平颏海蛇毒鼠源单链抗体噬菌体展示文库的构建

摘要

为了研发新型小分子类抗海蛇毒药物,本研究利用平颏海蛇(Hydrophis curtus)毒免疫成年小鼠,使其产生免疫应答,以小鼠的脾脏总RNA为基础,反转录构建cDNA文库,分别扩增抗体轻链和重链可变区片段并通过重叠延伸PCR技术构建平颏海蛇毒小鼠单链抗体基因.构建完成后,该基因随后被成功重组至噬菌体,并利用大肠杆菌原核表达系统建立了单链抗体噬菌体展示文库.经多轮富集后,最终获得弱阳性克隆.本研究获得了一套构建平颏海蛇毒鼠源单链抗体噬菌体文库并筛选阳性克隆的方案.