分割剂量电离辐射对卵巢癌耐药细胞自噬性死亡的影响

摘要

目的:研究不同电离辐射方式对卵巢癌耐药细胞株SKVCR自噬性细胞死亡的影响,并探讨其相关机制.方法:实验分为假照组、分割照射组(2 Gy·d-1×5)及单次照射组(10 Gy·d-1×1).采用MTT法检测各组细胞对长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)及顺铂(DDP)的药物敏感性,MDC染色及流式细胞术检测自噬发生率的变化,实时荧光定量PCR方法检测自噬特异基因MAPLC3B和Akt1 mRNA水平,Westernblotting法检测自噬相关蛋白MAPLC3B表达和蛋白激酶B(PKB,Akt1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其下游基因P70 S6K、磷酸化AKTI/mTOR/P70 S6K表达的变化.结果:与假照组比较,电离辐射使SKVCR细胞对VCR、VP-16的药物敏感性提高,分割照射组更明显(P＜0.05).与假照组比较,电离辐射使细胞自噬发生率升高,尤其以分割照射组升高更明显(P＜0.05)；与假照组比较,照射后MAPLC3B mRNA升高、Akt1 mRNA下降(P＜0.05)；照射后MAPLC3B蛋白表达升高,Akt1、mTOR、p-mTOR、P70 S6K、p-P70 S6K蛋白表达均不同程度下降,分割照射组较单次照射组下降更明显(P＜0.05).结论:不同的电离辐射作用方式可以引起卵巢癌细胞发生自噬性死亡,其机制主要涉及Akt1/mTOR/S6K通路.