柯萨奇病毒A16型

摘要： 目的 通过对2019年西青区手足口病例标本的检测,了解和掌握我区手足口发病和流行特征,为临床诊治提供检测依据,避免手足口病的聚集和爆发流行,降低手足口发病(HFMD)率.方法 《WS 588-2018手足口病诊断》附录B手足口病相关肠道病毒核酸检测、《手足口病实验室手册(2010年第4版)》.结果 2019年我区共检测手足口病例95份,检出肠道病毒74份,EV71型1份,CA16型44份,CA6型24份,EV未分型5份.我区5～10月份为HFMD高发月份.我区HFMD以5岁以下儿童为主,5岁以下儿童发病人数占总发病人数的81.1％.结论 2019年我区HFMD流行的病毒型别主要为CA16型(59.5％),其次为CA6型(32.4％),我区HFMD检出呈现明显的年龄、性别、时间发病分布特征,今后要加大对儿童HFMD的监测力度,及时掌握流行特征,为控制疫情、临床诊疗提供检测依据.

摘要： 目的 建立3日龄BALB/c乳鼠CoxA16型手足口病动物模型,并进行免疫、病理学研究.方法 3日龄BALB/c乳鼠腹腔注射感染Cox A16型毒株,测定其50％致死剂量(LD50),观察其14 d内存活天数、临床症状打分.采用3LD50病毒攻毒,并观察其14 d内感染程度、体重变化、死亡数,计算平均存活天数、死亡率,至感染第6天发病达到高峰时取材,采用CBA法检测血清中MCP-1、MIP-1α、G-CSF含量,采用实时荧光定量RT-PCR法检测后肢肌肉组织、心脏、脑、肠病毒载量,采用HE染色观察后肢肌肉、脑病理病变情况.结果 Cox A16毒株感染3日龄BALB/c乳鼠,出现活动减少、后肢麻痹瘫痪、体重减轻、死亡,其病毒毒力为每毫升56 LD50.感染后14 d内,与正常对照组比较,模型组乳鼠生存天数、死亡率、临床感染评分、体重,均具有显著性差异(P<0.01).感染后6 d,血清中MCP-1、G-CSF含量均显著性升高(P<0.01).后肢肌肉组织、心脏、脑、肠病毒载量较正常组均显著升高(P<0.01),其中后肢肌肉组织病毒载量最高.HE染色病理观察表明,后肢肌肉组织有大面积萎缩、炎症,脑组织神经细胞有不同程度的萎缩.结论 成功构建了3日龄BALB/c乳鼠CoxA16型手足口病动物模型,为COX A16型手足口病药物评价及机制研究奠定基础.

摘要： 目的:探讨柯萨奇病毒A16型(CA16)3C蛋白对横纹肌肉瘤RD细胞凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:体外培养RD细胞,分为对照组(转染0.4μg空载体质粒pCMV-HA)、0.1μg pCMV-HA-3C组(转染0.1μg pCMV-HA-3C和0.3μg pCMV-HA)、0.2μg pCMV-HA-3C组(转染0.2μg pCMV-HA-3C和0.2μg pCMV-HA)、0.4μg pCMV-HA-3C组(转染0.4μg pCMV-HA-3C)和蛋白激酶B(AKT)激活剂SC79处理组(先用4 mg·L-1 SC79处理细胞4 h,然后转染0.2μg pCMV-HA-3C和0.2μg pCMV-HA).MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组RD细胞中Bcl-2同源拮抗剂/杀伤剂(Bak)、Bcl-2相关的细胞死亡激动剂(Bad)和p53上调凋亡调节因子(PUMA)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组RD细胞中Bad、Bak、PUMA、聚ADP核糖聚合酶(PARP)、裂解聚ADP核糖聚合酶(cleaved-PARP)、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,0.4μg pCMV-HA-3C组细胞存活率明显降低(P<0.01).与对照组比较,不同剂量pCMV-HA-3C组细胞凋亡率明显升高(P<0.01).与对照组比较,0.2μg pCMV-HA-3C组细胞中Bak、Bad和PUMA mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01).与对照组比较,不同剂量pCMV-HA-3C组细胞中cleaved-PARP和cleaved-caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01).SC79处理实验中,与对照组比较,0.2μg pCMV-HA-3组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05),p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与0.2μg pCMV-HA-3C组比较,SC79处理组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.01).结论:CA16型3C蛋白可能通过抑制AKT信号通路诱导RD细胞凋亡.

