。新疆就曾是包虫病高发地区之一。

摘要： 旨在探索粪便样本分析对犬科动物物种鉴别的方法及其可行性,同时对野外犬科动物棘球绦虫感染情况进行调查.采用哺乳动物线粒体DNA控制区通用引物对101份采集自野外环境的犬科动物粪便DNA进行PCR扩增和测序,通过核苷酸位点变异分析、BLAST相似性比对、遗传距离分析和系统进化树构建,对粪样来源物种进行分子鉴别.同时,采用粪-抗原ELISA检测,对粪样棘球绦虫感染情况进行调查.结果 表明:粪样来源物种鉴别的检测成功率为73.27％,获得的74条序列共定义单倍型20个,所有单倍型序列均可在GenBank数据库中匹配到单一物种,序列相似度为98.52％～100％.单倍型根据序列差异可分为4个单倍型集,各单倍型集间平均碱基差异为17.83～70.10,各单倍型集内单倍型碱基差异在1～10个之间.各集合间遗传距离为0.068～0.342,远大于各集合内单倍型间遗传距离0.009～0.022.系统进化分析结果显示,同一集合的单倍型以高自展值聚集成一支.综合各项分析结果,可推测所检测粪样宿主来源分别为犬、灰狼、赤狐和红狐.粪-抗原ELISA检测发现阳性样本11份,样本棘球绦虫抗原阳性率为10.89％.综上表明:线粒体DNA控制区序列分析可用于犬科动物的分子鉴别,可结合核基因等其他分子标记进一步提升检测准确率.研究区域野外犬科动物棘球绦虫粪抗原阳性率较高.

摘要： 为了解野生犬科动物在包虫病流行中的作用,探索野生犬科动物棘球绦虫的防控方法,通过野外收集疑似野生犬科动物粪便进行DNA宿主鉴定,粪便用蔗糖漂浮法收集虫卵,对虫卵进行DNA检测鉴定,结合动物解剖法对青海省部分地区野生犬科动物棘球绦虫的流行病学进行了调查.在3处狐狸窝附近投放驱虫药物吡喹酮,采集驱虫前后的狐狸粪便,用虫卵检查方法,评价驱虫防控效果.野外收集的160份材料,经DNA鉴定,53份为野生犬科动物粪便,其中,红狐粪便9份、藏狐粪便24份、沙狐粪便13份、狼粪便7份;剖检67只狐狸,其中,红狐33只、藏狐25只、沙狐9只;检查狼肠道1副.粪便检查结果表明:野生犬科动物中狮弓首蛔虫的感染率最高为18.87％(10/53),狐狸棘球绦虫感染率为10.87％ (5/46),其中,多房棘球绦虫感染率为6.52％(3/46),狼多房棘球绦虫感染率42.86％(3/7);剖检结果表明:野生犬科动物线中绦虫的感染率最高达61.76％ (42/68),其次是狮弓首蛔虫36.76％ (25/68),多房棘球绦虫的感染率为13.24％ (9/68).野生狐狸药物防控试验中,药物投放前的狐狸粪便中检出狮弓首蛔虫、有翼翼形吸虫、带状带绦虫和多房棘球绦虫.药物驱虫6个月之内狐狸粪便中未检出多房棘球绦虫,但驱虫1年后再次检出多房棘球绦虫虫卵,说明野生狐狸存在棘球绦虫的重复感染,每年至少要进行2次驱虫防控工作.研究结果可为野生犬科动物源性包虫病的防控提供科学依据.

摘要： 为了解野生犬科动物在包虫病流行中的作用,探索野生犬科动物棘球绦虫的防控方法,通过野外收集疑似野生犬科动物粪便进行DNA宿主鉴定,粪便用蔗糖漂浮法收集虫卵,对虫卵进行DNA检测鉴定,结合动物解剖法对青海省部分地区野生犬科动物棘球绦虫的流行病学进行了调查。在3处狐狸窝附近投放驱虫药物吡喹酮,采集驱虫前后的狐狸粪便,用虫卵检查方法,评价驱虫防控效果。野外收集的160份材料,经DNA鉴定,53份为野生犬科动物粪便,其中,红狐粪便9份、藏狐粪便24份、沙狐粪便13份、狼粪便7份;剖检67只狐狸,其中,红狐33只、藏狐25只、沙狐9只;检查狼肠道1副。粪便检查结果表明:野生犬科动物中狮弓首蛔虫的感染率最高为18.87%(10/53),狐狸棘球绦虫感染率为10.87%(5/46),其中,多房棘球绦虫感染率为6.52%(3/46),狼多房棘球绦虫感染率42.86%(3/7);剖检结果表明:野生犬科动物线中绦虫的感染率最高达61.76%(42/68),其次是狮弓首蛔虫36.76%(25/68),多房棘球绦虫的感染率为13.24%(9/68)。野生狐狸药物防控试验中,药物投放前的狐狸粪便中检出狮弓首蛔虫、有翼翼形吸虫、带状带绦虫和多房棘球绦虫。药物驱虫6个月之内狐狸粪便中未检出多房棘球绦虫,但驱虫1年后再次检出多房棘球绦虫虫卵,说明野生狐狸存在棘球绦虫的重复感染,每年至少要进行2次驱虫防控工作。研究结果可为野生犬科动物源性包虫病的防控提供科学依据。

