专一性产γ-环糊精的γ-环糊精葡萄糖基转移酶的突变体及其制备方法

摘要

本发明公开了一种专一性产γ‑环糊精的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶的突变体，将菌株Alkalophilic Bacillus sp.G‑825‑6的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶第211位的酪氨酸突变为亮氨酸，得到突变体Y211L；其制备方法为：(1)设计突变引物，进行突变PCR；(2)将PCR后的质粒进行DpnI酶切后转化至超级感受态细胞XL‑10‑Gold中；(3)挑取阳性克隆进行培养提取质粒DNA；(4)测序确定突变完成。本发明所构建的突变体Y211L，催化淀粉不产生α‑环糊精，产生β‑环糊精的相对含量为3％，产生γ‑环糊精的相对含量为97％，具有较强的γ‑环糊精制备专一性，为γ‑环糊精的规模化生产提供有效保障。