法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2015-08-12
授权
授权
2013-08-07
实质审查的生效 IPC(主分类):A23L1/30 申请日:20130419
实质审查的生效
2013-07-10
公开
公开
技术领域
本发明涉及功能性食品技术领域，具体的涉及一种含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉。
背景技术
现代社会人们生活节奏越来越快，工作压力、饮食不均衡等各种因素造成人体处于亚健康状态，特别是由于长期食用油脂含量高、热量高的食物而运动量减少，造成营养过剩等各种症状，如富贵病。目前富贵病已成为危害国人健康的主要病种。据统计，中国中老年人15～20%便秘，六成是白领；据卫生部调查，中国有22%的人超重，6000多万人因肥胖而就医，高血压2亿多人，糖尿病5000多万人，高血脂1.6亿人。全国每天由于“富贵病”导致死亡人数超过1.5万，占死亡总人数的70%以上，由于富贵病治疗的费用占疾病负担的60%以上，包括美国、英国等西方国家医务工作者也多次发表调查报告，对富裕起来的我国富贵病的发展情况感到忧虑，预计2015年富贵病在中国更广泛流行。因而预防富贵病这种营养过剩或有营养过剩风险的意义与补充营养一样重要，已成为研究的热点。
蛋白质粉最早源于欧美国家的营养调控师对运动员增强运动能力、缓解疲劳等方面的研究，是根据人体细胞、组织、肌肉的运动特点而诞生的，主要成分为蛋白质，蛋白质对增强体质、提高免疫力、保持精力旺盛都发挥着重要作用。因其效果显著，食用方便，备受瞩目，一度是不少国家运动队不得公开的秘密武器。随着科学的发展，营养学家们对蛋白质粉不断改进，逐渐制造出适用人群范围更为广泛的新型营养食品，并将其从运动队推广至寻常百姓家。目前市面上的蛋白质粉的主要原料大多为大豆分离蛋白粉和/或乳清蛋白粉，配以磷脂、多糖、矿物质、维生素、大豆多肽，或添加少量巧克力味、水果味、香兰素等香精，或添加甜味剂等物质，例如：安利纽崔莱蛋白质粉，其主要原料为大豆分离蛋白、浓缩乳蛋白、卵磷脂、二氧化硅；汤臣倍健蛋白质粉，其主要原料：大豆分离蛋白、乳清蛋白、大豆磷脂、植脂末这些蛋白质粉；无限极蛋白质粉，大豆分离蛋白、麦芽粉、大豆肽粉、麦芽糊精、二氧化硅、麦香粉末香精、安赛蜜等，上述各种蛋白质粉的配方相对比较简单，其功效主要是补充蛋白等营养成分以改善体质、缓解疲劳、增强体能等，保健功效相对单一，特别是没有针对现代社会出现的营养过剩、血脂过高这种富贵病的预防功效的蛋白质粉。
科学研究发现，共轭亚油酸是一种天然存在于生物体内的混合活性物质，安全、无毒，具有提高免疫力、降低胆固醇、抗动脉粥样硬化、提高骨骼密度、减重等功效，可用于制备预防富贵病的保健食品。如中国发明专利（CN101731335A）公开了一种富含共轭亚油酸酸奶及制备方法，中国发明专利（CN1686532A）公开了一种含有共轭亚油酸的减肥人群用营养素。然而共轭亚油酸不稳定，如加工成粉末状并添加到食品中则制备工艺复杂，而且具有一定的涩味和气味，口感较差不利于食用，因而亟需一种能够替代共轭亚油酸并且具有改善人体内营养分配、辅助降血脂、能够预防富贵病同时具有增强体质、提高免疫力等多种功效，并且方便人们冲调食用的功能性蛋白质粉。但目前国内外尚未有关于含有共轭亚油酸甘油酯的蛋白质粉的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于避免现有技术中的不足之处而提供一种含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
提供一种含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，所述蛋白质粉由以下重量份的原料组成：
大豆分离蛋白粉 50～88份
乳清蛋白粉 5～30份
共轭亚油酸甘油酯微囊粉 3～20份
粉末磷脂 1～10份；
其中，所述粉末磷脂是由30%卵磷脂、24%脑磷脂和16%心磷脂混合制成的粉末状混合物；
所述蛋白质粉的制备方法：
1）称量：
按照上述配方量分别称取各原料；
2）粗混
将粉状磷脂与共轭亚油酸甘油酯微囊粉以等量递增的方式投入混合机中进行混合，形成一次混合物；然后将所述一次混合物与乳清蛋白粉以等量递增的方式进行混合，形成二次混合物；再将所述二次混合物与大豆分离蛋白粉以等量递增的方式混合均匀，形成三次混合物，混合过程中，控制温度18～26℃，湿度≤50%；
3）过筛
将混合均匀的所述三次混合物经过40目不锈钢筛网，将原料中的杂质、异物排出干净；
4）总混
将上述过筛后的原料重新投入混合机中充分混合，控制温度18～26℃，湿度≤50%，最终形成蛋白质粉；
5）检测
将蛋白质粉分装于双层塑料袋中，取样检测水分，塑料袋中通入臭氧，摇晃均匀，用扎带分别扎紧两个塑料袋的袋口；
6）分装
将检测合格的蛋白质粉进行分装。
优选的，所述蛋白质粉由以下重量份的原料组成：
大豆分离蛋白粉 50份
乳清蛋白粉 28份