摘要： 目的 了解西藏自治区棘球蚴病的流行特征及影响因素,为棘球蚴病防控提供依据.方法 通过2016年西藏自治区棘球蚴病流行病学调查数据库收集相关资料,描述性分析居民棘球蚴病检出率,棘球蚴病防治知识、态度和行为合格率,犬和牲畜及棘球蚴病感染情况,采用广义线性模型分析棘球蚴病检出率的影响因素.结果 2016年西藏自治区居民棘球蚴病检出率为1.60％,棘球蚴病防治知识、态度和行为合格率为33.39％,犬粪棘球绦虫抗原阳性率为6.31％,牲畜棘球蚴病感染率为13.36％,养犬率为62.33％,牲畜养殖率为91.66％,牲畜自宰率为72.08％.广义线性模型结果显示,犬粪棘球绦虫抗原阳性率(OR=1.560, 95％CI: 1.359～ 1.790)、牲畜棘球蚴病感染率(OR: 1.182～1.843, 95％CI: 1.024～2.772)、养犬率(OR=1.256, 95％CI: 1.037～ 1.521)和牲畜自宰率(OR=1.534,95％CI: 1.337～1.760)是棘球蚴病检出率的影响因素.结论 西藏自治区居民棘球蚴病检出率较高,与犬粪棘球绦虫抗原阳性率、牲畜棘球蚴病感染率、养犬率及牲畜自宰率等有关.

摘要： (目的 )利用线粒体NA DH脱氢酶亚基1基因(NA DH1)和微卫星标记进行棘球绦虫感染的基因型和遗传多样性分析.(方法)对不同地区牛、羊肝/肺包囊(8份)、野生鼠肝包囊(4份)和狐狸肠道寄生棘球绦虫成虫(2份)共14个样本提取DNA后,分别用棘球绦虫线粒体NA DH1基因和微卫星标记进行检测.(结果)PCR扩增分别得到大小约为510 bp的NA DH1核苷酸片段和200～300 bp不等的微卫星标记片段,产物的长度与引物设计的预期产物长度一致;序列比对发现不同地区、不同宿主来源的样品序列存在碱基的颠/转换和碱基缺失现象;测序发现8份牛、羊肝/肺包囊样本均为细粒棘球蚴G1基因型感染,4份野生鼠肝包囊均为多房棘球蚴感染,2份狐狸肠道寄生棘球绦虫样本为多房棘球绦虫感染.(结论)线粒体NA DH1基因和微卫星标记均适用于棘球绦虫种间和种内的鉴别、分类及系统进化分析研究.

摘要： 438份人血清,用新疆试剂盒共捡23份囊型棘球蚴阳性血清,4份泡型棘球蚴阳性血清,共27份血清呈阳性,阳性率为6.2％(27／438)。424只成年藏羊,233只藏羊感染棘球蚴病,平均感染率为55.0％。调查贵南县牦牛46头,有9头牦牛感染棘球蚴病,感染率为19.56％。双抗体夹心ELISA试剂盒,对放牧区94份犬的粪便的检测结果,刚性26份,阳性率27.7％。用同样方法对26条农业区普通犬粪便检测结果,全部为阴性。犬棘球绦虫快速诊断试剂条对86条藏犬粪便检查结果,粪便检测阳性犬38条,感染率达44.2％。槟榔素驱虫法对藏犬粪便进行检查结果,用槟榔素方法检查22条藏犬粪便,2条藏犬检出成虫,感染率达9.0％。

