基于上转发光技术的奶粉及牛奶中黄曲霉毒素M1快速定量检测方法研究

摘要

目的利用上转发光免疫层析技术（AFM1-UPT-LF）建立奶粉及牛奶中黄曲霉毒素M1的快速检测方法。方法以UCP颗粒作为标记物,无需样品前处理,采用竞争免疫反应建立AFM1-UPT-LF方法。以AFM1阴性的奶粉、牛奶配制系列浓度AFM1标准品,确定检测方法的灵敏度、特异性、标准曲线与定量范围、精密度、准确度及回收率,并对实际样品进行定性和定量检测评价。结果利用AFM1-UPT-LF可实现奶粉及牛奶中AFM1定性及定量检测,20 min内即可完成。奶粉中检测下限可达0.1μg/kg,在0.1-0.7μg/kg间具有较好线性（r=-0.99359,P〈0.01）,牛奶中检测限为0.3μg/L,在0.3-0.7μg/L间具有较好线性（r=-0.99938,P〈0.05）。在定性检测中,对奶粉检测灵敏度为100%,特异性为85%,受试者工作特征（ROC）的曲线下面积（AUC）为0.978±0.036;牛奶检测中灵敏度为81%,特异性为88%,ROC的AUC为0.891±0.099;与LC-MS结果进行2检验,P值均大于0.05,两种方法差异无显著性意义。在定量检测评价中,AFM1-UPT-LF对于奶粉及牛奶中AFM1检测均具有较好回收率,与LC-MS比较差异无显著性意义（奶粉：t=0.66,P〉0.05;牛奶：t=1.01,P〉0.05）。结论利用UPT-LF所建立的AFM1-UPT-LF方法可实现奶粉及牛奶中AFM1定性及定量快速检测,检出限满足国标限量标准要求;该法无需样品处理,操作简便,可满足食品安全中对现场快速检测的需求。