产大环糊精4-α-糖基转移酶的分离纯化及其性质研究

摘要

4-α-糖基转移酶能够作用直链淀粉产生大环糊精.作者研究了重组E.coli DH-5α-TA(保藏编号:3093)产生的 4-α-糖基转移酶的分离纯化及酶学性质.粗酶液经过65 ℃处理20 min、Ni-NTA亲和层析、生物半透膜脱盐得到目标酶,该酶经SDS-PAGE凝胶电泳呈单一蛋白条带,其相对分子质量为57 000.该酶具有较高的转糖基活性且最小作用底物为麦芽糖.酶学性质研究表明:该酶的最适反应温度为75 ℃,最适pH值为7.5;该酶具有良好的耐热性,在70～85 ℃酶活维持在80%以上;酶的pH稳定范围为6.0～8.5.