高温对3T3-L1前体脂肪细胞凋亡和脂肪沉积的影响

摘要

本试验旨在研究高温对3T3-L1前体脂肪细胞凋亡和脂肪沉积的影响.选择3T3-L1前体脂肪细胞为研究材料,分别以37.0和41.5°C处理细胞,4 d后观察细胞凋亡情况,分化处理6 d后,油红O染色观察脂滴的数量,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定热休克蛋白家族基因热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白70(HSP70)、热休克蛋白90(HSP90),细胞凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax),脂肪合成相关基因过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸结合蛋白2(AP2)、CCAAT增强子结合蛋α(CEBPα)和脂肪分解相关基因激素敏感脂酶(HSL)、脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)的mRNA表达量.结果显示:高温处理后,HSP60、HSP70、HSP90的mRNA表达量极显著上调(P<0.01或P<0.001),同时Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量也极显著上调(P<0.01),而Bcl-2/Bax mRNA比值极显著降低(P<0.001).细胞内脂滴大量聚集,油红O染色脂滴着色明显,进一步的研究显示,PPARγ、FAS、ACC、AP2和CEBPα的mRNA表达量也极显著上调(P<0.01或P<0.001),ATGL和HSL的mRNA表达量极显著下调(P<0.001).上述结果说明高温会引起3T3-L1前体脂肪细胞的凋亡,促进脂肪酸的合成,抑制脂肪酸的分解,进而增加3T3-L1前体脂肪细胞的脂质累积.