细粒棘球蚴

摘要： 背景:泡状棘球蚴病与细粒棘球蚴病在体内的生长方式不同,泡状棘球蚴病呈浸润性生长,可侵袭组织血管、胆管;细粒棘球蚴病具有纤维性外囊壁包裹病变,对组织呈压迫性生长.两种棘球蚴病对血管侵袭、血管形成产生的作用尚不明确.目的:探究两种棘球蚴绦虫原头节对内皮祖细胞中血管生成相关因子的影响.方法:提取、培养、鉴定C57BL/6小鼠骨髓来源内皮祖细胞,提取两种棘球蚴绦虫原头节;将两种棘球蚴绦虫原头节分别与内皮祖细胞共培养24,48,60 h,ELISA检测细胞共培养上清液中血管内皮生长因子A、基质细胞衍生因子1α的分泌水平;Western blot检测各组内皮祖细胞中血管生成抑制蛋白1、血管内皮生长因子A、缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1α蛋白的相对表达量.结果 与结论:①泡状棘球蚴组共培养60 h时分泌血管内皮生长因子A、基质细胞衍生因子1α水平明显高于细粒棘球蚴组(P0.05);④结果表明,泡状棘球蚴促进血管生成,细粒棘球蚴对血管生成影响小.

摘要： 背景:目前,国内外有关细粒棘球蚴与间充质干细胞之间相互作用影响的报道很少,细粒棘球蚴与干细胞增殖方面的研究目前还是空白.目的:探讨细粒棘球蚴对骨髓间充质干细胞增殖的影响及机制.方法:分离、培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,分为单独骨髓间充质干细胞组、Notch信号通路特异性抑制剂DAPT组、细粒棘球蚴原头蚴组、细粒棘球蚴原头蚴+特异性抑制剂DAPT组.培养1,2,3 d采用CCK-8法检测各组骨髓间充质干细胞增殖情况,Western blot、实时荧光定量PCR检测各组骨髓间充质干细胞中Notch信号通路相关Notch-1,Jagged-1,Hes-1蛋白及mRNA表达.结果 与结论:①与单独骨髓间充质干细胞组相比,特异性抑制剂DAPT组细胞增殖受到抑制(P<0.05),细粒棘球蚴原头蚴组细胞增殖明显(P<0.05);与特异性抑制剂DAPT组相比,细粒棘球蚴原头蚴+特异性抑制剂DAPT组细胞增殖上调(P<0.05);②Notch-1,Jagged-1,Hes-1的蛋白及mRNA表达:特异性抑制剂DAPT组低于单独骨髓间充质干细胞组(P<0.05);细粒棘球蚴原头蚴组高于单独骨髓间充质干细胞组(P<0.05);细粒棘球蚴原头蚴+特异性抑制剂DAPT组高于特异性抑制剂DAPT组(P<0.05);③结果 表明,细粒棘球蚴可通过Notch信号通路促进骨髓间充质干细胞的增殖,这一现象可能为细粒棘球蚴外囊的形成机制奠定理论基础,从而解释细粒棘球蚴感染宿主后如何获得免疫逃逸,甚至可能为细粒棘球蚴病的预防和早期诊断打开一个新的研究方向.

摘要： 目的建立检测新疆喀什地区羊肝组织中细粒棘球绦虫的分子生物学方法,提高包虫病的早期诊断水平。方法对羊肝组织内获取棘球蚴囊,将囊内容物离心沉淀提取DNA,以细粒棘球绦虫线粒体cytochrome b基因为靶基因设计引物进行PCR扩增,引物设计考虑简并碱基。结果建立的简并引物q-PCR法特异性好,与常见的宿主动物(羊、驴和犬)基因组无交叉扩增现象,与肝内的常见寄生虫(肝片吸虫和莫尼茨绦虫)基因组无交叉扩增。梯度稀释的基因组DNA:10 ng、1 ng、100 pg、10 pg进行qPCR实验均能得到标准的S型曲线。PCR体系R^(2)=0.984,效率:92.6%,符合qPCR的相关要求。结论线粒体基因组的cytochrome b基因分析是棘球蚴病诊断和分型的有力工具。喀什地区首次应用简并引物q-PCR法检测细粒棘球绦虫,灵敏度高,特异性好,为下一步对该地区进行包虫病分子流行病调查提供了技术支撑。