摘要： 目的 分析2018—2020年天津市西青区手足口病流行学和病原学特征,为本辖区制定手足口病防控策略提供参考依据.方法 对274例手足口病样本进行流行病学分析,运用实时荧光定量PCR法进行病原学检测.结果 男性发病率高于女性,比例1.63:1;易感人群为1～5岁儿童,占81.02％;发病高峰期为5—10月,占86.13％;肠道病毒(EV)阳性率为77.37％,其中,EV未分型(其他肠道病毒),EV71,柯萨奇病毒A16(Cox-A16),Cox-A6的构成比分别为9.91％、0.94％、36.32％、52.83％.对EV未分型、Cox-A16和Cox-A6进行统计学分析,不同性别、不同年龄组和不同年份的3种病毒型别构成比差异有统计学意义.结论 西青区手足口病,男性多于女性,1～5岁儿童为易感人群,季节性明显,CoxA16和CoxA6型肠道病毒型已成为本辖区手足口病的优势病毒型别.

摘要： 小儿手足口病(hand,foot and mouth diseast,HFMD)是肠道病毒引起的传染性疾病,以柯萨奇病毒A16型和肠道71型最为常见,多发生于5岁以下的婴幼儿,大多数症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹、溃疡为主要特征,个别患儿可并发心肌炎、脑膜炎等并发症【1】1临床表现1.1皮疹形态为圆形或椭圆形丘疹、斑丘疹、疱疹,周围绕以红晕;大小为3~5 mm,无疼痛和痒感。

摘要： 目的 分析2012至2019年东莞地区手足口病及疱疹性咽峡炎患儿肠道病毒谱变化及临床特征.方法 回顾性分析2012年1月-2019年12月在东莞市儿童医院儿科诊断为手足口病或疱疹性咽峡炎患儿的肠道病毒检测结果,并随机选取不同类型病毒感染患儿各50例,比较不同组患儿的临床特点.结果 本地区肠道病毒感染患儿平均年龄为1.9岁,且男性明显多于女性;自2016年以来总感染病例数呈逐年下降趋势,非肠道病毒71型(EV71)和非柯萨奇病毒A16型(CA16)感染组患儿C-反应蛋白(CRP)结果明显高于EV71和CA16感染组,且出现非典型部位皮疹的患儿较多.结论 本研究数据可为本地区相应防御策略的制定提供参考.

摘要： 目的:了解玉溪市红塔区2017～2018年手足口病的病原学监测情况,为红塔区的手足口病防控工作提供科学依据.方法:采用逆转录荧光聚合酶链反方法,对136例临床诊断为手足口病患儿的咽拭子标本进行肠道病毒71型、柯萨奇病毒 A16型及其他肠道病毒 RNA的检测.结果:136份标本中阳性检出率为53 .67%,2017年阳性检出率为43 .66%;2018年阳性检出率为64 .62%,2年间阳性率比较差异有统计学意义(P＜0 .05) .重症病例阳性率高于普通病例阳性率(P＜0 .05) .不同性别阳性率比较差异无统计学意义(P＞0 .05) . 73例实验室确证病例中,男:女性别比是1 .7 :1 ;职业分布以幼托儿童、散居儿童为主;年龄分布以0～5岁为主.病原学中EV-A71 、CV-A16 、其他肠道病毒同时存在,主要以其他病毒为主,占52 .11%,重症病例与普通病例不同病毒型构成比差异有统计学意义(P＜0 .05) ,重症病例以EV71型为主,占52 .63%,普通病例以其他肠道病毒为主,占55 .56%.结论:建议疫苗研制部门针对人群手足口病病毒谱的变化进行多价疫苗的研发,从而从根本上预防和控制手足口病.

