一种蔗汁或糖浆中淀粉含量的测定方法

摘要

本发明提供了一种蔗汁或糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：1）将蔗汁或糖浆加热煮沸，抽滤，得蔗汁或糖浆的清夜；2）向步骤1）中的清夜中加入高温淀粉酶，水浴反应；3）在系列比色管中加入盐酸与步骤2）中的清夜，混匀；4）再向系列比色管中分别加入不同体积的系列淀粉溶液；5）再向系列比色管中分别加入碘液；6）测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；7）取步骤1）中的清夜，向其中加入盐酸、碘液，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。本发明的测定方法快速准确，误差较小，操作简单。

说明书

技术领域

本发明涉及一种蔗汁或糖浆中淀粉含量的测定方法。

背景技术

淀粉是蔗汁中主要的多糖类物质之一，大部分以颗粒形态分散于蔗汁中；在澄清过程中部分被除去，其余淀粉受热糊化溶解于糖浆中，一部分在蔗糖结晶中被吸收，剩余则聚集在糖蜜内。蔗汁中的淀粉颗粒受热溶解变为粘稠糊状物，会增加糖汁的粘度、降低沉降效率、阻碍蔗糖结晶、影响白糖质量，因此其含量测定对克服因淀粉带来的不利影响具有重要意义。

蔗汁中淀粉含量的通用测定方法，主要有碘显色法和酶解法两种。酶解法利用淀粉酶将淀粉水解，再用盐酸进一步水解为葡萄糖，然后按还原糖测定法测定还原糖的含量，换算成淀粉的含量；此种方法反应慢，历时长，重现性差；碘显色法利用淀粉与碘作用的显色反应来测定淀粉，也分为两种：一种是利用酒精沉淀蔗汁中的淀粉，离心分离洗涤去除杂质，然后将提纯的淀粉溶解后加碘液测定；该方法步骤繁琐，人为操作误差较大，且历时长，实验操作需要高速离心设备，不适宜在糖厂操作；另一种方法是将蔗汁煮沸抽滤后直接加碘反应测定，该方法以水做空白对照，忽略了蔗汁中色素、脂类、还原糖对于淀粉-碘络合物的影响，虽然操作简便快捷，但误差较大，结果可信度低。

发明内容

本发明的目的是提供一种蔗汁或糖浆中淀粉含量的测定方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种蔗汁或糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将蔗汁或糖浆加热煮沸，抽滤，得蔗汁或糖浆的清夜；

2）向步骤1）中的清夜中加入高温淀粉酶，水浴反应；

3）在系列比色管中加入盐酸与步骤2）中的清夜，混匀；

4）再向系列比色管中分别加入不同体积的系列淀粉溶液；

5）再向系列比色管中分别加入碘液；

6）测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）取步骤1）中的清夜，向其中加入盐酸、碘液，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

步骤1）中，加热煮沸的时间为1-15min。

步骤2）中，高温淀粉酶的体积与清夜的体积比为5-7μl：1ml。

步骤2）中，水浴反应的温度为70-90℃，水浴反应的时间为10-30min。

步骤3）中，加入的盐酸的浓度为1mol/L，盐酸体积为0.8-1ml，加入的清夜的体积为1.6-2ml。

步骤3）中，系列比色管为6支25ml比色管。

步骤4）中，不同体积的系列淀粉溶液为体积分别为0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为800-1000μg/mL的淀粉溶液。

步骤5）中，碘液的体积为4-5ml，碘液中的溶质为15mmol/L的KI,5mmol/L的I2。

步骤5）中，加入碘液后，再加入水将体积补足至10ml。

步骤7）中，取的清夜的体积为1.6-2ml，加入的盐酸的浓度为1mol/L，体积为0.8-1ml；加入的碘液的体积为4-5ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI,5mmol/L的I₂，加入盐酸与碘液后，然后加入水将体积补足至10ml。

本发明的有益效果是：本发明的测定方法快速准确，误差较小，操作简单。

具体实施方式

一种蔗汁或糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将经80-120目筛的蔗汁或糖浆加热煮沸1-15min，抽滤，得蔗汁或糖浆的清夜；

