华根霉产合成脂肪酶同工酶在固态发酵中的生产纯化及性质研究

摘要

华根霉CCTCCM201021在固态发酵中培养,通过发酵过程跟踪发现全细胞脂肪酶的水解活力和合成活力存在不对应性;考察了橄榄油对固态发酵产脂肪酶的影响,发现橄榄油不仅是菌体生长所必需的一种碳源而且是水解脂肪酶和合成脂肪酶分泌的双重诱导物.合成脂肪酶是结合在细胞膜上的.采用水解活力和合成活力两种纯化标准,经过硫酸铵沉淀,辛基疏水层析,苯基疏水层析以及凝胶过滤层析,得到了合成脂肪酶同工酶Ⅰ和Ⅱ,分子量分别是58KDa和63KDa.脂肪酶Ⅰ和Ⅱ水解pNPP的最适pH和温度分别是pH8.0,40°C和9.0,45°C.脂肪酶Ⅰ和Ⅱ催化短链酯合成的转化率基本都可以达到90％。