摘要： 目的 探讨细粒棘球蚴囊液(EgCF)通过成核促进因子Wiskott-Aldrich综合征蛋白(WASP),肌动蛋白相关蛋白(Arp)2/3复合体和肌动蛋白丝(F-actin)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。方法 分离C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,分为对照组(Control),囊液(2.0 mg·mL^(-1))处理24 h组,囊液处理48 h组,囊液处理96 h组。流式细胞术检测细粒棘球蚴囊液对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响,Western blot检测WASP,Arp2的蛋白表达水平;激光共聚焦观察Arp2和F-actin蛋白表达及Arp2与F-actin的共定位与细胞骨架变化。结果 与对照组相比,囊液处理48 h和96 h后巨噬细胞吞噬能力显著降低(P<0.01);WASP,Arp2蛋白表达水平显著降低(P<0.01);免疫荧光结果显示,Arp2,F-actin平均荧光强度下降,Arp2与F-actin共定位程度下降,细胞伪足伸出不明显。结论 细粒棘球蚴囊液诱导小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力降低,与WASP、Arp2/3复合体和F-actin共同参与的细胞骨架异常重排有关。

摘要： 目的探讨程序性死亡受体-1(programmed cell death receptor 1,PD-1)、程序性死亡受体配体1(programmed cell death-Ligand-1,PD-L1)及相关炎症因子在棘球蚴感染免疫损伤中的免疫调控机制。方法将BALB/c小鼠分为2个组:对照组(40只)、模型组(40只)。采用原头蚴腹腔注射制备细粒棘球蚴感染模型,腹腔接种后2 d、8 d、1个月、3个月、6个月时每组取8只小鼠行内眦静脉取血,采用流式细胞术微球阵列法试剂盒(Cytometric Bead Array,CBA)检测小鼠外周血中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素17A(interleukin-17A,IL-17A)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量。取肝脏进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,采用免疫组织化学染色法检测小鼠肝组织中PD-1、PD-L1的表达。结果对照组腹部未见异常。模型组小鼠腹部出现明显膨隆,腹腔中有包囊。对照组小鼠肝组织结构正常,模型组小鼠6个月时肝脏有大片肝细胞坏死变性,可见大量炎性细胞浸润。对照组小鼠肝组织PD-1、PD-L1表达均呈阴性,模型组小鼠3个月时肝脏开始出现明显PD-1表达的阳性细胞,主要位于肝损伤区域,6个月时小鼠PD-1的表达主要集中于肝坏死区域周围,可见明显增多的阳性细胞存在。模型组2 d和8 d时均可见PD-L1表达的大量阳性细胞,1个月肝脏PD-L1呈低表达,3个月开始表达又升高。模型组小鼠TNF-α在感染2 d时高于对照组(t=15.587,P<0.05),后开始下降,从3个月开始时TNF-α升高,至6个月时达高峰,模型组小鼠血清中IL-17A在感染8 d时高于对照组(t=0.067,P<0.05),后一直呈上升趋势,至6个月时达高峰,IL-6在感染2 d开始即高于对照组,6个月时达高峰。结论IL-6、TNF-α、IL-17A参与了细粒棘球蚴感染导致的炎症反应。细粒棘球感染模型小鼠肝脏出现高表达的PD-1/PD-L1,随着时间延长,PD-1表达逐渐增强,尤其是细粒棘球蚴感染早期,PD-L1高表达,PD-1、PD-L1在感染前期、中期就开始发挥负调节作用,可进一步促进棘球蚴组织在体内迅速生长,参与肝脏的损伤作用。在细粒棘球蚴感染早、中期,阻断PD-1/PD-L1信号通路,将有助于抗棘球蚴感染。