摘要： 本文介绍了青海省棘球绦虫的种类、流行状况和危害性.通过主持和执行的省级、国家科技部包虫病研究项目,较系统的统计分析了2008-2013年及2013-2015年期间青海省包虫病的防治技术研究概况.研究发现，藏犬的驱虫以爱普锐克咀嚼片为首选药物。通过对环湖地区和玉树地区间隔45d和半年驱虫，都取得了良好的效果。通过对海晏和河卡地区的比较，发现牧民群众对包虫病的认识程度直接影响到该地区的防治效果。说明了在包虫病的防治工作中，培训和宣传工作的重要性。

摘要： 本文对脑包虫病临床分析及体会进行了介绍。文章指出，目前尚无杀灭包虫的特效药物。手术为根治的惟一疗法。手术原则是根据术前CI准确定位。手术切口和骨窗足够宽大，将包虫囊小心分离后完整摘除。注意勿将囊壁弄破，以免囊液外溢，使囊内头节种植造成复发或过敏性休克。

摘要： 本文对脑包虫病临床分析及体会进行了介绍。文章指出，目前尚无杀灭包虫的特效药物。手术为根治的惟一疗法。手术原则是根据术前CI准确定位。手术切口和骨窗足够宽大，将包虫囊小心分离后完整摘除。注意勿将囊壁弄破，以免囊液外溢，使囊内头节种植造成复发或过敏性休克。

摘要： 本文对脑包虫病临床分析及体会进行了介绍。文章指出，目前尚无杀灭包虫的特效药物。手术为根治的惟一疗法。手术原则是根据术前CI准确定位。手术切口和骨窗足够宽大，将包虫囊小心分离后完整摘除。注意勿将囊壁弄破，以免囊液外溢，使囊内头节种植造成复发或过敏性休克。

摘要： 本发明公开了一种重组细粒棘球绦虫Severin蛋白在检测囊型包虫病和细粒棘球绦虫感染试剂盒中的应用；所述试剂盒中的包被抗原为重组细粒棘球绦虫Severin蛋白。本发明首次克隆、表达出细粒棘球蚴重组蛋白rEgSeverin，免疫印迹显示，该蛋白具有良好的反应原性；发现rEgSeverin免疫小鼠后，诱导产生良好的体液和细胞免疫反应，以诱导产生Th2型细胞因子为主。本发明基于rEgSeverin蛋白建立了检测细粒棘球绦虫抗体的间接ELISA方法，制备了ELISA试剂盒，其特异性高于商品化ELISA试剂盒，为家畜细粒棘球绦虫感染及囊型包虫病流行病学调查和诊断提供了一种有效的方法。

摘要： 本发明公开了一种细粒棘球绦虫抗原及其应用，属于免疫学技术领域。所述抗原包括如下任一项蛋白：1)如SEQ ID NO：1所示的细粒棘球绦虫TSP1蛋白；2)如SEQ ID NO：2所示的细粒棘球绦虫TSP11蛋白；3)如SEQ ID NO：1所示的细粒棘球绦虫TSP1蛋白和SEQ ID NO：2所示的细粒棘球绦虫TSP11蛋白构建的蛋白组合。本发明以细粒棘球绦虫TSP1蛋白、TSP11蛋白以及TSP1与TSP11鸡尾酒式的蛋白组合为靶标抗原，所制备的犬抗细粒棘球绦虫疫苗可以明显的抑制细粒棘球绦虫病，这为细粒棘球绦虫病的科学有效防控提供技术支撑。

摘要： 本发明公开了细粒棘球绦虫3‑羟基酰基‑CoA脱氢酶蛋白及其应用，属于免疫学技术领域。所述细粒棘球绦虫3‑羟基酰基‑CoA脱氢酶蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；该蛋白通过对3‑羟基酰基‑CoA脱氢酶进行原核表达获取，将所得重组蛋白免疫犬，结果发现该蛋白可以明显提高减虫率和抑制细粒棘球绦虫节片生长发育，说明该蛋白可以作为抗细粒棘球绦虫疫苗的候选抗原，为抗细粒棘球绦虫疫苗的研制提供技术支撑和数据支持。

摘要： 本发明公开了一种细粒棘球绦虫重组蛋白CTLA4‑IgV‑EgG1Y162，并对小鼠进行免疫实验，结果显示该重组蛋白对小鼠表现出较好的免疫保护作用，并能够产生稳定的抗体，具备开发细粒棘球绦虫疫苗的潜力。

