噬菌体展示技术

摘要： 高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)可诱发女性宫颈癌,HPV45是HPV主要高危亚型之一,L1蛋白是主要的保护性蛋白.以大肠杆菌表达、纯化获得的重组蛋白SUMO-45 L1作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗HPV45 L1蛋白的单克隆抗体,并以单克隆抗体3C11为靶分子,使用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行亲和淘选,三轮筛选后挑选12个与单抗3C11反应较强的克隆进行测序并分析.结果表明,噬菌体所展示的氨基酸序列与HPV45 L1蛋白序列"381VPNTYD386"相同,将其进行肽的合成,并通过斑点-酶联免疫吸附测定(dot en-zyme-linked immunosorbent assay,Dot-ELISA)和间接竞争ELISA鉴定,最终鉴定出单克隆抗体3C11识别的L1蛋白线性表位"381VPNTYD386".该表位的鉴定,为进一步分析HPV45 L1蛋白的结构和功能关系奠定了基础.

摘要： 目的构建基于噬菌体展示技术和新型冠状病毒的抗体检测方法,并验证其应用效果。方法制备含有新型冠状病毒受体结合域(RBD)及E484K、N501Y突变RBD片段的重组噬菌体,采用Western blotting法验证重组噬菌体展示效果。使用高吸附ELISA板包被RBD抗体及包被液作为实验组及对照组,分别加入RBD、突变RBD重组噬菌体以结合抗体,qPCR法扩增噬菌体的基因片段以间接地反映抗体与重组噬菌体的特异性结合情况。使用高吸附ELISA板包被经RBD免疫后分离的羊驼血清,加入含RBD片段的重组噬菌体及不含重组片段的噬菌体,qPCR法观察重组噬菌体在生物样本中与RBD抗体的特异性结合情况。使用高吸附ELISA板包被RBD抗体,加入含RBD及含突变RBD的重组噬菌体,qPCR法观察点突变对RBD与抗体结合能力的影响。结果通过Western blotting可以检测到清晰且符合预期大小的重组噬菌体条带。包被RBD抗体的实验组扩增噬菌体基因片段拷贝数均高于对照组(P均<0.01);加入含RBD片段重组噬菌体的羊驼血清扩增片段拷贝数高于加入无外源片段噬菌体的扩增片段拷贝数(P<0.01);加入含RBD片段重组噬菌体的RBD抗体扩增片段拷贝数高于加入含突变RBD片段重组噬菌体的扩增片段拷贝数(P<0.01)。结论成功构建基于噬菌体展示技术的抗体检测方法,该方法展示新型冠状病毒RBD片段的效果良好,并且在研究由病原突变导致的免疫逃逸方面具有潜在价值。

摘要： 噬菌体展示技术作为目前应用广泛的展示抗体技术,逐渐成为生产基因工程抗体的重要工具。噬菌体展示技术是以噬菌体或噬菌粒为载体,通过将外源多肽基因整合到噬菌体基因中,以融合表达的形式将外源蛋白展示在噬菌体表面的分子生物学技术。近年来,噬菌体展示技术在抗体筛选领域的应用越来越广泛,与传统制备抗体的方法相比,噬菌体展示技术具有通量高、成本低、操作简单等特点,且通过该技术筛选得到的抗体不仅可在标签蛋白的辅助下进行选择和纯化,还可通过基因测序的方法得到单链抗体的完整基因序列。笔者首先对噬菌体抗体库进行分类,根据抗体的来源将噬菌体抗体库分为天然抗体库和免疫抗体库,通过免疫动物制备的抗体文库的特异性、抗体阳性率明显高于天然抗体文库;其次简述了噬菌体抗体库的构建流程,其中噬菌体表达载体的选择是展示技术的关键,整合了噬菌粒基因的辅助噬菌体侵染其特异性菌株,从而通过抗生素平板对该系统进行选择性筛选;最后讨论了噬菌体展示技术在疾病防控领域应用的研究进展,抗体的首次人源化使同源性抗体在临床上应用成为可能,后续用于预防和治疗病毒性疾病的动物同源性抗体的研发进一步证明了噬菌体展示技术用于生产诊断或潜在治疗试剂的能力。该综述主要聚焦于噬菌体展示系统的构建及其在疾病防控领域的应用,以期对后续通过噬菌体展示技术筛选单链抗体的应用提供指导。