共轭亚油酸甘油酯微囊粉 20份
粉末磷脂 2份。
优选的，所述蛋白质粉由以下重量份的原料组成：
大豆分离蛋白粉 88份
乳清蛋白粉 6份
共轭亚油酸甘油酯微囊粉 4份
粉末磷脂 2份。
优选的，所述蛋白质粉由以下重量份的原料组成：
大豆分离蛋白粉 60份
乳清蛋白粉 25份
共轭亚油酸甘油酯微囊粉 10份
粉末磷脂 5份。
另一优选的，所述蛋白质粉由以下重量份的原料组成：
大豆分离蛋白粉 60份
乳清蛋白粉 20份
共轭亚油酸甘油酯微囊粉 17份
粉末磷脂 3份。
另一优选的，所述蛋白质粉由以下重量份的原料组成：
大豆分离蛋白粉 75份
乳清蛋白粉 5份
共轭亚油酸甘油酯微囊粉 14份
粉末磷脂 6份。
上述配方中，大豆分离蛋白粉是植物来源蛋白质中唯一的优质蛋白质，其富含人脑所需的优质蛋白和8种必需氨基酸，有助于增强脑血管的机能，具有降低血液中的胆固醇，提高骨矿物质含量和骨密度的功效；
乳清蛋白粉来自于牛奶，是目前国际公认的优质动物蛋白，营养成分丰富，乳糖含量低，水解后吸收快，能提供大量必需氨基酸，有利于肌肉的增长和力量的增加；
粉状磷脂提取自大豆，其具有增强免疫力、缓解体力疲劳、降血脂、调整血糖等功效，被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”；
共轭亚油酸甘油酯是共轭亚油酸的稳定衍生物，在体内代谢为共轭亚油酸，具有降低胆固醇、抗动脉粥样硬化、提高免疫力、提高骨骼密度、改善营养分配、减重等功效；共轭亚油酸甘油酯微囊粉和粉状磷脂中皆含有健康的油脂类物质，在食品中可起乳化剂的作用，帮助大豆分离蛋白粉和乳清蛋白粉的小颗粒更好的分散，使蛋白质粉更容易冲调，并起到稳定蛋白质粉冲调后的饮品状态的作用，还具有滑爽的脂肪质感和奶油香味。
本发明的有益效果：
本发明提供了一种含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，其配方包括50～88份大豆分离蛋白粉、5～30份乳清蛋白粉、3～20份共轭亚油酸甘油酯微囊粉，1～10份粉状磷脂。本发明的配方在现有技术的基础上添加了共轭亚油酸甘油酯这一成分，其具有改善营养分配、降低胆固醇、抗动脉粥样硬化，有助于降低血脂的功效，而且具有提高免疫力、控制体重的效果，这对于随着生活水平日渐提高，出现营养过剩或存在营养过剩风险的人群提供了一种能够预防和改善富贵病的功能性食品；本发明配方中的粉状磷脂和共轭亚油酸甘油酯微囊粉中皆含有健康的油脂类物质，在食品中可起乳化剂的作用，能够帮助大豆分离蛋白粉和乳清蛋白粉的小颗粒更好的分散，并起到稳定蛋白质粉冲调后的饮品状态的作用，从而改善了制成的粉末状产品的分散性和口感，使口感更爽滑、圆润、细腻，这种蛋白质粉更易冲调，方便人们食用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
一种含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，由以下重量份的原料组成：
其中，粉末磷脂是由30%卵磷脂、24%脑磷脂和16%心磷脂混合制成的粉末状混合物；
共轭亚油酸甘油酯微囊粉购于德国科宁公司（Cognis），型号为Tonalin 60 WDP；
蛋白质粉的制备方法：
1）称量：
按照上述配方量分别称取各原料；
2）粗混
将粉状磷脂与共轭亚油酸甘油酯微囊粉以等量递增的方式投入混合机中进行混合，形成一次混合物；然后将所述一次混合物与乳清蛋白粉以等量递增的方式进行混合，形成二次混合物；再将所述二次混合物与大豆分离蛋白粉以等量递增的方式混合均匀，形成三次混合物，混合过程中，控制温度18～26℃，湿度≤50%；
3）过筛
将混合均匀的三次混合物经过40目不锈钢筛网，将原料中的杂质、异物排出干净；
4）总混
将上述过筛后的原料重新投入混合机中充分混合，控制温度18～26℃，湿度≤50%，最终形成蛋白质粉；
5）检测
将蛋白质粉分装于双层塑料袋中，取样检测水分，塑料袋中通入臭氧，摇晃均匀，用扎带分别扎紧两个塑料袋的袋口；
6）分装
将检测合格的蛋白质粉进行分装，蛋白质粉成品的最小包装量为10g±0.30g/包，具体根据产品的设计要求和生产情况进行适当的选择和调整，务求蛋白质粉最小包装压封美观、密封性好。
实施例2
本实施例的主要技术方案与实施例1的相同，不同之处在于：
含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，由以下重量份的原料组成：
实施例3
本实施例的主要技术方案与实施例1的相同，不同之处在于：
含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，由以下重量份的原料组成：
实施例4
本实施例的主要技术方案与实施例1的相同，不同之处在于：
含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，由以下重量份的原料组成：
实施例5
本实施例的主要技术方案与实施例1的相同，不同之处在于：
