郑州地区耐多药结核分枝杆菌gyrA和gyrB基因突变特征及对氟喹诺酮类药物耐药研究

摘要

目的 分析郑州地区耐多药(MDR)结核分枝杆菌(MTB)临床分离株中gyrA和gyrB基因突变特征及其对氟喹诺酮类(FQs)药物耐药的特点.方法 收集2015年5月至2016年12月河南省胸科医院收治的256例肺结核患者的痰标本,进行MTB固体罗氏培养、液体分枝杆菌培养,MTB培养阳性者行比例法药物敏感性试验,采用聚合酶链式反应扩增MDR MTB的gyrA和gyrB基因,对扩增产物进行测序和序列比对分析.应用耐药基因判断MDR MTB对FQs药物耐药的敏感性和特异性.结果 256例患者中MTB培养阳性215例,其中非MDR肺结核患者137例,MDR肺结核患者78例.78株MDR MTB临床分离株对氧氟沙星(Ofx)、0.5 mg· L-1莫西沙星(Mfx 0.5)及2.0 mg·L-1莫西沙星(Mfx 2.0)的耐药率分别为55.1％(43/78)、55.1％(43/78)、32.1％(25/78);137株非MDRMTB临床分离株对Ofx、Mfx 0.5及Mfx 2.0的耐药率分别为7.3％(10/137)、5.8％ (8/137)、0.7％(1/137);非MDRMTB临床分离株对Ofx、Mfx0.5、Mfx2.0的耐药率显著低于MDR MTB临床分离株(x2=61.21、66.73、45.87,P＜0.001).gyrA基因、gyrB基因在Ofx耐药株中的突变率分别为90.7％ (39/43)、11.6％ (5/45);gyrA基因、gyrB基因在Mfx 0.5耐药株中的突变率分别为88.4％(38/43)、11.6％(5/43);gyrA基因、gyrB基因在Mfx 2.0耐药株中的突变率分别为100.0％(25/25)、12.0％(3/25).以FQs药物敏感性试验结果为金标准,gyrA基因突变判断MDR MTB对Ofx、Mfx 0.5、Mfx 2.0耐药的敏感性分别为90.7％、88.4％、58.1％,特异性分别为88.6％、85.7％、100.0％,gyrB基因突变判断MDR MTB对Ofx、Mfx 0.5、Mfx 2.0耐药的敏感性分别为62.5％、62.5％、37.5％,特异性分别为45.7％、45.7％、68.6％,检测gyrA基因突变判断MDR MTB对FQs药物耐药的特异性高于gyrB基因突变(x2=17.86、15.44、13.92,P＜0.001),检测gyrA基因突变判断MDR MTB对Ofx耐药的敏感性高于gyrB基因突变(x2 =4.53,P＜0.05).结论 郑州地区MDR MTB对FQs耐药率较高,耐药的主要原因是gyrA基因突变,最常见的gyrA基因突变位于94位点.