共轭亚油酸甘油酯检测技术标准研究

摘要

目的：本研究旨在制备出高纯度的共轭亚油酸甘油三酯（CLA-TG）、1,3-共轭亚油酸甘油二酯（1,3-CLA-DG）、1,2-共轭亚油酸甘油二酯（1,2-CLA-DG）和共轭亚油酸甘油一酯（CLA-MG），为共轭亚油酸甘油酯的定性定量检测提供对照品。建立共轭亚油酸甘油酯的高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）检测方法。
　　方法：以富含亚油酸的红花籽油为原料，用碱异构化方法将其中的亚油酸转化成共轭亚油酸，并用尿素包合法对共轭亚油酸进行纯化。以脂肪酶Novozyme435为催化剂，在无溶剂体系下催化共轭亚油酸与甘油进行酯化反应生成共轭亚油酸甘油酯。采用柱层析法、薄层色谱法和液相制备色谱法对共轭亚油酸甘油酯进行分离、纯化，制备出了高纯度的CLA-TG、1,3-CLA-DG、1,2-CLA-DG、CLA-MG对照品。采用红外光谱法、气相色谱法、液相色谱法对四种共轭亚油酸甘油酯对照品进行结构鉴定和纯度分析。采用HPLC-ELSD法，通过优化色谱柱、流动相、检测器参数等条件，建立共轭亚油酸甘油酯分析方法。
　　结果：碱异构化合成共轭亚油酸并用尿素包合法纯化后制备出了含量高达95%的共轭亚油酸，酶法合成共轭亚油酸甘油酯后进一步分离、纯化制备出了 CLA-TG、1,3-CLA-DG、1,2-CLA-DG、CLA-MG对照品。红外光谱显示四种共轭亚油酸甘油酯的结构中都含有羰基、C=C-C=C共轭双键、顺式CHR=CHR’和反式CHR=CHR’等基团，气相色谱法检测得出四种共轭亚油酸甘油酯中CLA的含量均达到了99%，液相色谱法检测得出四种共轭亚油酸甘油酯的纯度均达到了99%。本研究建立的共轭亚油酸甘油酯的HPLC-ELSD法线性相关性好，检测时间短，四种共轭亚油酸甘油酯的检出限分别为0.06、0.20、0.20、0.25 mg/kg，定量限分别为0.6、1.2、1.2、1.2 mg/kg，相对标准偏差在1.46%~4.71%之间。
　　结论：成功制备出了高纯度的CLA-TG、1,3-CLA-DG、1,2-CLA-DG、CLA-MG对照品。红外光谱法确认了四种共轭亚油酸甘油酯的结构，气相色谱法和液相色谱法确认了四种共轭亚油酸甘油酯的纯度均达到了对照品的要求。建立了检测共轭亚油酸甘油酯的HPLC-ELSD法，该方法操作简单、双对数值线性相关性良好、检测精密度好、灵敏度高，可对共轭亚油酸甘油酯产品进行快速检测分析，对甘油酯产品的生产具有指导性意义。

目录

引言

第一章 共轭亚油酸甘油酯的制备

1.1共轭亚油酸的制备及纯化

1.2酶法合成共轭亚油酸甘油酯

1.3共轭亚油酸甘油酯的分离及纯化

第二章 共轭亚油酸甘油酯对照品的鉴定

2.1材料与方法

2.2结果

2.3结果分析

第三章 共轭亚油酸甘油酯的液相色谱法测定

3.1材料与方法

3.2结果与讨论

3.3结论

结论

参考文献

综述：共轭亚油酸甘油酯的研究进展

攻读学位期间的研究成果

缩略词表

致谢

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