直接竞争ELISA法检测动物源食品中利巴韦林残留

摘要

本研究针对动物源食品中利巴韦林残留的问题,建立了直接竞争酶联免疫分析方法,快速高效地检测利巴韦林残留.采用活泼酯法将利巴韦林(RBV)与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备利巴韦林完全抗原(KLH-RBV),通过免疫新西兰大耳白兔得到多抗血清,经Protein A-Sepharose 4B凝胶柱纯化后得到纯化抗体,在此基础上建立直接竞争ELISA检测方法.该方法的IC50为10.84 ng/mL,最低检测限达0.002 ng/mL,对鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝等实际样品进行检测,加标回收率为80.23％ ～90.07％.采用高效液相色谱法进行验证,两种方法测定结果呈现良好的线性关系(R2≥0.99).本文建立的方法灵敏度高,简便快速,适合现场大批量快速检测动物源食品中利巴韦林残留.