羊乳中牛乳成分的直接实时环介导等温扩增检测

摘要

根据线粒体保守序列选取牛、羊特异性引物,建立无需核酸提取的直接实时环介导等温扩增(LAMP)技术,用于羊乳中掺入牛乳成分的检测。结果表明,所建立的LAMP方法特异性好,对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,对牛、羊的检测灵敏度可达0.07 pg/μL和0.7 pg/μL,在掺假样品(即二元混合乳)中直接实时LAMP技术可检测到掺入1%的牛乳成分。通过对10种市售羊乳制品检测显示,直接实时LAMP方法与经DNA提取的实时LAMP方法检测结果一致。因此建立的直接实时LAMP技术无需核酸提取,样品经简单处理即可作为模板直接进行LAMP扩增,简化了样品前处理过程,缩短了检测时间,适用于羊乳制品中牛乳成分的快速检测。