人乳头瘤病毒核酸分型定量检测试剂盒的研发与评估

摘要

目的:评价人乳头瘤病毒核酸分型定量检测试剂盒(荧光PCR法)的检测性能及临床有效性。方法:开发一种用于检测人乳头瘤病毒核酸分型定量的检测试剂盒,验证最低检测限、准确度、精密度等性能指标,同时通过与同类已上市试剂盒的临床一致性评价确认该方法的灵敏度和特异性,考察试剂盒对HPV16型病毒载量检测的临床意义。结果:研制出的试剂盒各项指标均符合要求:试剂盒检测灵敏度较高,经确认和验证过程确定其最低检出限为20 copies/反应;不同HPV型别的分型以及HPV16型载量检测的准确性高,报告量值的线性范围宽;检测与人乳头瘤病毒感染部位相同、症状相似或序列相近的病原体,均未出现交叉反应;临床样本中常见的内源性及外源性干扰物质对试剂盒检测无干扰;经精密度验证,试剂盒检测中批内/批间的CV值均小于5%。经与临床已上市产品进行一致性评价,阳性符合率为91.2%;阴性符合率为98.2%;总符合率为97.7%;Kappa值为0.823。508例HPV16型阳性样本以病理检测结果作为金标准,通过病毒载量预测病理等级CINⅠ-Ⅱ及以上等级的准确率在72.44%。结论:该人乳头瘤病毒核酸分型定量检测试剂盒(荧光PCR法)的主要性能指标均表现良好,并与对比试剂及临床诊断标准有良好的一致性,是一种准确快速的诊断方法,具有较高临床应用价值。