摘要： 目的:探讨细粒棘球蚴通过调控巨噬细胞STAT6的表达介导其极化的机制。方法:使用细粒棘球蚴囊液(EgCF)处理巨噬细胞系Raw264.7,以未加EgCF组作为对照组,qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等实验检测M1、M2相关因子的表达水平,研究细粒棘球蚴对巨噬细胞极化的影响;使用EgCF处理巨噬细胞,并在实验组加入信号转导和转录激活因子6(STAT6)抑制剂,以未加抑制剂组及DMSO组作为对照组,qRT-PCR、流式细胞术等实验检测STAT6、M1、M2相关因子的表达水平,研究细粒棘球蚴通过调控巨噬细胞STAT6的表达,介导巨噬细胞极化的机制。结果:EgCF促进STAT6和M2相关因子的表达(P<0.05),抑制M1相关因子的表达(P<0.05)。STAT6抑制剂可抑制Raw264.7细胞中STAT6和M2相关因子表达,并上调M1相关因子表达。结论:EgCF通过促进STAT6的表达介导巨噬细胞向M2型极化。

摘要： 棘球蚴病是人或动物感染棘球绦虫的中绦期幼虫即棘球蚴所致的慢性寄生虫病,在全世界范围内流行。根据感染寄生虫的种类不同可分为泡型棘球蚴病和囊型棘球蚴病。临床所用药物,如阿苯达唑、吡喹酮、奥苯达唑等治愈率不高,副作用大,且可能出现耐药性等潜在风险,而疫苗具有安全、无残留、动物无休药期等优点。因此,研制有效的棘球蚴病疫苗对畜牧业发展和提高人类生活质量都有重要意义。目前,疫苗抗原的研发成果中已出现了较为成熟的Eg95抗原,以及大量亟待证明的候选抗原如EgA31、EgM、EgTpx、P29及TSP3等。利用这些抗原制成的不同种类的疫苗都起到了不同程度的免疫保护效果。不仅如此,在使用疫苗进行预防的同时,对易感动物进行准确甄别尤其是早期甄别在防控棘球蚴病的过程中也非常重要。目前,诊断试剂的研发也有大量候选抗原如AgB、Ag5以及Eg95-5等可供选择。论文将对疫苗和诊断候选抗原进行汇总、讨论,以期为该病疫苗和诊断试剂的研发提供参考。

摘要： 目的探究G蛋白偶联受体97(GPR97)、人抗原R(HuR)和脑信号蛋白3A(Sema3A)蛋白在细粒棘球蚴感染小鼠肝脏中的表达。方法采用门静脉注射法建立细粒棘球蚴感染C57BL/6小鼠模型,在感染第2周和第8周时采集小鼠肝脏标本,通过苏木精-伊红染色法(HE)和天狼星红染色观察肝脏病灶和纤维化程度,采用免疫组织化学法观察GPR97、HuR和Sema3A表达情况。结果感染第2周时,小鼠肝组织结构完整、肝索排列整齐、少量纤维细胞增生,有肉芽肿形成和成型纤维化包囊;感染第8周时,小鼠部分干细胞被破坏、肝索排列紊乱,有炎性病灶且包囊空泡化、外囊外膜层纤维化组织增生且致密;与感染2周时比较,感染第8周时细粒棘球蚴感染小鼠肝内囊生发层细胞、外囊外膜层细胞,周围肝组织细胞的GPR97、HuR和Sema3A蛋白表达免疫评分均升高(P<0.05)。结论GPR97、HuR和Sema3A在细粒棘球蚴感染小鼠第2周和第8周的肝脏空泡化包囊中均有不同程度的阳性表达,可能参与感染相关炎症反应。

摘要： 目的观察细粒棘球蚴囊液对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7分泌炎性因子的影响,并探讨其可能的机制。方法培养小鼠巨噬细胞,分为四组处理:对照、囊液(2.15 mg·mL^(-1))、LPS(1μg^(-1) mL^(-1))以及LPS+囊液。刺激5 h后,qRT-PCR检测TNF-α、IL-6和IL^(-1)0的表达;刺激1 h后,免疫印迹法检测STAT3和p-STAT3的蛋白水平。结果囊液能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中IL-6和TNF-α的mRNA表达,却明显促进IL^(-1)0的表达。进一步发现囊液能促进STAT3信号的活化水平,而当使用STAT3的抑制剂S3I-201后,STAT3的磷酸化水平明显降低,同时回升了TNF-α的表达。结论细粒棘球蚴囊液能抑制RAW264.7细胞炎症反应,IL^(-1)0/STAT3信号通路可能参与调控此过程。

