直接竞争ELISA法检测蜂蜜中氯霉素残留

摘要

建立蜂蜜中氯霉素直接竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法.以抗氯霉素单克隆抗体为包被原,氯霉素-辣根过氧化物偶联物为标记物,3,3',5,5'-四甲基联苯胺作显色底物,对其主要影响因素,如标准品稀释液、包被温度、包被抗体稀释倍数等6个因素进行优化,同时还对该方法的准确性和稳定性进行考察.结果表明:所建立的直接竞争ELISA标准曲线方程式为y=-17.425x+97.509,相关系数R2为0.9912,IC50值为0.63 ng/mL,检出限和线性检测范围分别为(0.04±0.01)ng/mL和0.10～4.17 ng/mL;另外整个检测反应过程耗时约为40 min.蜂蜜样品的检出限和定量限分别为0.15 ng/g和0.33 ng/g,添加回收率在97.58％～100.94％之间,批内变异系数和批间变异系数均小于11％,表明该方法具有高精确度和稳定性.