含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉，由以下重量份的原料组成：
将实施例1至5制备的蛋白质粉分别进行以下动物学实验：
（一）提高免疫力功能测评动物实验
1、实验动物 NIH小鼠20－22g，单一性别，SPF级，每组40只，共四组。
2、剂量分组及受试样品给予时间
样品人体推荐摄入量为每人每日10g，每人按60kg体重计，相当于每日167mg/kg·bw。实验设受试样品三个剂量组和一个阴性对照组，以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组（中剂量），二个剂量组即5倍（低剂量）、30倍（高剂量），设阴性对照组。受试样品用去离子水配制，受试样品给予时间35天。阴性对照组为去离子水。
3、试验方法
动物在实验室条件下检疫一周后，以下每个实验均为随机将40只鼠分成四组，每组10只，每日灌胃给予受试物，给样量每周根据体重增减调整，实验时间为4周。
3..1 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验（MTT法）
脾细胞悬液制备：无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank's液平皿中，用镊子轻轻将脾磨碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，或用4层纱布将脾磨碎，用Hank's液洗2次，每次离心10min（1000r/min）。弃上清将细胞浆弹起，加入0.5mL灭菌水20秒，裂解红细胞后再加入0.5mL2倍Hank’s液及8mLHank’s液，1000r/min，10min离心，然后将细胞悬浮于1mL的完全培养液中，用1%冰醋酸稀释后计数（活细胞数应在95%以上），调整细胞浓度为3～5×106个/mL。
淋巴细胞增殖反应：将每一份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1mL，一孔加75μL ConA 液（相当于7.5μg/mL），另一孔作为对照，置5％CO2，37℃CO2孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT（5mg/mL）50μL /孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每个孔作3个平行孔，用酶标仪，以570nm波长测定光密度值。也可将溶解液直接移入2mL比色杯中，721分光光度计上在波长570nm测定OD值。
3.2、小鼠迟发型变态反应（足跖增厚法）
试验结束前的第4天免疫动物及血清分离，用2％的绵羊红细胞腹腔注射0.2ml致敏动物，5天后测定左后足跖部厚度，接着于该处皮下注射20％（v/v）绵羊红细胞（20ul/只）注射后24h测定左后足跖厚度三次，得平均值。
3.3、小鼠血清溶血素的测定
末次给药后，用1：4稀释得印度墨汁，按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁（10ml/kg），注入墨汁后2、10min，分别从内眦静脉丛取血20μL，并立即将其加到 2mL 0.1%Na2CO3溶液中。用721分光光度计在600nm波长处测光密度值（OD），以Na2CO3溶液作空白对照。
3.4、NK细胞活性测定：
脾细胞悬液得制备（效应细胞）：无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，用镊子轻轻将脾磨碎，制成单细胞悬液。经200目晒网过滤。Hank’s液洗3次，每次离心10min（1000r/min）。然后将细胞悬浮于2ml的完全培养中，用台酚兰染色计数活细胞数（应在95％以上），最后用RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为0.5×107个/ml。
NK细胞活性检测：取浓度为1х105个/ml的靶细胞和效应细胞各100ul（效靶比50：1），加入U型96孔培养板中；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100ul，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％NP40或2.5％Triton各100ul；上述各项均设三个平行孔，于37℃，5％CO2培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清100ul置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100ul，根据室温不同反应3～10min，每孔加入1mol/L的HCl 30ul，在酶标仪490nm处测定光密度值（OD）。
数据处理：所有数据均经SPSS统计软件进行方差分析。
4、实验结果
4.1日常情况观察和体重：各给药组小鼠在实验期间体重均正常增长无显著差异（P>0.05)、精神状态等未见异常。