摘要： 单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb)是由单一B细胞克隆产生的针对特异性靶抗原的抗体,主要发挥的生物学功能包括中和抗原、调理细胞吞噬、激活补体以及介导细胞毒作用。MAb具有结构均一、特异性强、排除与其他蛋白抗原的交叉反应等优势,因此被广泛应用于生物医学基础研究和临床诊断治疗的许多领域。从最早的鼠源性MAb研发至全人源MAb,新的MAb制备技术应运而生。目前,应用较为广泛的MAb技术包括杂交瘤技术、噬菌体展示技术和单个B细胞抗体制备技术(图1)。此外,嵌合抗体技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术、酵母细胞展示技术等也可用于MAb制备。本文概述了这几种技术平台的原理及应用,旨在为MAb发展研究提供一定理论参考。

摘要： 采用噬菌体展示技术结合生物信息学定位牛乳α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的B细胞表位,分析不同类型表位之间的氨基酸组成和空间分布规律。结果表明,某些线性表位是构象性表位的组成部分,IgE与IgG表位存在共同区域。本研究得到的表位是牛乳过敏诊断和预后的候选生物标志物,也可用于指导于低致敏性乳制品的开发。

摘要： 本研究旨在获得高效特异性的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3(P80)非结构蛋白的纳米抗体.用BVDV灭活疫苗免疫羊驼,测得抗体效价后分离全血中的淋巴细胞.通过噬菌体展示技术构建羊驼重链抗体可变区噬菌体展示文库.经过连续3次吸附-洗脱-扩增的生物筛淘,从中挑选出与BVDV-NS3蛋白结合的噬菌体.对经菌液PCR、琼脂糖凝胶电泳鉴定到的单域抗体(VHH)克隆进行基因测序和同源性比对.用ELISA方法验证筛选出的纳米抗体的反应原性,找到与BVDV-NS3蛋白亲和力高的纳米抗体.结果表明,获得插入率为92.8％、库容为1.84×1014 CFU/mL的噬菌体展示文库.ELISA结果和氨基酸序列分析显示,成功得到1条与BVDV-NS3蛋白具有良好反应性且与VHH同源性较高的纳米抗体序列.本研究利用大肠杆菌成功表达BVDV-NS3抗原蛋白,建立BVDV纳米抗体噬菌体展示文库,筛选到针对BVDV重要抗原蛋白相应的纳米抗体且与VHH同源性较高.试验结果为牛病毒性腹泻/黏膜病的防控、诊断、治疗及纳米抗体药物的研制提供参考.

摘要： 真菌毒素是真菌在生长繁殖过程中产生的次级有毒代谢产物,具有致癌、致畸、致突变的毒性作用,严重危害人体健康,因此对其检测与控制非常重要.现有检测方法普遍存在样品预处理复杂、成本高、操作繁琐等缺点,且会对操作人员和环境造成潜在二次危害.新型纳米材料可以提高真菌毒素的检测灵敏度,噬菌体展示技术可以筛选真菌毒素的模拟表位和抗真菌毒素的重组抗体,降低检测成本,达到无毒检测真菌毒素的目的.文章综述了近年来不同种类的纳米材料与噬菌体展示技术以及两者相互结合在真菌毒素检测方面的应用,并对其未来的发展进行了展望.