摘要： 目的:柯萨奇病毒A16型(Coxsakievirus A16,CA16)与肠道病毒71型(Enterovirus type71,EV71)为手足口病(hand-foot-mouth-disease,HFMD)的主要病原。前期的临床研究证实EV71灭活疫苗对CA16没有显著的保护效果。因此,开发有效的抗CA16病毒感染的疫苗和药物对于公共卫生显得十分迫切。方法:本研究从全国各地采集到的34份手足口病患者样本,通过病毒分离、检定,经生物学、免疫学等特性比较,最终选取遗传稳定性高、免疫原性较好的GX-20K-D作为疫苗候选株。结果:该疫苗候选株在KMB17细胞上培养的过程中其18代以内均具有良好的遗传和生物学稳定性,并且其实验用灭活疫苗能在ICR小鼠体内诱导有效的特异性抗体。在受到病毒攻击时,此抗体能对乳鼠形成有效的保护。结论:GX-20K-D毒株能够作为疫苗候选株进行后续的研究开发。

摘要： 目的:柯萨奇病毒A16型(Coxsakievirus A16,CA16)与肠道病毒71型(Enterovirus type71,EV71)为手足口病(hand-foot-mouth-disease,HFMD)的主要病原。前期的临床研究证实EV71灭活疫苗对CA16没有显著的保护效果。因此,开发有效的抗CA16病毒感染的疫苗和药物对于公共卫生显得十分迫切。方法:本研究从全国各地采集到的34份手足口病患者样本,通过病毒分离、检定,经生物学、免疫学等特性比较,最终选取遗传稳定性高、免疫原性较好的GX-20K-D作为疫苗候选株。结果:该疫苗候选株在KMB17细胞上培养的过程中其18代以内均具有良好的遗传和生物学稳定性,并且其实验用灭活疫苗能在ICR小鼠体内诱导有效的特异性抗体。在受到病毒攻击时,此抗体能对乳鼠形成有效的保护。结论:GX-20K-D毒株能够作为疫苗候选株进行后续的研究开发。

摘要： 目的:柯萨奇病毒A16型(Coxsakievirus A16,CA16)与肠道病毒71型(Enterovirus type71,EV71)为手足口病(hand-foot-mouth-disease,HFMD)的主要病原。前期的临床研究证实EV71灭活疫苗对CA16没有显著的保护效果。因此,开发有效的抗CA16病毒感染的疫苗和药物对于公共卫生显得十分迫切。方法:本研究从全国各地采集到的34份手足口病患者样本,通过病毒分离、检定,经生物学、免疫学等特性比较,最终选取遗传稳定性高、免疫原性较好的GX-20K-D作为疫苗候选株。结果:该疫苗候选株在KMB17细胞上培养的过程中其18代以内均具有良好的遗传和生物学稳定性,并且其实验用灭活疫苗能在ICR小鼠体内诱导有效的特异性抗体。在受到病毒攻击时,此抗体能对乳鼠形成有效的保护。结论:GX-20K-D毒株能够作为疫苗候选株进行后续的研究开发。

摘要： 目的:柯萨奇病毒A16型(Coxsakievirus A16,CA16)与肠道病毒71型(Enterovirus type71,EV71)为手足口病(hand-foot-mouth-disease,HFMD)的主要病原。前期的临床研究证实EV71灭活疫苗对CA16没有显著的保护效果。因此,开发有效的抗CA16病毒感染的疫苗和药物对于公共卫生显得十分迫切。方法:本研究从全国各地采集到的34份手足口病患者样本,通过病毒分离、检定,经生物学、免疫学等特性比较,最终选取遗传稳定性高、免疫原性较好的GX-20K-D作为疫苗候选株。结果:该疫苗候选株在KMB17细胞上培养的过程中其18代以内均具有良好的遗传和生物学稳定性,并且其实验用灭活疫苗能在ICR小鼠体内诱导有效的特异性抗体。在受到病毒攻击时,此抗体能对乳鼠形成有效的保护。结论:GX-20K-D毒株能够作为疫苗候选株进行后续的研究开发。

