乌司他丁预处理对HepG2细胞氧化损伤保护作用的研究

摘要

目的探讨乌司他丁(UTI)预处理对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用。方法将HepG2细胞常规培养传代,随机分为H2O2组,UTI100+H2O2组、UTI500+H2O2组、UTI1000+H2O2组及对照组,其中对照组不作任何处理,H2O2组,UTI100+H2O2组、UTI500+H2O2组、UTI1000+H2O2组分别加入浓度为0μmol/L、100μmol/L、500μmol/L、1000μmol/LUTI预处理,24h后加入300μmol/LH2O2处理4h,体外模拟肝细胞损伤。CCK-8试剂盒和LDH试剂盒检测LDH变化评价细胞损伤;TUNEL检测细胞凋亡率;Westernblot检测HepG2细胞中LC3-Ⅱ、Cleavedcaspase-3的表达变化情况。结果与H2O2组相比较,CCK-8和LDH检测结果提示,各TUI预处理组能改善细胞生存环境,减轻H2O2对HepG2细胞的应激损伤,提高细胞活力(P<0.05);TUNEL检测提示预处理可降低氧化应激导致的凋亡率(P<0.05);Westernblot结果提示,与H2O2组比较,UTI可上调LC3-Ⅱ的表达(P<0.05),促进细胞自噬的发生,降低Cleaved caspase-3表达,抑制细胞凋亡(P<0.05)。结论UTI可以通过激活LC3-Ⅱ表达,促进细胞自噬,发挥保护作用,拮抗氧化应激导致的细胞凋亡。