摘要： 目的:基于一起暴发疫情,构建人源噬菌体单链抗体库,筛选特异性GⅡ.17型诺如病毒(NoV)单链抗体(scFv),并进行表达纯化及鉴定.方法:采集患者粪便或肛拭子样本,RT-PCR检测肠道病毒核酸,PCR扩增NoV衣壳蛋白N/S区和P区序列,Mega 4.0构建系统进化树.采集并分离患者恢复期外周血PBMC,Trizol提取总RNA;RT-PCR扩增抗体重轻链可变区基因,重叠扩增PCR将两者拼接为scFv基因,将其克隆至噬菌粒载体pCANTAB-5E构建人源噬菌体单链抗体库.以GⅡ.17 P颗粒为固相抗原,对抗体库进行筛选及鉴定,将阳性克隆进行原核表达及纯化,ELISA鉴定其生物特性.结果:此次疫情中,83.3％(15/18)粪便或肛拭子样本呈GⅡ型NoV核酸阳性,经序列比对分析确定由GⅡ.17型感染导致;成功构建人源噬菌体单链抗体库,以GⅡ.17 P颗粒为抗原筛选得到11株序列不同且正确的阳性克隆;经原核表达获得9株与GⅡ.17 P颗粒具有良好亲和力的高纯度scFv,且与GⅡ.4和GI.3 P颗粒均有较好的特异性交叉反应,其中7株具有较强阻断GⅡ.17 P颗粒与HBGA受体结合的能力.结论:此次疫情为一次GⅡ.17型NoV引发的急性胃肠炎暴发,构建了人源噬菌体抗体库,经淘筛及表达纯化,最终获得9株GⅡ.17型NoV单链抗体,其中7株具有较强的中和能力.

摘要： 猪流行性腹泻病(porcine epidemic diarrhea,PED)是一种高度接触性肠道传染性疫病,主要危害1周龄以内的仔猪,仔猪感染死亡率高达100％,是目前危害世界养猪业的主要疫病之一.本研究旨在制备针对猪流行性腹泻病毒S蛋白的特异性纳米抗体并鉴定其结合活性.作者原核表达并纯化PEDV S1蛋白,将纯化后的PEDV S1重组蛋白免疫双峰驼,第4次免疫后分离其外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞RNA,反转录得到cDNA,通过巢式PCR扩增VHH片段,并构建至pCANTAB-5E载体中,电转化至TG1感受态细胞,得到VHH噬菌体抗体展示文库;随后,对构建的噬菌体抗体展示文库进行救援和3轮富集,利用噬菌体展示技术从中筛选针对PEDV S蛋白纳米抗体,通过ELISA验证筛选的纳米抗体的特异性和结合力.通过Western blot和间接免疫荧光验证纳米抗体与PEDV的结合活性.结果 显示:成功表达并纯化PEDV S1蛋白,经4次免疫后,双峰驼血清中的特异性抗体效价达到了1:256000.构建的噬菌体展示文库的库容量为2.1×107,阳性率85％;对噬菌体展示文库3轮的淘选富集后,最终筛选出6株氨基酸序列不同的纳米抗体,ELISA结果显示,6株纳米抗体均对PEDV S1重组蛋白具有良好的结合力与特异性.随后验证了Nb3能够与PEDV结合,表明其具有良好的活性.成功筛选到针对PEDV S1蛋白的特异性纳米抗体,所筛选纳米抗体有望用于PED的诊断和治疗,同时为PEDV的致病机制研究提供抗体材料.

摘要： 归巢肽是伴随噬菌体展示技术的发展而被证实具有归巢作用的多肽,它能特异性地识别和结合一些受体或标志物。研究表明,部分归巢肽还具有穿膜特性,能够使蛋白质、RNA、DNA等生物大分子特异性进入到细胞或者组织内发挥作用,在临床诊断和治疗中具有高效性、特异性等优势。本文简要综述对归巢穿膜肽的概述、筛选、分类以及在临床诊断及治疗应用中所获得的研究进展。

摘要： 抗原表位的筛选和鉴定是抗原分子结构和功能、抗原-抗体反应机制、分子疫苗、分子诊断技术研究的基础,在疫病防制中起着重要作用。噬菌体展示技术是20世纪80年代逐步建立并发展起来的一种用于基因表达与筛选和改造功能性多肽的分子生物学新技术。因其具有高库容、高效、方便、灵活、快速、准确等优点,成为当前抗原表位筛选与鉴定的首要方法。本文就噬茵体展示技术在动物病毒抗原表位筛选中的应用作一简要综述,以期为我国动物病毒病的综合防控提供参考。