摘要： 目的:探讨柯萨奇病毒A16型感染的手足口病(HFMD)患儿心肌酶谱及心电图变化及临床意义.方法:回顾性分析我院2010年05月至2011年09月收治的1314例手足口病患儿,其中经病毒核酸检测为柯萨奇病毒A16型感染的338例,检测此类患者心肌酶α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、激酸激酶同工酶(CK-MB)、激酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)的变化,同时,对心肌酶异常患儿均做12导联心电图检查.对心肌酶异常及心电图异常的例数进行统计分析.同时对发现心肌酶异常的患者给予磷酸肌酸钠营养心肌治疗.结果:心肌酶异常的105例，其中:LDH异常78例，异常率为74.3%;HBDH异常69例，异常率为65.7%;CK-MB异常8例，异常率为7.62%;CK异常19例，异常率为18.1%;AST异常17例，异常率为16.2%。12导心电图异常80例，其中:ST-T异常10例，异常率为，2.5%;窦性心动过速为52例，占65%;窦性心动过缓为5例，占6.25%;窦性心律不齐为20例，占25%;异位心动过速为1例，占1.25%;T-U融合波1例，占1.25%;左室高电压1例，占1.25%。经治疗7-10天后复查:心肌酶恢复正常84例;心电图恢复正常78例。其余患者随访一个月仅1例心肌酶未恢复正常，半年后出现心脏扩大，其余均恢复正常。结论:柯萨奇病毒A16型感染的手足口病患儿存在心肌酶以及心电图的改变，血清心肌酶的改变以LDH,HBDH为主，心电图变化以速率的变化为主，在一定程度上反映手足口病患儿存在心肌损害，对临床诊治具有一定指导意义，以期减少严重并发症的发生。

摘要： 目的:探讨柯萨奇病毒A16型感染的手足口病(HFMD)患儿心肌酶谱及心电图变化及临床意义.方法:回顾性分析我院2010年05月至2011年09月收治的1314例手足口病患儿,其中经病毒核酸检测为柯萨奇病毒A16型感染的338例,检测此类患者心肌酶α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、激酸激酶同工酶(CK-MB)、激酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)的变化,同时,对心肌酶异常患儿均做12导联心电图检查.对心肌酶异常及心电图异常的例数进行统计分析.同时对发现心肌酶异常的患者给予磷酸肌酸钠营养心肌治疗.结果:心肌酶异常的105例，其中:LDH异常78例，异常率为74.3%;HBDH异常69例，异常率为65.7%;CK-MB异常8例，异常率为7.62%;CK异常19例，异常率为18.1%;AST异常17例，异常率为16.2%。12导心电图异常80例，其中:ST-T异常10例，异常率为，2.5%;窦性心动过速为52例，占65%;窦性心动过缓为5例，占6.25%;窦性心律不齐为20例，占25%;异位心动过速为1例，占1.25%;T-U融合波1例，占1.25%;左室高电压1例，占1.25%。经治疗7-10天后复查:心肌酶恢复正常84例;心电图恢复正常78例。其余患者随访一个月仅1例心肌酶未恢复正常，半年后出现心脏扩大，其余均恢复正常。结论:柯萨奇病毒A16型感染的手足口病患儿存在心肌酶以及心电图的改变，血清心肌酶的改变以LDH,HBDH为主，心电图变化以速率的变化为主，在一定程度上反映手足口病患儿存在心肌损害，对临床诊治具有一定指导意义，以期减少严重并发症的发生。

