海藻酸钠固定化根霉脂肪酶的制备及其性质

摘要

研究了以海藻酸钠为载体，用包埋法制备固定化德氏根霉（Rhizopus delemar）脂肪酶的条件．将酶粉和海藻酸钠溶于pH5．0的HAc—NaAc缓冲溶液，用注射器将此混合液滴入到0．05mol／L无菌CaCl2溶液中，静置固化45min，经过滤、洗涤和干燥后得到球状固定化酶．固定化酶的活力回收约为34．1％．酶学性质研究表明，此固定化酶的热稳定性较好．游离酶在60℃下保温1h已完全丧失活力，而固定化酶在100℃下保温1h仅损失36．2％的活力，在100℃下保温6h仍可保持46．8％的酶活力．酶经固定化后，其橄榄油水解反应的最适温度由40℃上升至90℃，Km值由13．8mg／ml下降为8．1mg／ml．常见有机溶剂对固定化酶的活力影响较小．将该固定化脂肪酶用于非水溶剂中正戊酸异戊酯的合成，重复使用6次后，固定化酶仍保持95％的酶活力．