银耳芽孢总蛋白提取方法的建立

摘要

采用超声波与高压均质破碎细胞,通过显微观察细胞破碎效果、Bradford法测定蛋白含量并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,比较了三羟甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris)-饱和酚法、三氯乙酸(tfichloroacetic acid,TCA)-丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA-丙酮沉淀法提取银耳芽孢总蛋白的效果.结果表明:高压均质的细胞破碎效果优于超声波,3种方法所得到的银耳芽孢总蛋白质量浓度分别为2.33、1.26、1.02 mg/mL,且Tris-饱和酚法经传统考马斯亮蓝染色法染色所得电泳条带亮度及清晰度均优于其他两种方法.因此,Tris-饱和酚法是进行银耳芽孢总蛋白提取的一种有效方法.