摘要： 目的:探讨柯萨奇病毒A16型感染的手足口病(HFMD)患儿心肌酶谱及心电图变化及临床意义.方法:回顾性分析我院2010年05月至2011年09月收治的1314例手足口病患儿,其中经病毒核酸检测为柯萨奇病毒A16型感染的338例,检测此类患者心肌酶α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、激酸激酶同工酶(CK-MB)、激酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)的变化,同时,对心肌酶异常患儿均做12导联心电图检查.对心肌酶异常及心电图异常的例数进行统计分析.同时对发现心肌酶异常的患者给予磷酸肌酸钠营养心肌治疗.结果:心肌酶异常的105例，其中:LDH异常78例，异常率为74.3%;HBDH异常69例，异常率为65.7%;CK-MB异常8例，异常率为7.62%;CK异常19例，异常率为18.1%;AST异常17例，异常率为16.2%。12导心电图异常80例，其中:ST-T异常10例，异常率为，2.5%;窦性心动过速为52例，占65%;窦性心动过缓为5例，占6.25%;窦性心律不齐为20例，占25%;异位心动过速为1例，占1.25%;T-U融合波1例，占1.25%;左室高电压1例，占1.25%。经治疗7-10天后复查:心肌酶恢复正常84例;心电图恢复正常78例。其余患者随访一个月仅1例心肌酶未恢复正常，半年后出现心脏扩大，其余均恢复正常。结论:柯萨奇病毒A16型感染的手足口病患儿存在心肌酶以及心电图的改变，血清心肌酶的改变以LDH,HBDH为主，心电图变化以速率的变化为主，在一定程度上反映手足口病患儿存在心肌损害，对临床诊治具有一定指导意义，以期减少严重并发症的发生。

摘要： 目的:探讨柯萨奇病毒A16型感染的手足口病(HFMD)患儿心肌酶谱及心电图变化及临床意义.方法:回顾性分析我院2010年05月至2011年09月收治的1314例手足口病患儿,其中经病毒核酸检测为柯萨奇病毒A16型感染的338例,检测此类患者心肌酶α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、激酸激酶同工酶(CK-MB)、激酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)的变化,同时,对心肌酶异常患儿均做12导联心电图检查.对心肌酶异常及心电图异常的例数进行统计分析.同时对发现心肌酶异常的患者给予磷酸肌酸钠营养心肌治疗.结果:心肌酶异常的105例，其中:LDH异常78例，异常率为74.3%;HBDH异常69例，异常率为65.7%;CK-MB异常8例，异常率为7.62%;CK异常19例，异常率为18.1%;AST异常17例，异常率为16.2%。12导心电图异常80例，其中:ST-T异常10例，异常率为，2.5%;窦性心动过速为52例，占65%;窦性心动过缓为5例，占6.25%;窦性心律不齐为20例，占25%;异位心动过速为1例，占1.25%;T-U融合波1例，占1.25%;左室高电压1例，占1.25%。经治疗7-10天后复查:心肌酶恢复正常84例;心电图恢复正常78例。其余患者随访一个月仅1例心肌酶未恢复正常，半年后出现心脏扩大，其余均恢复正常。结论:柯萨奇病毒A16型感染的手足口病患儿存在心肌酶以及心电图的改变，血清心肌酶的改变以LDH,HBDH为主，心电图变化以速率的变化为主，在一定程度上反映手足口病患儿存在心肌损害，对临床诊治具有一定指导意义，以期减少严重并发症的发生。

摘要： 目的:探讨柯萨奇病毒A16型感染的手足口病(HFMD)患儿心肌酶谱及心电图变化及临床意义.方法:回顾性分析我院2010年05月至2011年09月收治的1314例手足口病患儿,其中经病毒核酸检测为柯萨奇病毒A16型感染的338例,检测此类患者心肌酶α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、激酸激酶同工酶(CK-MB)、激酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)的变化,同时,对心肌酶异常患儿均做12导联心电图检查.对心肌酶异常及心电图异常的例数进行统计分析.同时对发现心肌酶异常的患者给予磷酸肌酸钠营养心肌治疗.结果:心肌酶异常的105例，其中:LDH异常78例，异常率为74.3%;HBDH异常69例，异常率为65.7%;CK-MB异常8例，异常率为7.62%;CK异常19例，异常率为18.1%;AST异常17例，异常率为16.2%。12导心电图异常80例，其中:ST-T异常10例，异常率为，2.5%;窦性心动过速为52例，占65%;窦性心动过缓为5例，占6.25%;窦性心律不齐为20例，占25%;异位心动过速为1例，占1.25%;T-U融合波1例，占1.25%;左室高电压1例，占1.25%。经治疗7-10天后复查:心肌酶恢复正常84例;心电图恢复正常78例。其余患者随访一个月仅1例心肌酶未恢复正常，半年后出现心脏扩大，其余均恢复正常。结论:柯萨奇病毒A16型感染的手足口病患儿存在心肌酶以及心电图的改变，血清心肌酶的改变以LDH,HBDH为主，心电图变化以速率的变化为主，在一定程度上反映手足口病患儿存在心肌损害，对临床诊治具有一定指导意义，以期减少严重并发症的发生。

