亚麻籽粕制备小分子抗氧化活性肽

摘要

目的:以亚麻籽粕为原料,提取蛋白并制备抗氧化活性肽.方法:利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶酶解蛋白,并通过测定总抗氧化能力(Ferric ion reducing antioxidant power,FRAP)、羟自由基清除能力和2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除能力表征酶解产物的活性.使用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳和凝胶色谱法分析蛋白和酶解产物的分子质量(mw)分布.利用高效液相色谱-串联质谱联用技术分析鉴定最具有抗氧化活性组分.结果 表明,对于高分子质量(3～10 kDa)和低分子质量(＜3 kDa)的蛋白多肽,低分子质量多肽(碱性蛋白酶)的抗氧化活性优于其他.10 mg/mL低分子质量多肽(碱性蛋白酶)的FRAP相当于(1.77±0.03) mmol/I的FeSO4,羟自由基清除率为(57.13±1.47)％,清除ABTS阳离子自由基的能力(以Trolox当量浓度计算)为(1.19±0.03) mmol/L.通过凝胶色谱分离的最具抗氧化活性组分F2的蛋白质量占整体组分的20％,0.1 mg/mL组分F2的FRAP相当于0.29 mmol/L的FeSO4,占整体组分活性的45.3％.亚麻籽粕蛋白氨基酸组成齐全,含人体所需的8种必需氨基酸,是一种优质的植物蛋白;蛋白酶解的特异性和肽段分子质量共同影响亚麻籽蛋白多肽的抗氧化活性;亚麻籽粕可以制备高抗氧化活性多肽.