实时荧光PCR法检测食品中梅花鹿成分

摘要

采用实时荧光聚合酶链式反应技术检测食品中梅花鹿成分.通过对梅花鹿基因序列对比分析,选取种间差异大、种内差异小的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因序列作为靶序列,利用Primer Express、Oligo和DNAMAN等软件设计了梅花鹿特异性的引物和TaqMan探针,并用已知样本对引物和TaqMan探针的物种特异性、检测灵敏度进行验证和检测.实验结果表明,引物和探针对梅花鹿成分检测的特异性良好,与其他物种DNA无非目标扩增,对梅花鹿DNA的扩增效率为91.68％,该方法的检测灵敏度达0.42 pg/反应.