摘要:目的 探讨应用超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxid,SPIO)标记间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的有效性、安全性及可靠性.方法 分离、培养SD大鼠MSCs,通过流式细胞仪分析鉴定表面抗原CD34、CD44.选取第4代MSCs,在Ot(Fe)浓度为25、50、75 μg·ml-1和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine,PLL,0.75 μg·ml-1)的DMEM/F12培养液中,孵育48h,作为3个实验组.通过普鲁士蓝染色、流式细胞仪检测、台盼蓝染色及MTF细胞增殖活性检测SPIO,探讨不同SPIO浓度对MSCs标记效率、免疫学表型、细胞活性及增殖的影响.结果 经Fe浓度为25、50、75μg·ml-1SPIO标记后,普鲁士蓝染色标记效率均在99%以上;3个实验组细胞表面均表达CD4,4,阳性细胞率为超过98%.与对照组相比,Fe浓度为25、50μg·ml-1的SPIO标记的MSCs活细胞比率均在96%左右,细胞增殖活性差异无统计学意义,而Fe浓度为75μg·ml-1时,活细胞比率约为93%,对细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05).培养4周,细胞内检测不到SPIO.结论 全骨髓直接贴壁法可以成功分离、培养MSCs.超顺磁性氧化铁在PLL介导下.能高效地标记MSC,且在合适的浓度范围不会影响MSCs的免疫学表型、细胞活性及增殖能力等生物学特性.细胞内的SPIO,大约在4周左右,即可被完全降解.