响应面法优化腺苷脱氨酶法快速检测发酵液中的腺苷含量

摘要

通过腺苷脱氨酶(ADA)与靛酚蓝方法结合建立一种高通量快速检测腺苷的新方法.通过单因素、响应面方法优化氢氧化钠、水杨酸、亚硝基铁氰化钠和次氯酸钠的用量,并进行了验证,以最优试剂用量建立腺苷的标准曲线.确定了检测腺苷的最优试剂用量氢氧化钠25.85g/L、水杨酸68.05g/L、亚硝基铁氰化钠2.19g/L和次氯酸钠40.9mL/L,该方法线性范围为0.01 ～ 10mmol/L,加标回收率在95.5％～103.8％之间,RSD精准度在0.9％～3.3％之间.本方法与HPLC法检测发酵液中的腺苷含量结果一致.本方法可以用来快速、高通量的检测发酵液中的腺苷含量.