摘要： 本发明公开了从犬粪中分离细粒棘球绦虫虫卵及体外孵化出六钩蚴的方法。本发明所要保护的一个技术方案是制备细粒棘球绦虫六钩蚴的方法，包括分离得到细粒棘球绦虫虫卵，将所述细粒棘球绦虫虫卵使用胃蛋白酶进行孵化，使用脱壳液进行脱壳，使用Percoll培养液进行纯化得到细粒棘球绦虫六钩蚴。所述Percoll培养液由10×NCTC135、谷氨酰胺溶液、庆大霉素、Percoll混合而成。实验证明，使用本发明的制备方法可以孵化获得杂质少纯化度高、存活率高的六钩蚴，使用获得的六钩蚴经肝门静脉感染小鼠后可得到肝包虫病原发性感染模型，为后续涉及包虫病致病机理及药物研发等领域提供模型和研究基础。

摘要： 本发明公开了一种基于RPA技术的石渠棘球绦虫检测试剂盒及其应用。本发明根据石渠棘球绦虫线粒体基因序列设计并筛选了一套可用于RPA检测的引物及探针组合，建立了石渠棘球绦虫特异性实时荧光RPA检测方法。该方法采用重组酶和单链结合蛋白在常温下协同实现引物与模板的特异性结合，在DNA聚合酶的作用下延伸引物生成新的DNA链。本发明的石渠棘球绦虫特异性荧光RPA检测方法操作简便、快速、特异性强，适用于现场快速检测。

摘要： 本发明公开了一种重组细粒棘球绦虫Severin蛋白在检测囊型包虫病和细粒棘球绦虫感染试剂盒中的应用；所述试剂盒中的包被抗原为重组细粒棘球绦虫Severin蛋白。本发明首次克隆、表达出细粒棘球蚴重组蛋白rEgSeverin，免疫印迹显示，该蛋白具有良好的反应原性；发现rEgSeverin免疫小鼠后，诱导产生良好的体液和细胞免疫反应，以诱导产生Th2型细胞因子为主。本发明基于rEgSeverin蛋白建立了检测细粒棘球绦虫抗体的间接ELISA方法，制备了ELISA试剂盒，其特异性高于商品化ELISA试剂盒，为家畜细粒棘球绦虫感染及囊型包虫病流行病学调查和诊断提供了一种有效的方法。

摘要： 本发明公开了一种抗多房棘球绦虫成虫表膜抗原单克隆抗体的制备方法及应用，该方法通过杂交瘤技术采用Balb/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合建立杂交瘤细胞株Anti‑XJEmSfAg‑4D6。由该细胞株通过体外培养法、动物体内诱生腹水法获得特异性单克隆抗体，制备了多房棘球绦虫成虫免疫组化试剂盒。本发明为临床和科研机构提供了抗多房棘球绦虫成虫表膜抗原的特异性单克隆抗体，它既可用于ELISA实验对临床样品进行检测，也可用于免疫组化实验对病理标本进行检测，还可为包虫病研究部门提供便利的研究工具，在终末宿主感染多房棘球绦虫的检测中有广泛的应用价值，为泡型包虫病的基线调查和防控效果评估提供了技术支撑。

摘要： 本发明公开了一种基于生态位模型多房棘球绦虫自然疫源地分级预测方法，包括：S1：获取多房棘球绦虫自然疫源地监测点数据以及地理环境数据；S2：对地理环境数据做logistic回归分析，筛选出地理环境风险因子数据；根据筛选的地理环境风险因子建立生态位模型；S3：将监测点数据分为训练集和测试集；S4：将训练集输入生态位模型并检测，获取各环境风险因子变量在多房棘球绦虫自然疫源地中的相对重要性；S5：基于S4处理后的生态位模型对测试集进行分析，并输出多房棘球绦虫自然疫源地流行分布情况。本发明根据地理环境风险因子，可对多房棘球绦虫自然疫源地流行区进行相应的分级定性，填补了我国多房棘球绦虫传播风险预测技术领域空白。

摘要： 本发明公开了一种细粒棘球绦虫重组蛋白，其通过将4条EgG1Y162‑2蛋白片段通过linker序列“GSGGSG”串联，组成重组蛋白；实验表明，该重组蛋白疫苗可以促进树突状细胞的成熟。本发明首次公开了重组疫苗EgG1Y162‑2(4)的作用原理及效果，为制备防治人或畜的包虫病疫苗或诊断试剂盒的奠定基础。