以重组sICAM-1 Ⅰ～Ⅲ功能区蛋白作抗原制备抗体建立人血清sICAM-1 RIA

摘要

目的:探讨用重组可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)Ⅰ～Ⅲ功能区蛋白免疫家兔制备抗体,及用其建立人血清sICAM-1放免方法(RIA).方法:对获得的抗体和建立的RIA方法学进行鉴定.测定214例正常人和38例初诊Grave's病(GD)患者的sICAM-1.结果:抗体的亲和常数为1.056×108L/mol,最终稀释度为1:14 000.灵敏度为1.4μg/L;非特异结合＜5.0%;批内变异＜5%,批间变异＜8%;样品平均回收率为102.52%;平行实验的稀释曲线与标准曲线基本平行,参考值范围(x±2s)为(175.15±66.88)μg/L,各年龄、性别组间差别无统计学意义(P＞0.05),初诊GD患者血清sICAM-1显著高于对照组(P＜0.01).结论:成功制备出抗体,用其建立了人血清sICAM-1 RIA,具有临床应用前景.