摘要： 目的：明确4 起手足口病暴发疫情的病原体并对其进行基因特征分析。方法：收集4 起手足口 病疫情部分病例的粪便，用RT-PCR 的方法检测肠道病毒71 型(EV71)和柯萨奇病毒A16 型(CA16)， 选择4 个代表性样品进行VP1 基因的扩增和核苷酸序列测定，测序结果利用dＮASTAR 和BｌAST 软件进 行比对分析。结果：4 起手足口病疫情的样品CA16 检测均为阳性，EV71 检测均为阴性。4 个代表株与 标准株TAIｎAｎ5079－98 的VP1 基因核苷酸同源性波动于95．2％～95．6％，4 个毒株之间的核苷酸同源 性波动于93．9％～99．4％。在基因系统发生树上，这4 个毒株均属于C 基因型，但是处于3 个不同的进 化分支上。结论：引起这4 起手足口病疫情的病原为CA16，4 个毒株均属于C 基因型。

摘要： 本发明实施例公开了一种肠道病毒通用型、柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型核酸荧光PCR检测试剂盒，包括RNA提取溶液、RNA洗脱液、内标、PCR反应液、EV/CA16/EV71酶混合液、EV/CA16/EV71阳性对照品、EV/CA16/EV71阴性对照品；本试剂盒在同一样本中同时检测肠道病毒通用型、柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型三种肠道病毒，而不能检测出其他病原体RNA并且检测灵敏度可达400copie/ml，检测范围为4.0E+02～4.0E+08copies/ml，为早期诊断肠道病毒通用型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型感染提供可靠的实验证据。

摘要： 本发明提供一种检测肠道病毒并区分柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型的试剂盒，利用TaqMan探针多色荧光PCR技术，选择在病毒序列相对保守序列设计肠道病毒通用引物，并通过特异性探针检测肠道病毒通用型、肠道病毒71型以及柯萨奇病毒A16型。本发明试剂盒检测过程无需荧光PCR后的熔解曲线分析而仅凭不同荧光标记的探针检测就能检测肠道病毒，并区分肠道病毒71型以及柯萨奇病毒A16型；同时本发明还引入了人工构建的内参照系统，用于避免检测结果的假阴性；试剂盒检测灵敏度高、结果稳定可靠、使用方便，适合于环境、疾控以及临床中肠道病毒、柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型的快速检测。

摘要： 本公开涉及一种多重PCR检测柯萨奇病毒A6型/A10型/A16型/肠道病毒71型/肠道病毒通用型用引物探针组。本公开还提供了一种多重荧光定量PCR检测柯萨奇病毒A6型/A10型/A16型/肠道病毒71型/肠道病毒通用型的试剂盒，所述试剂盒包括本公开所述的引物探针组。通过上述技术方案本公开为食品中柯萨奇病毒A6型、A10型、A16型、肠道病毒71型及肠道病毒通用型的快速筛查提供了完备的解决方案，能够进一步提升手足口病的应急处置和综合防控能力，为降低手足口病在人群大范围传播提供必要的技术保障，进而消除传染病暴发造成的社会影响和经济损失。

摘要： 本发明提供了肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒其它各亚型三色荧光RT-PCR联合检测方法及其试剂盒，快速准确的检测出样品中肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒其它各亚型核酸的方法。该方法包括：(1)采集和运送感染或疑似病人样本；(2)样本预处理和提取RNA；(3)一步PCR-三色荧光探针体外扩增法对样本进行检测；(4)扩增反应结束后根据每个扩增反应的荧光强度对相应样本进行分析，从而判断所采集的样本中肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒其它各亚型核酸的存在，并能够对对其进行准确定量(图3)，实现了对该类病毒实时快速精确联合检测之目的。

