HO-1通过慢病毒调控K562-ADM耐药细胞株逆转耐药及其机制研究

摘要

目的：慢病毒调控HO-1,探讨慢病毒对HO-1及其耐药相关基因在K562细胞、K562-ADM细胞中表达及其机制研究. 方法：以阿霉素浓度递增的方法诱导人白血病细胞株K562对其产生耐药的细胞(K562-ADM),MTT法确定其耐药倍数.流式细胞术检测细胞凋亡.采用慢病毒介导转基因手段和RNA沉默靶向调控HO-1表达.采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562-ADM细胞中慢病毒转染HO-1基因表达及小干扰RNA沉默HO-1基因表达情况.实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法和Western blot方法检测TopoⅡα、HO-1、bcl-2、Mdr1mRNA和相关蛋白在耐药和敏感细胞中的表达. 结果与结论：通过药物浓度递增法成功建立了对阿霉素耐药的人白血病细胞株K562-ADM初步探讨了其耐药机制可能与TopoⅡα、HO-1及Mdr1高表达有关。通过联合阿霉素和慢病毒沉默HO-1的表达，可以逆转阿霉素耐药。