phVEGF165原位转染缺血肌肉后hVEGF及其蛋白的表达

摘要

目的探讨慢性下肢动脉缺血的基因治疗. 方法选用血管内皮生长因子(VEGF)作为治疗基因,通过建立实验兔慢性下肢动脉缺血模型,将构建的人VEGF165cDNA真核表达载体phVEGF165注入缺血肌肉内,采用RT-PCR和原位杂交法测定肌肉内hVEGF165基因表达,采用免疫组化和Western印迹法测定其蛋白产物的表达.结果骨骼肌细胞外源性hVEGF165基因表达量于注射后1周达到高峰,持续2～3周.蛋白表达于注射后2周达到高峰,维持至注射后4周. 结论骨骼肌细胞能摄取并表达外源性hVEGF165基因,并能进一步合成分泌hVEG165蛋白.phVEGF165肌肉直接注射的作用时间有限、范围局限,使用安全性较高.