2）向步骤1）中的清夜中加入高温淀粉酶，70-90℃水浴反应10-30min；其中，高温淀粉酶的体积与清夜的体积比为5-7μl：1ml；

3）在6个比色管中均加入步骤2）中的清夜1.6-2ml、以及0.8-1ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为800-1000g/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入4-5ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）取待测淀粉含量的蔗汁或糖浆1.6-2ml，向其中加入0.8-1ml 的1mol/L盐酸、4-5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，利用步骤5）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

所述的比色管的容积为25ml。

下面结合具体实施例进一步说明本发明：

实施例1：

一种蔗汁中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经80目筛抽滤的蔗汁加热煮沸15min，抽滤，得蔗汁清夜；

2）取20ml的蔗汁清夜，向其中加入100μl高温淀粉酶，80℃水浴反应20min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜2ml、以及1ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为1000μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入5ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、5ml碘液，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，然后加入水将体积补足至10ml，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=39.462x+0.1542，R²=0.9975，测得蔗汁清夜中的淀粉含量为11.16 mg/100ml，此为蔗汁清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的蔗汁清夜中加入12mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入12mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、5ml碘液、12mg/100ml的淀粉，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，然后加入水将体积补足至10ml，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量，最后，测得蔗汁清夜中的淀粉含量22.49mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为97.1%。

实施例2：

一种蔗汁中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经90目筛抽滤的蔗汁加热煮沸15min，抽滤，得蔗汁清夜；

2）取20ml的蔗汁清夜，向其中加入120μl高温淀粉酶，70℃水浴反应10min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜1.6ml、以及0.8ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为800μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入4ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜1.8ml，向其中加入0.8ml 的1mol/L盐酸、4ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=41.122x-0.0885，R²=0.9998，测得蔗汁清夜中的淀粉含量为13.98 mg/100ml，此为蔗汁清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的蔗汁清夜中加入15mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入15mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜，向其中加入0.8ml 的1mol/L盐酸、4ml碘液、15mg/100ml的淀粉，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量，最后，测得蔗汁清夜中的淀粉含量29.52mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为101.9%。

实施例3：

一种蔗汁中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经100目筛抽滤的蔗汁加热煮沸10min，抽滤，得蔗汁清夜；

2）取20ml的蔗汁清夜，向其中加入140μl高温淀粉酶，90℃水浴反应10min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜1.8ml、以及0.9ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为900μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入4.5ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜1.8ml，向其中加入0.9ml 的1mol/L盐酸、4.5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=37.3x-0.0461，R²=0.9996测得蔗汁清夜中的淀粉含量为2.69mg/100ml，此为蔗汁清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的蔗汁清夜中加入2mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入2mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜1.8ml，向其中加入0.9ml 的1mol/L盐酸、2mg/100ml 淀粉，4.5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。最后，测得蔗汁清夜中的淀粉含量4.50 mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为96.0%。

实施例4：

一种蔗汁中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经90目筛抽滤的蔗汁加热煮沸10min，抽滤，得蔗汁清夜；

2）取20ml的蔗汁清夜，向其中加入100μl高温淀粉酶，80℃水浴反应20min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜2ml、以及1ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为1000μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入5ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=37.419x+0.3957，R²=0.9980测得蔗汁清夜中的淀粉含量为2.15 mg/100ml，此为蔗汁清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的蔗汁清夜中加入2mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入2mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的蔗汁清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、2mg/100ml 淀粉，5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。最后，测得蔗汁清夜中的淀粉含量4.29 mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为103.2%。

实施例5：

一种糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经80目筛抽滤的糖浆加热煮沸1min，抽滤，得糖浆清夜；

2）取20ml的糖浆清夜，向其中加入100μl高温淀粉酶，80℃水浴反应20min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜2ml、以及1ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为1000μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入5ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=40.098x-0.2585，R²=0.9993测得糖浆清夜中的淀粉含量为17.18mg/100ml，此为糖浆清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的糖浆清夜中加入16mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入16mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、碘液、16mg/100ml的淀粉，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量，最后，测得糖浆清夜中的淀粉含量33.62mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为101.3%。

