不同冷冻方法对小鼠卵母细胞发育潜能及细胞骨架的影响

摘要

目的 比较不同冷冻方法对不同成熟阶段小鼠卵母细胞复苏、胚胎发育及细胞骨架的影响,寻求最佳的卵母细胞冷冻方法. 方法 分别以SOPS玻璃化及慢速法冷冻小鼠中期(MII)和生发泡期(GV)卵母细胞.解冻复苏后,分别作体外培养成熟(IVM)、体外受精(IVF)或固定作免疫荧光标记,统计复苏率、成熟率、受精率、囊胚率及纺锤体等细胞骨架指标. 结果 玻璃化冷冻组MII卵和GV卵母细胞的复苏率及囊胚率均显著高于慢速冷冻组(P＜0.05).慢速冷冻组中MII卵复苏率显著低于GV卵(40.4% vs 57.1%,P＜0.01).但同一种冷冻方法保存的MII卵和GV卵的受精率及囊胚率相比,均无显著性差异(P＞0.05).两组的GV卵成熟率无显著差异.玻璃化冷冻组GV卵的纺锤体、染色体及纺锤体和染色体正常率均高于慢速冷冻组GV卵但无显著差异. 结论论 玻璃化冷冻能有效改善冻融卵母细胞的复苏及胚胎发育;与MII卵比较,冷冻GV卵对细胞骨架损伤较小;两种冷冻方法均不影响GV卵冻融后成熟.