丹参酮ⅡA联合三氧化二砷对NB4细胞凋亡的影响

摘要

目的 观察丹参酮ⅡA(Tanshinone,TanⅡA)联合三氧化二砷(ATO)对人急性早幼粒细胞白血病细胞株(NB4细胞)凋亡的作用;并通过观察两药联合诱导NB4细胞凋亡时p53、Bcl-2表达的变化,探讨其可能的机制.方法 通过Annexin V FITC/PI荧光染色观察1.0μg·mL-TanⅡA分别联合0.25、0.5、1.0 μmol·L-1的ATO作用于NB4细胞的形态学变化;流式细胞术Annexin V-FITC/PI法测定各组细胞凋亡率;流式细胞仪检测各组细胞p53、Bcl-2的表达.结果 (1) 1.0μg·mL-1 TanⅡA分别与0.5、1.0μmol·L-1的ATO联合作用NB4细胞24、48和72h的凋亡率均较相应单独用药组凋亡率明显增高(P＜0.05);染色荧光显微镜观察1.0μg·mL-1TanⅡA联合1.0μmol·L-1ATO实验组较1.0μmol·L-1ATO对照组72h时更易见到中晚期凋亡细胞和死亡细胞;(2) 1.0μg·mL-1 TanⅡA与0.5、1.0 μmol·L-1的ATO联合作用NB4细胞48h、72h表达p53蛋白的细胞较1.0μmol· L-1ATO单药组明显增多(P＜0.05),作用高峰时间为72h; 1.0μg·mL-1TanⅡA分别与0.25、0.5、1.0 μmol·L-的ATO联合作用NB4细胞24h时,表达Bcl-2蛋白的细胞数较1.0μmol· L-1 ATO单药组显著下降(P＜0.05),且与ATO的浓度呈负相关(r=-0.858,P=0.000).结论 联合1.0μg·mL-1 TanⅡA可增强0.5、1.0μmol·L-1ATO诱导NB4细胞凋亡;TanⅡA联合ATO诱导NB4细胞p53表达增强和Bcl-2表达减少可能是其促凋亡机制之一.