摘要： 背景:细粒棘球蚴与泡状棘球蚴的生长方式不同,肝细粒棘球蚴病可以形成完整的纤维钙化囊壁,肝泡状棘球蚴病呈浸润性生长,不能形成完整的纤维钙化囊壁.骨髓间充质干细胞参与棘球蚴病纤维钙化囊壁的形成,但细粒棘球蚴和泡状棘球蚴钙化特征不同与骨髓间充质干细胞的作用尚不清楚.目的:比较2种棘球绦虫原头节对骨髓间充质干细胞钙化的作用,初步探讨2种棘球蚴钙化灶差异的形成机制.方法:提取、培养、鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞.将骨髓间充质干细胞分别与泡状棘球绦虫原头节、细粒棘球绦虫原头节共培养,以骨髓间充质干细胞单独培养为对照组.共培养1,4,7 d取骨髓间充质干细胞通过微量酶标法检测成骨标记物碱性磷酸酶活性,RT-qPCR检测BMP2和RUNX2 mRNA的表达,Western blot检测BMP2、RUNX2和P-Smad1/5/8的蛋白表达.结果与结论:①细粒棘球绦虫原头节共培养组、泡状棘球绦虫原头节共培养组1,4 d的碱性磷酸酶活性均高于对照组(P<0.05),且细粒棘球绦虫原头节共培养组1,4,7 d的碱性磷酸酶活性高于泡状棘球绦虫原头节共培养组(P<0.05).②Western blot结果显示:细粒棘球绦虫原头节共培养组和泡状棘球绦虫原头节共培养组1,4 d的BMP2、RUNX2、P-Smad1/5/8蛋白表达高于对照组(P<0.05),细粒棘球绦虫原头节共培养组高于泡状棘球绦虫原头节共培养组(P<0.05).③RT-qPCR结果显示:细粒棘球绦虫原头节共培养组1,4,7 d的BMP2、RUNX2 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05),细粒棘球绦虫原头节共培养组4,7 d的BMP2、RUNX2 mRNA表达水平显著高于泡状棘球绦虫原头节共培养组(P<0.05).泡状棘球绦虫原头节共培养组1,4,7 d的RUNX2 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05).④结果表明,棘球绦虫原头节与骨髓间充质干细胞共培养通过上调BMP-Smad1/5/8通路促进骨髓间充质干细胞钙化因子碱性磷酸酶和RUNX2的表达,共培养后期泡状棘球蚴促钙化作用明显减弱,细粒棘球蚴促钙化作用保持不变,提示该机制可能与2种棘球蚴生长方式不同相关.

摘要： 本研究系统地分析细粒棘球蚴原头节感染后Balb/c小鼠免疫细胞的功能状态,初步探索其在寄生虫抗感染免疫中的作用.利用E.Granulosus原头蚴感染Balb/c鼠,建立细粒棘球蚴病小鼠模型,通过流式细胞术监测不同感染阶段小鼠脾脏和外周血中执行固有和适应性免疫应答的免疫细胞的表型特点,分析它们的免疫功能.结果显示,感染组小鼠抗原递呈细胞较对照组比例有所上升,但其MHC-Ⅱ分子表达受到影响.不同感染阶段Gr-1+粒细胞、髓源抑制性细胞数量均显著增加.此外,随着感染进程推进,CD4+和CD8+T细胞表面激活标志CD69、CD44、CD40L表达上调,而CD62L分子表达下调,提示原头节感染诱导T细胞激活.但增殖实验表明感染后T细胞增殖能力显著下降.研究表明,细粒棘球蚴原头节感染改变了宿主免疫系统微环境,这种改变在慢性感染阶段尤为明显.小鼠在感染以后,虽然T细胞表现为激活表型,但大量扩增的免疫抑制性细胞可能抑制其增殖,从而影响T细胞对虫源分子的免疫应答.本研究提示这些抑制性细胞可能在寄生虫慢性感染阶段发挥着非常重要的免疫调节作用.研究它们的功能及相互作用将为新型寄生虫疫苗设计奠定基础.

