副溶血弧菌的gyrB基因环介导的恒温扩增技术检测方法的研究

摘要

目的 建立一种适合基层实验室应用和开展的快速检测副溶血弧菌的DNA环介导的恒温扩增法(LAMP).方法 针对副溶血弧菌的gyrB基因序列设计了4条引物(2条内引物、2条外引物),并对扩增反应条件进行了优化.结果 整个检测过程仪需1.5 h,可通过肉眼目测或电泳检测判断结果 ;对3株种系背景明确的副溶血弧菌不同实验对照株、23株副溶血弧菌地方分离株和32株其他肠道菌进行了检测,具有很高的特异性;该方法 的最低检测限为24 cfu/ml,具有良好的敏感性;应用于61份贝类海产品的现场检测,阳性率为100%,与实时荧光定量PCR方法 的检测结果 相符,阳性率高于传统的培养鉴定方法 .结论 本方法 具有快速、灵敏、特异、简便、经济等特点,适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用,具有较高的推广价值.