CYS3基因的敲除及其对Saccharomyces cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢的影响

摘要

研究胱硫醚y-裂解酶基因CYS3敲除对S.cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢的影响.将编码胱硫醚-γ-裂解酶的CYS3基因和抗性标记基因Zeocin克隆,构建敲除组件CYS3:Zeocin,醋酸锂法将其转化导入S.cerevisiae S288C表达,构建CYS3基因敲除的工程菌.结果表明:摇瓶发酵120 h时,工程菌S.cerevisiae C3和S.cerevisiae S288C的3-甲硫基丙醇生成量分别为0.60 g/L和0.94 g/L,S.cerevisiae C3较野生型S288C的3-甲硫基丙醇生成量降低36.2％.说明CYS3基因敲除对S.cerevisiae的3-甲硫基丙醇有较大影响,并呈现负调节作用.