摘要： 目的：本研究旨在分析青藏高原细粒棘球蚴的种群遗传结构,为细粒棘球蚴病的防控提供基础资料。方法：对采自青藏高原来自不同地区(青海、西藏、四川)不同宿主(人、绵羊、牛)的58株细粒棘球蚴进行了线粒体12S基因的全序列测序，结合已报道的青海地区42个细粒棘球蚴绵羊株的12S全序列进行种群遗传结构分析(延宁等,2012)。结果：本次研究56个分离株鉴定为基因型G1-G3；98个青藏高原地区分离株12S序列包含15个核苷酸变异位点，共检测出13个单倍型(ES1-ES13)，单倍型多样性(Hd)和核苷酸多样性(Pi)分别为0.381、0.00092.三个种群中，四川种群的核苷酸多样性最高(0.001353)，种内遗传距离最大(0.00135)。分子变异分析(AMOVA)显示，种群内的遗传变异大于种群间的遗传变异。构建单倍型NJ树和贝叶斯树显示，ES10和ES11形成一个有别于其他单倍型的单倍型类群。单倍型网络显示，单倍型ES1是优势单倍型，其它单倍型围绕它成辐射状，未发现有地理聚类。基因流(Nm值)和遗传分化指数(FST值)显示各种群间未形成显著的遗传分化。结论：青藏高原细粒棘球绦虫的基因型为G1-G3型；青藏高原细粒棘球绦虫种群内及种群间都存遗传多样性，其中四川种群的遗传变异性最大；青藏高原细粒棘球绦虫种群内变异是种群变异的主要来源；种群未形成地理聚类,遗传分化不明显。

摘要： 本研究以具有良好抗原性的截短的重组细粒棘球蚴Eg95s蛋白免疫Balb/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，同时以杆状病毒表达的Eg95蛋白作为抗原进行间接ELISA筛选，并经过3轮单克隆后，最终得到了12株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株485、4A5、4E7、4F7、3D7、3E7、3A6、3D6、386、3H5、3C7、3H7。间接ELISA方法检测其效价细胞培养上清为1.28×104～3.2×103，小鼠腹水效价为212～214。单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示，所有12株均为IgG1亚类，而且所有单克隆抗体的轻链均为K链。间接免疫荧光试验证明，12株单抗均能与感染表达Eg95重组杆状病毒的昆虫细胞产生特异性反应，为进一步研究Eg95s蛋白的结构特性及细粒棘球病的早期诊断奠定基础。

摘要： 目的：分析EG95s重组蛋白的免疫原性。方法：本研究分别诱导表达含有1、2、3拷贝EG95s的pET-1EG95s、pET-2EG95S和pET-3EG95s重组质粒，并用Hi S亲和纯化HIS-lEG95 S、HIS-2EG95s和HIS-3EG95s 3种重组蛋白。再以相同的免疫程序分别免疫8周龄BALB／cdx鼠，通过问接ELISA方法检测小鼠体内抗体水平的变化分析其免疫原性。结果：结果显示，经过改造~EG95s重组蛋白：HIS-1EG95s、HIS-2EG95s、HIS-3EG95s均保留了免疫原性，能诱导小鼠产生特异性抗体。3者抗体水平的比较结果显示HIS-1EG95s首次免疫后1周产生的抗体水平明显高于HIS-2EG95s、HIS-3EG95S，但免疫后2周开始，HIS-3EG95s抗体水平超过HIS-1EG95s组，并在二次免疫及三次免疫后持续高于HIS-1EG95S组。免疫后最终抗体效价显示HIS-1EG95 S和HIS-2EG95 S两组均为1：819200，而HIS-3EG95S组为1：1638400。结论：HIS-1EG95s与HIS-3EG95S均具有很好的免疫原性，虽HIS—EG95s在免疫初期免疫效果好，但串联3拷贝的EG95s后使得重组蛋白免疫效果更持久，更有利于产生更长效的免疫保护作用。本研究为羊包虫病的免疫预防奠定了科学基础。

