声明
致谢
摘要
第一章文献综述
1．1氨基酸液肥
1．1．1可溶性生物有机液肥成分构成
1．1．2氨基酸液肥适用对象及功效
1．1．3氨基酸液肥研究进展
1．1．4氨基酸液肥的使用现状
1．1．5氨基酸液肥的研制工艺与技术
1．1．6氨基酸液肥的发展前景
1．2酸性蛋白酶
1．2．1酸性蛋白酶的分类
1．2．2酸性蛋白酶的理化性质
1．2．3影响酸性蛋白酶产量的因素
1．2．4酸性蛋白酶产生菌的育种
1．2．5酸性蛋白酶的应用
1．3立题背景及意义
1．4课题的研究思路和主要研究内容
第二章高产酸性蛋白酶菌株的筛选及鉴定
2．1引言
2．2材料与仪器
2．2．1仪器与设备
2．2．2材料与试剂
2．2．3培养基制备
2．3产酸性蛋白酶酋株的筛选
2．3．1实验方法
2．3．2菌种分离纯化
2．3．3菌种保存
2．3．4生长曲线的绘制
2．3．5菌落和细胞形态观察
2．3．6生理生化试验分析
2．3．7分子生物学鉴定
2．4结果与分析
2．4．1菌种筛选
2．4．2 Zju-C菌生长曲线绘制
2．4．3菌落和细胞的形态特征
2．4．4生理生化试验结果及分析
2．4．5分子生物学鉴定
2．5本章小结
第三章菌种的复合物理诱变及选育
3．1引言
3．2材料与仪器
3．2．1发酵菌株
3．2．2培养基制备
3．2．3仪器与设备
3．3实验方法
3．3．1复筛发酵培养基装液量的筛选
3．3．2种子培养
3．3．3诱变处理
3．3．4中间培养
3．3．5初筛
3．3．6复筛
3．3．7传代稳定性
3．3．8蛋白酶活力的测定
3．3．9诱变前后生长曲线和生长速率的变化
3．3．10数据处理
3．4结果与分析
3．4．1复筛发酵培养基装液量的筛选
3．4．2紫外诱变
3．4．3紫外诱变初筛
3．4．4紫外诱变复筛及传代稳定性
3．4．5复合热诱变和热筛选
3．4．6诱变前后生长曲线和比生长速率的变化
3．5本章小结
第四章高产酸性蛋白酶培养基及发酵条件的优化
4．1引言
4．2材料与仪器
4．2．1发酵菌株
4．2．2材料与试剂
4．2．3培养基与化学试剂
4．2．4仪器与设备
4．3实验方法
4．3．1种子液制备
4．3．2摇瓶发酵培养
4．3．3酸性蛋白酶酶活测定
4．3．4产酶曲线绘制
4．4 Zju-CUV-R2菌产酶条件的优化
4．4．1单因素试验
4．4．2 PB试验设计
4．4．4响应面优化试验
4．4．5数据处理
4．5结果与分析
4．5．1产酶曲线绘制
4．5．2单因素试验分析
4．5．3 PB实验设计
4．5．4最陡爬坡实验
4．5．5 Box-Behnke优化
4．5．6摇瓶发酵试验验证
4．6本章小结
第五章产酶小试放大及氨基酸原液的初步研制
5．1前言
5．2材料和仪器
5．2．1发酵菌株
5．2．2材料与试剂
5．2．3主要培养基
5．2．4主要仪器
5．3实验方法
5．3．1种子液液制备
5．3．2间歇式发酵方法
5．3．3优化后产酶曲线绘制
5．3．4酶活测定方法
5．3．5游离氨基酸含量测定方法
5．3．6粗酶液酶活性质研究
5．4氨基酸原液初步研制
5．4．1摇瓶酶解试验
5．4．2发酵罐酶解放大试验
5．4．3对作物的应用效果初探
5．4．4数据处理
5．5结果与分析
5．5．1通气量和搅拌转速对目标菌产酶效果的影响
5．5．2产酶曲线绘制
5．5．3粗酶液性质研究结果与分析
5．5．4氨基酸原液初步研制
5．6本章小结
第六章结论与展望
6．1结论
6．2展望
参考文献
作者简介
在学期间所取得的科研成果
附录