摘要： 目的：以人树突状细胞(DCs)为靶细胞，从人肝癌T7噬菌体cDNA文库中筛选能与DCs结合的分子。方法：应用噬菌体展示技术，以人DCs为固相筛选细胞，对人肝癌T7噬菌体cDNA文库进行4轮生物淘选，将所得噬菌斑PCR扩增产物测序后行同源性分析。结果：将随机筛选到的100个噬菌斑行PCR扩增，经测序和同源性分析，证实人肝癌T7噬菌体cDNA文库中与DCs结合的分子有：人铁蛋白轻链、甲胎蛋白、α1微球蛋白前体，G蛋白偶联受体116和跨膜蛋白49等。结论：从人肝癌T7噬菌体cDNA文库中筛选到能与人DCs结合的分子，为阐明人肝癌发生发展过程中肿瘤免疫逃逸相关机制奠定了基础。

摘要： 噬菌体展示技术(phage display techniques,PDT)是由美国Missouri大学Smith博士于1985年首先提出并建立和发展起来的利用丝状噬菌体在体外表达外源基因的一项新技术,即以经过改建好的噬菌体为载体,把外源肽或蛋白质显露在噬菌体表面,并使表达产物保持良好的空间构象,由此可提供了可用亲和免疫纯化法筛选表达特异肽或蛋白质的噬菌体,通过测定插入噬菌体的DNA序列,即可明确所表达的外源物质的氨基酸序列.本文论述了噬菌体展示技术的产生与发展、噬菌体展示技术的研究应用以及其应用前景。

摘要： 噬菌体展示技术是一种有效的药物靶点筛选工具,可用其筛选中药的药物靶点蛋白。其原理是将外源性蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达。药物靶点是药物在体内的作用结合位点,是药物筛选和新药研究的基础,良好的药物靶点是发现性质优良药物的基础。

摘要： 目的：本研究旨在制备抗庆大霉素(Gentamicin,Gent)禽源单链抗体,从而建立快速检测Gent的ic-ELISA和FPIA检测方法. 方法：利用噬菌体展示技术筛选出两株特异性较高的禽源scFv(S-1和S-5). 结果：间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测时,S-1和S-2的IC50分别为12.418ng/mL和14.674ng/mL.与卡那霉素和阿米卡星的交叉反应不超过0.04％,添加回收检测显示组内回收率在70.70％～118.09％之间,组间回收率在60.91％～118.04％之间.荧光偏振(FPIA)检测时,scFv的IC50为4.98±0.7μg/mL,最低检测限为0.16μg/mL,检测范围(IC20～IC80)为0.59～57.56μg/mL. 结论：本研究成功建立了基于抗庆大霉素禽源scFv的ic-ELISA和FPIA检测方法,论证了这一新型抗体研发平台与不同免疫检测技术相结合,在药物残留检测中的可行性.

摘要： 目的：应用噬菌体展示技术构建重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体(scFv)库,并从抗体库中进行筛选. 方法：利用重组人IL-4R(rhIL-4R)蛋白免疫BALB/c小鼠,提取总RNA,反转录PCR扩增VH和VL基因,经重叠延伸PCR扩增出带有限制性酶切位点的scFv,用限制性内切酶SfiⅠ和NotⅠ分别双酶切scFv和pCANTAB5E载体,利用T4DNA连接酶进行连接,转入感受态细菌E.coli TG1中制备转化子;在培养基中培养得到噬菌体单链抗体库;通过3轮富集和筛选,选择抗原亲和力最强的克隆进行测序分析. 结果：经过3轮筛选,构建了库容为2×108的rhIL-4R单链抗体库,测序结果显示anti-rhIL-4R蛋白scFv基因全长741bp,编码247个氨基酸.通过VBASE2数据库分析,anti-rhIL-4R蛋白的VH和VL基因序列都存在3个互补决定区和4个骨架区. 结论：成功构建了抗rhIL-4R蛋白噬菌体scFv库.