实施例6：

一种糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经90目筛抽滤的糖浆加热煮沸1.5min，抽滤，得糖浆清夜；

2）取20ml的糖浆清夜，向其中加入120μl高温淀粉酶，70℃水浴反应10min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜1.6ml、以及0.8ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为800μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入4ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜1.6ml，向其中加入0.8ml 的1mol/L盐酸、4ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=36.606x-0.2496，R²=0.9983，测得糖浆清夜中的淀粉含量为3.23 mg/100ml，此为糖浆清夜中的淀粉原含量。

向步骤7）中的糖浆清夜中加入4mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入4mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜，向其中加入0.8ml 的1mol/L盐酸、4ml碘液、4mg/100ml的淀粉，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量，最后，测得糖浆清夜中的淀粉含量7.15mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为98.8%。

实施例7：

一种糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经100目筛抽滤的糖浆加热煮沸10min，抽滤，得糖浆清夜；

2）取20ml的糖浆清夜，向其中加入140μl高温淀粉酶，90℃水浴反应10min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜1.8ml、以及0.9ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为900μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入4.5ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜1.8ml，向其中加入0.9ml 的1mol/L盐酸、4.5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=36.148x+0.1797, R²=0.9977。测得糖浆清夜中的淀粉含量为11.39mg/100ml，此为糖浆清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的糖浆清夜中加入12mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入12mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜1.8ml，向其中加入0.9ml 的1mol/L盐酸、12mg/100ml 淀粉，4.5ml碘液，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。最后，测得糖浆清夜中的淀粉含量23.93 mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为102.3%。

实施例8：

一种糖浆中淀粉含量的测定方法，包括下列步骤：

1）将100ml经90目筛抽滤的糖浆加热煮沸10min，抽滤，得糖浆清夜；

2）取20ml的糖浆清夜，向其中加入100μl高温淀粉酶，80℃水浴反应20min；

3）在6个25ml比色管中加入步骤2）中的清夜2ml、以及1ml 的1mol/L盐酸，混匀；

4）再向6个比色管中分别加入0μl、80μl、160μl、240μl、320μl、400μl，浓度为1000μg/mL的淀粉溶液；

5）再向系列比色管中加入8ml的碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂；

6）于580nm波长下测定步骤5）得到的系列混合物中淀粉的吸光度，绘制吸光度同淀粉含量的工作曲线；

7）向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。

其中，步骤6）得到的工作曲线的回归方程为Y=36.17x+0.0111，R²=0.9991测得糖浆清夜中的淀粉含量为3.48mg/100ml，此为糖浆清夜中的淀粉原含量，

向步骤7）中的糖浆清夜中加入4mg/100ml的淀粉（即加入的淀粉的量为：按照100ml的清夜体积来算，加入4mg的淀粉），再用同样方法测定其中的淀粉含量，即步骤7）变为：

向1个25ml比色管中加入步骤1）中的糖浆清夜2ml，向其中加入1ml 的1mol/L盐酸、4mg/100ml 淀粉，5ml碘液，然后加入水将体积补足至10ml，其中，碘液中的溶质为15mmol/L的KI以及5mmol/L的I₂，利用步骤6）得到的工作曲线测定其中的淀粉含量。最后，测得糖浆清夜中的淀粉含量7.25 mg/100ml。

因此，测定方法得到的回收率为103.2%。

从实施例1-8中可以看出，回收率在96%-103%之间。而相对误差在2.38%以内，表明该方法的测定结果比较准确可靠。

需要说明的是，每个实施例的样品中淀粉含量的测定经过5次测定，取最后的平均值作为淀粉的含量。

为了说明本检测方法的稳定性、可靠性，取实施例3、7的样品的5次重复测定结果，列表如下：

从表1可以看出，蔗汁样品平均测定值为2.6917mg/100ml，标准偏差为2.69%；糖浆样品平均测定值为11.386mg/100ml，标准偏差为2.88%，表明此方法精度较高，符合分析要求。

本发明的测定方法快速准确，误差较小，操作简单。