γ-干扰素对培养人原代结膜及泪腺上皮细胞表达炎症相关因子的影响

摘要

目的了解γ-干扰素(γ-IFN)对体外原代培养的人结膜上皮细胞及泪腺上皮细胞的细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1,CD54)、白细胞介素-1 β(interl-eukin-1 β ,IL-1 β)和白细胞介素-1受体 1 (interleukin-1 receptor 1,IL-1R1)表达的影响,以初步探讨γ-IFN对人结膜及泪腺上皮细胞炎症损伤的作用.方法混合消化液培养法获得人原代结膜上皮细胞,组织块培养法获得人泪腺上皮细胞,免疫组织化学方法鉴定.在细胞培养液中加入γ-IFN,浓度分别为0、30、100、300U*mL-1,37℃培养24h后收集细胞,应用流式细胞学及Western blot检测CD54的表达,Western blot检测IL-1 β及IL-1R1的表达.结果在γ-IFN浓度分别为0、30、100及300U*mL-1条件下,结膜上皮细胞表达CD54的平均荧光强度为4.67、24.1、27.4及31.9;泪腺上皮细胞表达CD54的荧光强度分别为2.50、10.2、21.4及25.6.Western blotting的结果与流式细胞仪检测的结果相符,正常人结膜和泪腺上皮细胞有少量CD54表达,加入IFN-γ后CD54的表达增加,且呈剂量依赖性.Western blot的结果显示正常人结膜上皮细胞有少量IL-1R1表达,加入γ-IFN后IL-1 β及IL-1R1的表达明显增加,且呈剂量依赖性,泪腺上皮细胞未检出IL-1β及IL-1R1的表达.结论γ-IFN可诱导并促使原代培养的正常人结膜上皮细胞和泪腺上皮细胞CD54的表达明显增加,其作用呈剂量依赖性,提示γ-IFN导致的上皮细胞炎症损伤部分是通过CD54介导的.γ-IFN可诱导并促使结膜上皮细胞IL-1 β及IL-1R1的表达明显增加,且呈剂量依赖性,提示结膜上皮细胞本身也是泪液中IL-1的来源之一,且γ-IFN可诱导其生成.