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丙型肝炎病毒囊膜蛋白基因E1E2在真核细胞中的表达及动物免疫试验

     

摘要

利用DNA重组技术将丙型肝炎病毒(HCV)H77株E1E2囊膜蛋白基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E1E2,用重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒磷酸钙共沉淀法转染293T细胞,包装逆转录病毒假病毒.用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞仪技术(FACS)分析,结果表明,HCV E1E2基因在SP2/0细胞膜上成功表达.将表达E1E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BA LB/c小鼠,经FACS分析免疫鼠血清,成功诱导小鼠产生了抗HCV E1E2蛋白的抗体,Western blot检测结果表明该抗体能与原核系统表达的E2蛋白结合.

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