摘要： 脑包虫病(Cerebral hydatid disease)的发病率较低,约为1-2％,儿童多见,男性略多于女性,从头颅大小及供血在全身所占的比例来看,儿童相对比成人为大,因此儿童的脑包虫发病率要比成人高数倍.Khald M等报道155例脑包虫,117例为儿童,占76％,平均年龄7岁.藏人和报告脑包虫27例,儿童占80％.脑包虫常和肝肺包虫同时发生,也可为原发包虫,脑包虫多为单发,位于幕上、大脑中动脉供血区,累及一个脑叶.亦可多发,分布于两侧.脑包虫还可发生于一些少见部位,如硬膜外、丘脑、脑室内及幕下等.脑包虫病分为细粒棘球蚴(echinococcus granulosus,EG)和泡状棘球蚴(echinococcus alveolaris,EA)两类,前者又称包虫囊肿,后者罕见,多为继发性.本文研究 脑包虫病的CT、MRI诊断。

摘要： 本发明公开了从犬粪中分离细粒棘球绦虫虫卵及体外孵化出六钩蚴的方法。本发明所要保护的一个技术方案是制备细粒棘球绦虫六钩蚴的方法，包括分离得到细粒棘球绦虫虫卵，将所述细粒棘球绦虫虫卵使用胃蛋白酶进行孵化，使用脱壳液进行脱壳，使用Percoll培养液进行纯化得到细粒棘球绦虫六钩蚴。所述Percoll培养液由10×NCTC135、谷氨酰胺溶液、庆大霉素、Percoll混合而成。实验证明，使用本发明的制备方法可以孵化获得杂质少纯化度高、存活率高的六钩蚴，使用获得的六钩蚴经肝门静脉感染小鼠后可得到肝包虫病原发性感染模型，为后续涉及包虫病致病机理及药物研发等领域提供模型和研究基础。

摘要： 本发明公开了一种鉴定和区分多房棘球蚴和石渠棘球蚴感染的PCR-RFLP检测试剂盒。该试剂盒包含如SEQ ID NO.1和2所示的Em和Es通用引物、限制性内切酶EcoR Ⅰ和/或Ssp Ⅰ；还包含PCR试剂和多房棘球蚴和石渠棘球蚴DNA模板标准物。通过提取待检测样品单个包囊的DNA作为模板，再使用通用引物进行PCR扩增，PCR产物纯化后再使用EcoR Ⅰ或Ssp Ⅰ内切酶酶切，对酶切产物进行电泳即可达到鉴定和区分多房棘球蚴和石渠棘球蚴感染的目的。本发明省去了测序造成的耗时、耗钱和数据处理的繁琐过程，且不需要复杂的操作系统，可以快速、方便、经济的区分鉴定野生啮齿动物感染多房棘球蚴还是感染石渠棘球蚴。

摘要： 本发明公开了一种用于微量样本分型检测多房棘球蚴和细粒棘球蚴的一管法巢式实时定量PCR检测试剂盒，设计内外引物、探针和PCR扩增条件的选择达到巢式PCR一管法完成，操作过程中避免开盖产生气溶胶污染，提高检测结果准确性。检测试剂盒内含有PCR内、外引物对序列、MGB分型检测探针序列、用于内质控的人源内参比基因引物对序列及探针序列。本发明可针对患者血清循环DNA等微量样本分型检测出含有多房棘球蚴和/或细粒棘球蚴的样品，准确度高，可准确地分型检测出多房棘球蚴与细粒棘球蚴源特异DNA序列；可以大批量快速分型鉴定多房棘球蚴与细粒棘球蚴；操作简便，可以对样本中微量虫源DNA进行扩增并达到分型检出的水平。

摘要： 本发明涉及一株重组细粒棘球蚴Eg95基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株，以蔗糖自杀质粒为载体，将含有特定启动子序列的细粒棘球蚴Eg95基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中，成功构建了能够高效表达型重组细粒棘球蚴Eg95基因的重组布鲁氏菌RA343‑Eg95株。该重组菌株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性，对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性，而且该重组菌免疫动物后，能产生针对细粒棘球蚴Eg95抗体，从而实现对细粒棘球蚴病的免疫保护。用该重组苗株制备的疫苗，免疫动物后能同时实现对布病和细粒棘球蚴病的双重免疫保护。