摘要： 本发明提供一种用于检测柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型的荧光RT‑PCR试剂及方法。本发明提供的柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型荧光RT‑PCR检测试剂所用的引物及探针是基于公众基因序列数据库最新的柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型的基因序列信息设计、筛选而得出，具有良好的包容性、特异性及反应性能，试剂中含尿嘧啶DNA糖基化酶和dUTP，能防止PCR产物气溶胶可能造成的假阳性结果，进一步保证检测的准确性。另外，本发明通过冷冻干燥技术将柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型荧光RT‑PCR检测试剂制成可常温保存的冻干型试剂，避免了常规液体荧光PCR检测试剂因保存温度变化或反复冻融而失效的风险，降低了运输和管理成本。

摘要： 本发明公开了一种人肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组2型VP1重组蛋白、多克隆抗体及其应用。本发明的技术方案要点为：提供了一种EV‑A71和CV‑A2VP1重组蛋白纯化、多克隆抗体制备的方法，并应用制备的小鼠多克隆抗体建立了蛋白质免疫印迹和免疫过氧化物酶单层细胞试验检测EV‑A71和CV‑A2的方法。本发明所述的这种EV‑A71和CV‑A2VP1蛋白纯化方法简便快捷、操作性强、回收率高，多克隆抗体制备方法无需免疫佐剂，节约了成本，制备的小鼠多克隆抗体能检测细胞样品中的EV‑A71和CV‑A2，特异性和重复性好。

摘要： 本发明公开一种快速检测柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型的RDA方法及试剂盒，包括特异性引物对以及RDA荧光标记探针，以实现对柯萨奇病毒A16型（CA16）、肠道病毒71型（EV71）进行安全、特异、灵敏、简便的检测，从而弥补现有传统检测技术的不足。此方法提供的试剂盒可省去核酸提取步骤，并在37～42°C恒温条件下、20min内实现柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型的检测，特异性为100％，非常适用于现场快速检测。与普通PCR方法相比，RDA荧光法是在恒温下反应，不需变温，不需复杂仪器，而且反应时间短。因此，本发明的方法及其试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、成本低廉等特点，为柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型的现场快速检测筛查提供有效的技术手段，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种直接检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒包含了荧光素标记的抗体、荧光染料伊文斯兰、封片剂、载玻片和质控玻片、细胞固定液、PBS溶液、PBST溶液、1％Triton‑X100、细胞对照品、防腐剂叠氮化钠和抗体稳定剂BSA。利用本发明提供的试剂盒，可以直接检测样本细胞内肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型。本发明的试剂盒充分利用了直接免疫荧光法在自动化和高通量的优势，能够实现对病毒快速、灵敏、高效的检测，对于临床的快速准确诊断具有重要意义，能满足大型医院和基层医院的不同需求。

摘要： 本发明公开了一种同时检测EV71型肠道病毒和A10型柯萨奇病毒的检测试剂及试剂盒。该检测试剂包括上游引物EV71F1、下游引物EV71R1、探针EV71P1、上游引物CA10F2、下游引物CA10R2以及探针CA10P2。采用该检测试剂处理样本后，能够实现同时对样本中EV71型肠道病毒和A10型柯萨奇病毒扩增，实现对一管标本同时检测EV71型肠道病毒和A10型柯萨奇病毒两个项目。节省检测时间，灵敏度较高。

摘要： 本发明公开了一种同时检测EV71型肠道病毒和A6型柯萨奇病毒的检测试剂及试剂盒。该检测试剂包括上游引物EV71F1、下游引物EV71R1、探针EV71P1、上游引物CA6F2、下游引物CA6R2以及探针CA6P2。采用该检测试剂处理样本后，能够实现同时对样本中EV71型肠道病毒和A6型柯萨奇病毒扩增，实现对一管标本同时检测EV71型肠道病毒和A6型柯萨奇病毒两个项目。节省检测时间，灵敏度较高。