酶解法提取葵花脱脂粕中绿原酸的工艺研究

摘要

本试验以葵花脱脂粕为原料，采用酶解与超声波辅助相结合的方法，提取葵花脱脂粕中的绿原酸，为拓宽葵花综合利用途径，实现绿原酸工厂化生产奠定基础。本论文主要完成以下研究，结果如下： 1.用乙醇提取葵花脱脂粕中的绿原酸。研究乙醇浓度、浸提时间、物料比以及pH对绿原酸提取率的影响，得到最适的工艺参数为：乙醇浓度75％，提取时间1小时，物料比1:14，pH为2的时候效果最好，绿原酸提取率可达到1.32％。 2.根据葵花脱脂粕的组成及各成分的性质，选择纤维素酶、蛋白酶、植物精提复合酶SPE-005及纤维素酶和蛋白酶复合，进行绿原酸的酶解提取工艺研究，结果表明纤维素酶和蛋白酶联合作用能显著提高绿原酸的提取率，最适的工艺参数为：酶解温度45℃，酶解时间1h，纤维素酶用量4mL，蛋白酶用量2mL，绿原酸提取率达到1.90％。 3.利用超声波辅助酶法作用于葵花脱脂粕，研究超声时间、超声强度、纤维素酶用量和蛋白酶用量对绿原酸提取率的影响，得到绿原酸提取的最佳工艺参数为：超声功率240W/m2、超声时间10min、纤维素酶用量6mL、蛋白酶2.5mL。绿原酸的提取率可以达到2.16％，可以较完全的提取葵花脱脂粕中的绿原酸。 4.以绿原酸粗提品为原料，进行绿原酸的纯化试验，研究结果表明，醋酸乙酯是萃取绿原酸的最适溶剂；pH为2.0的酸性条件下萃取4次，每次萃取5分钟，可以将溶液中的大部分绿原酸萃取出来，萃取率达到75.4％。利用高效液相色谱仪对萃取的绿原酸样品进行检测，结果表明纯度可以达到72.1％。 5.初步研究了纤维素酶对葵花脱脂粕的酶促反应动力学参数，求出其米氏常数，为改进酶解法提取葵花脱脂粕中绿原酸提供理论参考。

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文摘

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论文说明：图表目录

声明

第一章文献综述

1.1引 言

1.2葵花脱脂粕中的主要生物活性物质

1.3绿原酸结构、理化性质及应用

1.4绿原酸的提取

1.5绿原酸的分离

1.6绿原酸的检测

1.7本课题的研究意义、目的及要完成的工作

第二章绿原酸醇提工艺条件的优化

2.1材料与方法

2.2结果与分析

2.2.1单因素试验结果分析

2.2.2绿原酸醇提工艺的正交试验结果分析

2.3小结

第三章酶制剂的筛选

3.1材料与方法

3.2结果与分析

3.2.1空白试验

3.2.2单酶作用对绿原酸提取率的影响

3.2.3纤维素酶和蛋白酶共同作用对绿原酸提取率的影响

3.3小结

第四章超声辅助酶法提取葵花脱脂粕中绿原酸的工艺研究

4.1材料与方法

4.2结果与分析

4.2.1单因素试验结果分析

4.2.2超声辅助酶法提取工艺正交试验结果分析

4.3小结

第五章绿原酸的纯化与检测

5.1材料与方法

5.2结果与分析

5.2.1绿原酸粗品在醋酸乙酯-水体系中的D值测定

5.2.2时间对萃取结果的影响

5.2.3 pH值对萃取结果的影响

5.2.4萃取次数对绿原酸结果的影响

5.3小结

第六章葵花脱脂粕纤维素酶酶促反应动力学研究

6.1材料与方法

6.2结果与分析

6.2.1葵花脱脂粕中葡萄糖溶出时间试验

6.2.2纤维素酶Km测定

6.3小结

第七章结论与讨论

7.1结论

7.2讨论

参考文献

附录 试液的配制：

致谢

作者简历