摘要： 禽戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)在遗传性和抗原性与猪HEVs具有一定的相关性，而且禽HEV衣壳蛋白上存在着禽和猪HEV共有的抗原表位。前期我们制备的抗禽HEV单抗3E8可以与猪HEV的衣壳蛋白发生交叉反应，说明3E8识别的抗原表位可能是禽和猪HEV共有的抗原表位。因此为了鉴定该单抗3E8识别的抗原表位，本研究用噬菌体随机环七肽库进行三轮淘选鉴定其识别的抗原表位。经三轮淘选测序后，得到一个线性多肽IPHD，与猪HEV衣壳蛋白442IPHD445完全一致，同时与禽HEV衣壳蛋白372VPHD375高度同源，通过人工合成不同的多肽作为包被抗原，间接ELISA鉴定。证明IPHD是禽、猪HEV衣壳蛋白一个共有抗原表位，且P、H为决定性氨基酸，I、D为辅助性氨基酸。本研究对研发HEV的诊断试剂及表位标记疫苗有重要意义。

摘要： 选择猪瘟病毒石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术以T7select415-1b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(SM-E2库和HCLV-E2库)。通过生物淘选和噬菌体原位杂交技术,采用7株猪瘟单克隆抗体和1株猪瘟高免血清分别对构建的SM-E2库和HCLV-E2库进行抗原表位筛选。共筛选到了5条与E2基因高度同源的序列,分别为TAVSPTTLR、YYEP、TTWKEYSH、GGQ(V)VK和PDGLPHY高度同源的序列。结果表明,TAVSPTTLR、YYEP和TTWKEYSH序列与目前已知E2蛋白表位一致,说明它们是E2蛋白上的优势表位;GGQ(V)VK和PDGLPHY序列与预测表位一致,推测是E2蛋白上潜在抗原表位。

摘要： 目的：通过构建猪IFN-γ的噬菌体展示禽源scFv抗体文库,制备高特异性的scFv抗体.方法：1、构建猪IFN-γ的禽源噬菌体展示抗体文库.免疫SPF鸡4次后,提取SPF鸡脾脏mRNA,反转录为cDNA后,以cDNA为模板扩增抗体重链可变区和轻链可变区基因,并进一步经融合PCR扩增单链抗体(scFv)基因.scFv与pCATAB5E均通过SfiI/NotI酶切后,scFv克隆至pCATAB5E噬菌粒载体,构建噬菌体展示抗体文库,随机挑取的10个克隆;2、抗体基因的大量表达.将随机挑取的10个克隆的抗体基因克隆至原核表达载体pET30a,优化诱导表达条件,并用Ni+柱进行纯化.结果：在噬菌体展示抗体文库中随机挑取的10个克隆,反应性均很高;诱导表达结果显示20°C,0.4mM IPTG,10h为最佳表达条件;可溶性scFv抗体的终浓度为5mg/mL,经ELISA、Western blot和间接免疫荧光检测反应性良好,与鼠源单抗平行比较发现,鸡scFv反应性较鼠源单抗高.结论：本研究构建了猪IFN-γ的噬菌体展示鸡源scFv抗体文库,并制备高特异性的scFv抗体;同时与鼠源单抗进行比较,初步确认了禽源单抗的特殊优势;这些研究结果支持了构建禽源单克隆抗体研发平台的设想,不失为一种有效的抗体研发替代途径.

