酶法水解荞麦球蛋白制备抗氧化活性肽的研究

摘要

分别采用3种蛋白酶水解荞麦球蛋白,以酶解液水解度和对O_2~-·的清除率为指标,研究酶解养麦球蛋白的最佳工艺.并进一步对酶解产物进行Sephadex G-25凝胶柱层析分离,然后对其各分离组分清除O_2~-·、·OH和DPPH·的能力及分子量分布进行研究.结果显示:采用碱性蛋白酶水解荞麦球蛋白效果优于胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,最佳酶解工艺条件为:加酶量20000U/g,温度55℃,pH9,底物浓度5%,反应时间2h;经柱层析分离得到的分子量小于1000D的组分Ⅲ显示了较强的抗氧化能力.其清除O_2~-·、·OH与DPPH·的IC_(50)分别为0.75、0.897、0.38mg/ml,高于分子量较大的组分Ⅰ和未经分离的养麦球蛋白酶解液.