不同冷冻方法对小鼠不同成熟时期卵母细胞纺锤体的影响

摘要

目的:探讨不同冷冻方法对小鼠成熟期(MⅡ期)及生发泡期(GV期)卵母细胞的纺锤体及胚胎发育的影响。方法:收集GV期和有纺锤体的MⅡ期小鼠卵母细胞,随机分为3组:慢速冷冻-快速复温组、超高速玻璃化冷冻组和对照组(未冷冻组)。Polscope观察解冻0、3、6h后存活的MⅡ期及体外培养成熟GV期卵母细胞的纺锤体,有明显纺锤体的行卵胞浆内单精子显微注射受精,评价胚胎发育。结果:(1)超高速玻璃化GV组的存活率、卵裂率均显著高于慢冻GV组(P<0.05);(2)两冷冻MⅡ组解冻后0、3及6h纺锤体出现率和优质胚胎率均显著低于对照MⅡ组(P<0.05);(3)超高速玻璃化GV组体外成熟后纺锤体的出现率、优质胚胎率均显著高于超高速玻璃化MⅡ组(P<0.05)。结论:慢速冷冻-快速复温法对小鼠不同成熟时期卵母细胞的纺锤体损伤较大;超高速玻璃化冷冻对小鼠生发泡期卵母细胞纺锤体的影响则较小,是一种简便、快捷、高效的冷冻方法。