PKC和TPK在血小板激活中的作用

摘要

目的 为了研究蛋白激酶(PKC)和酪氨酸蛋白激酶(TPK)在血小板激活中的作用。方法 用卟啉酸肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)，凝血酶，前列腺素E1(PGE1)和环磷酸腺苷(db-cAMP)，在含二磷酸腺苷(ADP)清除剂的缓冲剂中去激发经阿司匹林切断，32P-NaH2PO4标记冲洗后的牛血小报。40KD(PKC的底物)的磷酸化程度随PMA或凝血酶的浓度而增加。同样26KD、38KD的磷酸也是如此。由于PMA诱导的血小板聚集的同时伴随PKC活化。PGE(腺苷环化酶激活物)不能抑制由50nmol／1 PMA诱导的血小板聚集，db-cAMP，腺苷不能抑制PKC引起的蛋白磷酸化。结果 在碱处理的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGEgel)中发现40KD和57KD多肽比其他多肽更有抗碱力。40KD和57KD多肽的磷酸氨基酸分析指出含有磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸和磷酸酪氨酸。结论 在PMA、凝血酶激活的血小板中，PKC、TPK都发生激活作用，40KD底物是PKC的底物又是TPK的底物．PKC和TPK在血小板聚集中起着重要调节作用。