摘要： 目的：通过构建猪IFN-γ的噬菌体展示禽源scFv抗体文库,制备高特异性的scFv抗体.方法：1、构建猪IFN-γ的禽源噬菌体展示抗体文库.免疫SPF鸡4次后,提取SPF鸡脾脏mRNA,反转录为cDNA后,以cDNA为模板扩增抗体重链可变区和轻链可变区基因,并进一步经融合PCR扩增单链抗体(scFv)基因.scFv与pCATAB5E均通过SfiI/NotI酶切后,scFv克隆至pCATAB5E噬菌粒载体,构建噬菌体展示抗体文库,随机挑取的10个克隆;2、抗体基因的大量表达.将随机挑取的10个克隆的抗体基因克隆至原核表达载体pET30a,优化诱导表达条件,并用Ni+柱进行纯化.结果：在噬菌体展示抗体文库中随机挑取的10个克隆,反应性均很高;诱导表达结果显示20°C,0.4mM IPTG,10h为最佳表达条件;可溶性scFv抗体的终浓度为5mg/mL,经ELISA、Western blot和间接免疫荧光检测反应性良好,与鼠源单抗平行比较发现,鸡scFv反应性较鼠源单抗高.结论：本研究构建了猪IFN-γ的噬菌体展示鸡源scFv抗体文库,并制备高特异性的scFv抗体;同时与鼠源单抗进行比较,初步确认了禽源单抗的特殊优势;这些研究结果支持了构建禽源单克隆抗体研发平台的设想,不失为一种有效的抗体研发替代途径.

摘要： 本发明提供噬菌体展示介导的免疫多重定量PCR方法，所述方法包括以下步骤：将捕获抗体包被于孔板的孔底，将包被抗体的孔板加入封闭液封闭，加入重组噬菌体，使得重组噬菌体与所述捕获抗体充分结合，在所述重组噬菌体与所述捕获抗体充分结合后，裂解结合后的所述重组噬菌体，收集洗脱液，作为多重定量PCR反应模板，和进行实时荧光多重定量PCR反应。本发明方法将抗原抗体反应可以转化为DNA检测，并显着提高检测的通量。

摘要： 本发明公开了去除半抗原噬菌体展示纳米抗体文库中表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的方法。该方法包括(1)偶联所述载体蛋白的磁珠与所述半抗原噬菌体展示纳米抗体文库进行孵育获得结合所述表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的磁珠；(2)采用磁性分离去除所述结合所述表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的磁珠，从而去除半抗原噬菌体展示纳米抗体文库中表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体。该方法提高了小分子纳米抗体的筛选效率。

摘要： 本发明公开了一株具有广谱强裂解性的新型魏氏梭菌噬菌体及包含该噬菌体的噬菌体组合物及其在兔魏氏梭菌病中的应用，该噬菌体不仅可用于制备预防和治疗魏氏梭菌病的药物，还可用于制备兔饲料添加剂、以及消毒剂等。该噬菌体vB_CpeP_PMQ04还可与其他噬菌体，如新型大肠杆菌噬菌体复配形成综合疗效更好的噬菌体组合物。该噬菌体及其噬菌体组合物使用安全、无副作用，在解决因产气荚膜梭菌和大肠杆菌造成的感染的同时，避免了因使用抗生素造成的抗生素残留、以及诱发耐药性产气荚膜梭菌和大肠杆菌的问题，同时还响应了国家替抗减抗的方案。

摘要： 本发明涉及使用源自M13噬菌体的pIX的工程化杂交噬菌体载体来生成pIX噬菌体展示文库并使用该文库来产生一种或多种非抗体肽或蛋白质的组合物和方法。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域。利用噬菌体展示技术原理将外源抗原基因与丝状噬菌体III基因蛋白融合展示于噬菌体颗粒尾部，将抗原表位与丝状噬菌体VIII基因蛋白融合展示于丝状噬菌体颗粒表面。用展示有外源抗原及抗原表位的噬菌体颗粒为免疫原制备抗体。该技术拓宽了噬菌体展示技术的应用范围，同时也为抗体的制备提供了新途径。保护范围：1.一种用噬菌体展示技术展示抗原用以制备单克隆抗体及多克隆抗体的方法。2.一种用噬菌体展示技术展示人心肌肌钙蛋白抗原及其抗原表位用以制备cTnI单克隆抗体及多克隆抗体的方法。3.一种pIII型噬菌体展示载体pFD5。4一种噬菌体展示融合表达载体pFD5-cTnI。5一种pVIII型噬菌体展示融合表达载体PC89-cTnI95～108。6.将展示有cTnI及cTnI95～108的噬菌体颗粒作免疫原，免疫新西兰白兔获得cTnI抗体。