4.2 含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化反应、脾淋巴细胞转化反应为阴性结果、小鼠血清溶血素抗体滴定反应、NK细胞活性的影响（参见表1）：含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对脾淋巴细胞转化反应的影响为阴性结果；对小鼠迟发型变态反应的影响，试验租中各剂量组小鼠的受试部位厚度明显增加，与对照组比较经统计学处理，差别有极显著性意义，表明含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对小鼠迟发型变态反应的影响试验结果为阳性；对小鼠血清溶血素抗体滴定反应影响中，试验组的中剂量组的抗体体积高于对照组，经统计学处理，差别有显著性意义，表明含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对小鼠血清溶血素抗体滴定反应影响试验结果为阳性；对NK细胞活性的影响，试验组的低剂量组的NK细胞活性高于对照组，差别有显著性意义，高、中剂量的NK细胞活性的高于对照组，差别显著性意义有极显著性意义，表明含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对NK细胞活性影响试验结果为阳性。
表1. 含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉增强免疫力试验影响（ ）
5、结论
含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉能够提高绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应能力（足跖增厚法）；使受试动物血清溶血素抗体滴度反应增加，增加受试动物的NK细胞活性。因此，结果表明含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质具有增强免疫力的保健功效。
（二）辅助降血脂功能测评动物实验
1、实验原理
用高胆固醇和脂类饲料喂养动物可形成脂代谢紊乱动物模型，再给予动物受试样品或同时给予受试样品，可检测受试样品对高脂血症的影响，并可判定受试样品对脂质的吸收、脂蛋白的形成、脂质的降解或排泄产生的影响。
2、实验方法
2.1实验动物：健康成年Wistar种雄性大鼠（150－200g），SPF级，每组10只。
2.2高脂饲料：78.8％基础饲料、1％胆固醇、10％蛋黄粉和10％猪油、0.2％胆盐
2.3剂量分组及受试样品给予时间
样品人体推荐摄入量为每人每日10g，每人按60kg体重计，相当于每日167mg/kg·bw。实验设三个剂量组和一个高脂对照组，以人体推荐量的5倍为低剂量组，另设10倍、30倍二个剂量组，分别为中、高剂量组。受试样品用去离子水配制，连续给样35d。定期称量体重，与实验结束禁食16h，取尾血测定各项血脂指标。
2.4主要仪器与试剂：动物天平、电子天平、低速离心机、722型分光光度计、恒温水浴锅、微量加样器、手术器械、测定TC、TG、HDL-C的试剂盒均由中生北控生物科技股份有限公司提供。
2.5 实验数据统计：所有数据均经SPSS统计软件进行方差分析，方差齐用方差分析，方差不齐用秩和检验。
3、实验结果
3.1含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对大鼠体重的影响：如表2所示，受试样品各剂量组动物的体重与高脂对照组比较傲，无显著差异（P>0.05)。
表2. 含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对大鼠体重的影响（）
3.2含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉对大鼠血脂含量的影响
3.2.1 实验前大鼠血脂含量水平（如表3所示）
表3. 实验前大鼠血脂含量水平
3.2.2 实验后大鼠血脂含量水平（如表4所示）
表4. 实验后大鼠血脂含量水平
与高血脂对照组比较：* P<0.05。
4、结论
本实验表明，经口给予大鼠不同剂量的含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉样品，与高脂对照组相比较，样品中、高剂量组能显著降低高脂大鼠的TC、TG水平（P<0.05）。故根据以上实验结果判定，含有共轭亚油酸甘油酯的功能性蛋白质粉具有辅助降血脂功能，能够改善人体内营养分配，从而具有预防富贵病的保健功效。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
机译： 包含共轭亚油酸甘油酯的生物活性组合物和生产生物共轭亚油酸的方法
机译： 包含共轭亚油酸甘油酯的生物活性组合物和生产生物共轭亚油酸的方法
机译： 基于牛奶中含有共轭亚油酸甘油酯的物质组成的食物成分
