摘要:
目的探讨下肢静脉高压对血小板活化及静脉管壁重构的影响。方法将30只SD大鼠随机分成3组,各10只。A、C组应用髂静脉、股静脉缩窄法建立大鼠后肢静脉高压模型,分别以生理盐水、氯吡格雷25mg/(kg·d)饲喂;B组为假手术组。14d后,检测大鼠断尾出血时间;同时心脏取血,分离纯化血小板和单核细胞,应用流式细胞术检测血小板内部残留血小板因子4(PF4)以及单核细胞分化抗原115(CD115)-CD41双阳性比例,以评估血小板活化及血小板-单核细胞聚合比例;同时取大鼠股静脉组织进行Masson及CD115免疫组化染色。再取C57小鼠15只,随机分为3组,各5只,富血小板血浆(PRP)+凝血酶(thrombin)+氯吡格雷(clopi)组以氯吡格雷10mg/(kg·d)灌胃,PRP组及PRP+thrombin组以等量生理盐水灌胃,7d后内眦取血,离心获得PRP,将PBS及3组PRP分别与无血清DMEM制成体积分数0.05的条件培养液,分别与RAW264.7小鼠腹腔巨噬细胞Transwell共培养(PRP+thrombin组及PRP+thrombin+clopi组以激活剂活化),检测血小板对单核巨噬细胞迁移功能的影响。结果3组断尾出血时间比较,C组明显长于A组和B组,差异有统计学意义(F=243.10,P0.05)。A组循环血小板内的PF4残余较B组和C组减少,血小板-单核细胞聚合百分比、股静脉管壁CD115表达及纤维化程度均明显升高,差异有显著性(F=26.40~243.10,P<0.01)。Transwell实验显示,PBS组细胞迁移数明显少于PRP组,PRP+thrombin组明显多于PRP+thrombin+clopi组,差异有显著性(F=25.70,P<0.01)。结论下肢静脉高压可以引起血小板异常活化及血小板-单核细胞聚合比例增高,并最终引起静脉管壁重塑。氯吡格雷可有效抑制静脉高压引起的血小板活化,同时可减轻管壁纤维化。