大肠杆菌表达系统中硒代半胱氨酸表达条件的优化

摘要

目的在大肠杆菌中硒代半胱氨酸(Sec)表达需要四个基因产物,即selA,selB,selC和selD,通过调节这几个基因产物的量来优化Sec的表达条件。方法根据前期已经构建的pBAD33-selAB和pEXT-selC载体,以包含β-半乳糖苷酶基因的Sec表达载体(pN22)研究selAB以及selC的量对Sec表达量的影响,确定硒代半胱氨酸表达的最佳条件。结果共表达selAB、selC基因,Sec掺入效率提高了4.3倍,而传统方法表达pSU-ABC质粒的只提高了2.2倍。结论本方法明显优于采用pSUABC质粒的方法,更有利于Sec的掺入,能促进硒蛋白的表达。