摘要： 本发明公开了一种基于噬菌体展示技术开发的ALK纳米抗体及其应用。本发明所提供的纳米抗体，包含由CDR1、CDR2和CDR3组成的互补决定区；CDR1的氨基酸序列为SEQ ID No.1的第21‑28位；CDR2的氨基酸序列为SEQ ID No.1的第46‑52位；CDR3的氨基酸序列为SEQ ID No.1的第91‑107位。本发明利用骆驼PBMC细胞，构建出骆驼纳米抗体天然文库，并利用噬菌体展示技术，从文库中筛选获得了高亲和力的ALK纳米抗体噬菌体克隆，转化到大肠杆菌表达体系中进行大量表达，有效降低了ALK抗体的开发和生产成本，本发明ALK纳米抗体经临床样本的免疫组化验证，具有更高的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明涉及使用噬菌体展示技术的特异性结合痤疮细菌的人抗体及其用途，更具体地，涉及特异性结合(抗原)的抗体；包含其的人抗体；使用其的噬菌体展示技术；以及使用其的化妆品组合物和药物组合物。

摘要： 本发明公开了一种噬菌体展示技术筛选可穿越血‑脑脊液屏障的多肽，它涉及蛋白质多肽技术领域。本发明的生物活性肽能经血液循环跨越血‑脑脊液屏障，渗入脑脊液并在脑脊液中富集。本发明涉及一种通过噬菌体展示技术获得跨越血‑脑脊液屏障的肽的方法。所述的多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1‑4所示，分别为CMRTHHMQC、CMWTHHYQC、CMRTHHYQC、CMWTHHMQC。利用本发明所述的肽构建具有靶向性的药物载体，从而使药物载体于脑脊液中富集，可用于脑部疾病的诊断及治疗。

摘要： 本发明公开了一种基于噬菌体展示技术定位的加工破坏β‑伴大豆球蛋白α’亚基的抗原区域及其筛选方法，所述抗原区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。本发明利用一系列生物信息学软件并参照PDB数据库已解析的β‑伴大豆球蛋白三维晶体结构，以噬菌体展示技术研究加工破坏β‑伴大豆球蛋白的抗原区域，通过在噬菌体表面呈现β‑伴大豆球蛋白α’亚基全长及其overlapping分段蛋白，对不同加工方法导致β‑伴大豆球蛋白α’亚基抗原性降低的区域进行精确定位。为食品工业提供加工方法筛选的理论依据，也可以进一步发展出快速检测加工食品脱敏效果的应用产品。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域。利用噬菌体展示技术原理将外源抗原基因与丝状噬菌体III基因蛋白融合展示于噬菌体颗粒尾部，将抗原表位与丝状噬菌体VIII基因蛋白融合展示于丝状噬菌体颗粒表面。用展示有外源抗原及抗原表位的噬菌体颗粒为免疫原制备抗体。该技术拓宽了噬菌体展示技术的应用范围，同时也为抗体的制备提供了新途径。保护范围：1.一种用噬菌体展示技术展示抗原用以制备单克隆抗体及多克隆抗体的方法。2.一种用噬菌体展示技术展示人心肌肌钙蛋白抗原及其抗原表位用以制备cTnI单克隆抗体及多克隆抗体的方法。3.一种pIII型噬菌体展示载体pFD5。4.一种噬菌体展示融合表达载体pFD5－cTnI。5.一种pVIII型噬菌体展示融合表达载体PC89－cTnI95～108。6.将展示有cTnI及cTnI95～108的噬菌体颗粒作免疫原，免疫新西兰白兔获得cTnI抗体。