摘要： 本发明公开了一种环介导等温扩增检测并区分细粒棘球蚴和多房棘球蚴的引物组。所述引物组包括两对外引物和两对内引物，引物根据细粒棘球蚴重复序列及多房棘球蚴EmTriple83微卫星序列设计所得。本发明环介导等温扩增检测并区分细粒棘球蚴和多房棘球蚴的引物组，通过两个反应就可区分出阳性样本含有细粒棘球蚴或多房棘球蚴基因组DNA，最低可检测到1.6fg的模板DNA，检测灵敏度高、特异性强。

摘要： 本发明公开了一种可用于微量样本分型检测多房棘球蚴和细粒棘球蚴的一管法巢式实时定量PCR检测试剂盒，设计内外引物、探针和PCR扩增条件的选择达到巢式PCR一管法完成，操作过程中避免开盖产生气溶胶污染，提高检测结果准确性。检测试剂盒内含有PCR内、外引物对序列、MGB分型检测探针序列、用于内质控的人源内参比基因引物对序列及探针序列。本发明可针对患者血清循环DNA等微量样本分型检测出含有多房棘球蚴和/或细粒棘球蚴的样品，准确度高，可准确地分型检测出多房棘球蚴与细粒棘球蚴源特异DNA序列；可以大批量快速分型鉴定多房棘球蚴与细粒棘球蚴；操作简便，可以对样本中微量虫源DNA进行扩增并达到分型检出的水平。

摘要： 本发明公开了一种基于MGB探针分型检测多房棘球蚴及细粒棘球蚴的实时定量PCR方法及检测试剂盒，包括设计引物、设计MGB探针和PCR扩增条件的选择，检测试剂盒内含有PCR引物对的外引物对序列及MGB分型检测探针序列。本发明方法可有针对性的分型检测出含有多房棘球蚴和/或细粒棘球蚴的样品，准确度高，可以准确的分型检测出多房棘球蚴与细粒棘球蚴线粒体DNA；敏感度高，可以大批量快速分型鉴定多房棘球蚴与细粒棘球蚴；操作简便，可以对样本中微量虫源线粒体DNA进行扩增并达到分型检出的水平。

摘要： 本发明提供一种细粒棘球蚴AgB抗原的提取方法及该抗原在包虫感染抗体检测上的应用，属于生物检测技术领域，一种细粒棘球蚴AgB抗原的提取方法，包括以下步骤：步骤1、动物脏器上包囊的收集：在疫区屠宰场查找带包囊脏器，取回实验室后，冻至冰箱；步骤2、将步骤1收集的包囊进行安全性验证；步骤3、将包囊中AgB抗原进行提取并纯化；步骤4、将步骤3提取的AgB抗原进行验证。本发明通过分离纯化囊液中特异的AgB抗原，利用荧光免疫层析技术，使得包虫感染抗体检测更准确。

摘要： 本发明提供一种鉴别检测细粒棘球蚴免疫抗体和感染抗体的荧光试纸及其制备方法，属于生物检测技术领域，该荧光试纸包括PVC底板，所述PVC底板上从右至左依次设有样品垫、结合垫、检测垫和吸水纸，所述结合垫上设有与荧光微球连接的Eg95抗原和AgB抗原，荧光微球的直径为300nm，本发明可同时检测羊细粒棘球蚴病的免疫情况和感染情况，检测时间短，15min即可出结果，对操作人员实验操作水平要求不高，无需洗板等繁琐步骤，只需一步加样后，读数即可。

摘要： 本发明公开了细粒棘球蚴亲肌肉抗原重组蛋白在制备治疗哮喘药物中的应用。本发明将来源于中国大陆株的细粒棘球蚴的重组抗原亲肌肉抗原重组蛋白(NCBI的基因序列号为Z29075))对由卵清白蛋白(OVA)引起的哮喘小鼠模型进行干预，结果发现，本发明亲肌肉抗原重组蛋白用于制备治疗哮喘药物，该药物能有效升高Th1和Treg细胞数量，降低Th2和Th17细胞数量，降低哮喘中的炎症因子并升高哮喘中降低的IL‑10型细胞因子，能对哮喘起到很好的预防、干预和/或缓解效果，并且，该药物还具有副作用小、耐药性低的特点。