mdr1shRNA逆转膀胱癌耐药细胞株BIU-87/ADM对ADM的耐药性

摘要

目的 构建抑制mdr1基因表达的短发卡状RNA(shRNA)真核表达载体,研究shRNA逆转膀胱肿瘤细胞多药耐药的可行性.方法 针对mdr1基因已知mRNA序列不同位点,选择2个靶序列,构建靶向mdr1 shRNA真核表达载体,通过脂质体介导转染膀胱肿瘤耐药细胞株BIU-87/ADM,利用RT-PCR和免疫细胞化学检测mdr1 mRNA及P糖蛋白(P-gp)表达水平的变化,MTT法检测BIU-87/ADM细胞对ADM的敏感性.结果 构建的2种重组质粒pshRNA-A、pshRNA-B均明显抑制BIU-87/ADM细胞株mdr1基因表达(P<0.05),免疫细胞化学检测显示P-gp表达明显下调(P<0.05),MMT法检测显示膀胱癌耐药株BIU-87/ADM对化疗药物ADM的敏感性明显增强,对ADM药物敏感性的相对逆转效率分别为52.02%和54.87%(P<0.05).结论 shRNA可有效抑制BIU-87/ADM细胞mdr1 mRNA的转录和P-gp蛋白的表达,恢复BIU-87/ ADM细胞对ADM的敏感性,给逆转膀胱肿瘤的多药耐药提供了一种新的方法.