沉默SOCS3对TNF-α诱导3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的抑制作用

摘要

[目的]运用siRNA沉默小鼠前体脂肪细胞3T3-L1的细胞信号负调控因子3基因(SOCS3),探讨SOCS3在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导3T3-L1细胞凋亡中的作用.[方法]体外培养3T3-L1细胞,用0.20,40,60,80,100,150,200 ng/mL TNF-α处理细胞24 h后,观察细胞凋亡情况.利用脂质体LipofectamineTM 2000,用化学合成的SOCS3小干扰RNA(siRNA)转染3T3-L1细胞,用100 ng/mL TNF-α刺激24 h,荧光显微镜下观察细胞凋亡的变化,RT-PCR检测SOCS3、c-myc和survivin mRNA的表达情况.[结果]SOCS3 siRNA抑制了3T3-L1细胞中SOCS3 mRNA的表达(P<0.05).与空白对照组相比,SOCS3 siRNA组的SOCS3 mRNA表达量极显著减少,c-myc和survivin mRNA的表达水平极显著或显著升高,而脂质体组和阴性对照组无显著差异.[结论]体外试验结果证明,靶向抑制SOCS3基因表达可以有效抑制TNF-α诱导的3T3-L1细胞凋亡.